賈正勇，宋艷紅

(1.武警8650部隊(duì)醫(yī)院，榆次 030600;2.山西省獸藥監(jiān)察所，太原 030027)

藿香正氣軟膠囊具有解表化濕，理氣和中的功效，臨床用于外感風(fēng)寒、內(nèi)傷濕滯或夏傷暑濕所致的感冒，癥見(jiàn)頭痛昏重、胸膈痞悶、脘腹脹痛、嘔吐泄瀉;胃腸型感冒見(jiàn)上述癥候者。廣藿香作為常用的芳香化濕藥，臨床上用于治療脘腹脹痛、嘔吐腹瀉、痢疾等，在該處方中起著重要作用。藿香正氣軟膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國(guó)藥典》2010年版一部［1］，標(biāo)準(zhǔn)中以薄層色譜法鑒別處方中廣藿香油，未收載含量測(cè)定項(xiàng)。為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，筆者以百秋李醇為定量指標(biāo)，建立了處方中廣藿香油的GC含量測(cè)定方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 6890N氣相色譜儀;氫火焰離子化檢測(cè)器。

1.2 試藥 百秋李醇(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)110722－200404，供含量測(cè)定用)。藿香正氣軟膠囊(天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)2920232、2920362;神威藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)8030721);乙醇、乙酸乙酯、氯仿(分析純，天津市康科德科技有限公司)。水為去離子水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 彈性石英毛細(xì)管柱HP－5(柱長(zhǎng)30 m，內(nèi)徑0.32 mm，膜厚度0.25 μm)色譜柱;程序升溫:初始溫度160℃，保持17 min，以20℃/min的速率升溫至230℃，保持5 min;氣化室溫度:280℃;分流比為5∶1。理論板數(shù)按百秋李醇峰計(jì)算應(yīng)不低于50 000。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 取百秋李醇對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加乙醇制成每1 ml含70 μg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取同一批號(hào)(批號(hào)2920232)樣品內(nèi)容物，取約1 g，精密稱(chēng)定，精密加入氯仿20 ml，稱(chēng)定重量，加熱回流30 min，放冷，稱(chēng)定重量，用氯仿補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 陰性對(duì)照溶液的制備 按處方取除廣藿香油外的各味藥材，按“制法”制成陰性樣品，再按“2.2.2”供試品溶液制備方法，制成陰性對(duì)照溶液。

2.3 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各1 μl，進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果陰性對(duì)照無(wú)干擾，見(jiàn)圖1。

2.4 線性關(guān)系考查 取百秋李醇對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加乙醇制成每1 ml含1.088 mg的對(duì)照品溶液，精密量取0.4、1、2、4 和10 ml，分別置10 ml量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻。分別精密吸取1 μl，注入氣相色譜儀，按“2.1”色譜條件，測(cè)定峰面積，以對(duì)照品進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，求得回歸方程:Y= －21.2+1.7 ×106X(r=0.999 6)。結(jié)果表明百秋李醇在0.043 52 ～1.088 μg 范圍內(nèi)線性良好。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，平均值為85.577;RSD為1.8%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)樣品6份，各1 g，按“2.2”供試品溶液制備方法制備，按“2.1”色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果百秋李醇平均含量為1.614 3 mg/g，RSD為 1.1%。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液，分別于配置后0、4、8、12、16 和24 h，測(cè)定百秋李醇峰面積，平均值為 97.012，RSD 為0.99%。

2.8 回收率試驗(yàn) 取同一批號(hào)(批號(hào)2920232)樣品，取約0.5 g，共6份，精密稱(chēng)定，精密加入供回收用對(duì)照品氯仿溶液(0.042 605 mg/ml)20 ml，再按“2.2”供試品溶液制備方法制成供試品溶液，按“2.1”色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果平均回收率為100.68，RSD為2.0%，見(jiàn)表 1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.9 樣品測(cè)定結(jié)果 取樣品內(nèi)容物約1 g，精密稱(chēng)定，按“2.2”供試品溶液制備方法制備，按“2.1”色譜條件進(jìn)行測(cè)定，3批樣品測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 3批樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 廣藿香油質(zhì)量控制指標(biāo)指標(biāo)的選擇 廣藿香作為常用的芳香化濕藥，臨床上用于治療脘腹脹痛、嘔吐腹瀉、痢疾等。廣藿香油作為其有效成分［2－4］，其質(zhì)量控制尤為重要，本文首次以百秋李醇為定量指標(biāo)，建立了處方中廣藿香油的含量測(cè)定方法，快捷、準(zhǔn)確。

3.2 樣品提取條件的選擇

3.2.1 提取方式的考查 分別考查超聲處理與加熱回流兩種提取方式，結(jié)果表明加熱回流樣品中百秋李醇含量高于超聲處理方式，故選擇加熱回流提取樣品。

3.2.2 提取溶劑的考查 分別考查氯仿、乙酸乙酯與甲醇三種提取溶劑，結(jié)果以氯仿加熱回流樣品中百秋李醇含量最高，故選擇氯仿作為提取溶劑。

3.3.3 提取溶劑用量的考查 分別考查氯仿10、20與50 ml溶劑量，結(jié)果表明氯仿20 ml可將樣品中百秋李醇提取完全，故選擇20 ml作為提取溶劑用量。

3.3.4 提取時(shí)間的考查 分別考查加熱回流15、30、60 min，結(jié)果以加熱回流30 min測(cè)得樣品中百秋李醇含量最高，故選擇加熱回流30 min作為提取時(shí)間。

1 中國(guó)藥典.一部，2010:1234－1235

2 楊得坡.藿香和廣藿香揮發(fā)油對(duì)皮膚癬菌和條件致病真菌的抑制作用.中國(guó)藥學(xué)雜志，2000，35(1):9

3 蘇鏡娛.廣藿香精油化學(xué)成分分析與抗菌活性研究(Ⅰ).中草藥，2001，32(3):204

4 王本祥主編.現(xiàn)代中藥藥理學(xué).天津:天津科學(xué)技術(shù)出版社，1997:517－518