張建新，張立佳，王臨賓，林福壁，朱 杰

(西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

黃粉蟲油對高脂血癥小鼠血脂水平及抗氧化能力的影響

張建新，張立佳，王臨賓，林福壁，朱 杰

(西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

目的：探討黃粉蟲油對高脂血癥小鼠血脂水平及抗氧化能力的影響。方法：以高脂飼料喂養(yǎng)雄性ICR小鼠，建立高脂血癥模型，以不同劑量(5、10、20mL/(kg·d))的黃粉蟲油對小鼠進(jìn)行灌胃，觀察各實(shí)驗(yàn)組小鼠血脂水平和肝臟抗氧化能力的變化情況。結(jié)果：黃粉蟲油能顯著降低高脂血癥小鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)濃度，升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的濃度，同時動脈粥樣硬化指數(shù)(AI) 亦顯著降低；黃粉蟲油能降低小鼠肝臟丙二醛(MDA)含量，增加肝臟過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性，提高肝臟總抗氧化(T-AOC)能力。結(jié)論：黃粉蟲油具有調(diào)節(jié)血脂和增強(qiáng)抗氧化功能的作用。

黃粉蟲油；高脂血癥；血脂水平；抗氧化

研究表明，冠心病和動脈粥樣硬化等多種心腦血管疾病都可由高脂血癥所引發(fā)[1-2]，同時高脂血癥也是導(dǎo)致脂肪肝的重要因素之一。臨床研究證實(shí)，通過膳食和藥物干預(yù)可以有效地降低高脂血癥發(fā)病的可能性，然而多數(shù)降脂藥物帶有毒副作用，長期服用會對人體健康產(chǎn)生危害，而采用天然食物來調(diào)節(jié)血脂是安全可行的[3]。因此，開發(fā)具有降血脂功效的保健食品具有十分重要的意義。黃粉蟲(Tenebrio molitor.Linneeus)屬節(jié)肢動物門、昆蟲綱、擬步行科、粉甲屬、又稱面包蟲[4]。黃粉蟲油中含有豐富的不飽和脂肪酸[5-7]，已有研究證明，不飽和脂肪酸有抗動脈粥樣硬化和調(diào)整血脂的作用[8-10]。俞巍蔚等[11]研究發(fā)現(xiàn)，黃粉蟲幼蟲粉能夠顯著降低高血脂大鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)的濃度，李漢臣等[12]報道索提黃粉蟲油及油渣能夠延長小鼠的游泳時間，而黃粉蟲油的降血脂作用和抗氧化功效的研究未見報道。前期研究通過體外抗氧化研究發(fā)現(xiàn)，黃粉蟲油對DPPH自由基、·OH和O2·具有較好的清除作用。本實(shí)驗(yàn)利用實(shí)驗(yàn)性高脂血癥小鼠模型，探討黃粉蟲油對血脂代謝及抗氧化能力的影響，旨在為黃粉蟲油的功能利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

黃粉蟲幼蟲 陜西秦蟲黃粉蟲科技發(fā)展有限公司；清潔級雄性ICR小鼠50只[平均體質(zhì)量(25±2)g] 第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心；基礎(chǔ)飼料 第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心；高脂飼料：83.9%基礎(chǔ)飼料、10%蛋黃粉、5%豬油、1%膽固醇和0.1%豬膽鹽。

血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測定試劑盒 溫州東歐生物工程有限公司；組織總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶活力(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)、丙二醛(MDA)、考馬斯亮蘭蛋白測定試劑盒 南京建成生物工程研究所。

FA2004分析天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；PM180R低速離心機(jī) 科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司；HHS恒溫水浴鍋 江蘇常熟醫(yī)療器械有限公司；XJA-2A型(致冷式)微型粉碎機(jī) 姜堰市銀河儀器廠；XK96-B渦流混勻器 深圳市瑞鑫達(dá)科教儀器廠；UV-721紫外-可見分光光度計 日本島津公司。

1.2 方法

1.2.1 黃粉蟲油的制備[13]

黃粉蟲幼蟲60℃烘干粉碎后，采用水酶法在50℃條件下提取2h得到淡黃色透明黃粉蟲油，提取率為78.51%，經(jīng)GC-MS分析之后，不飽和脂肪酸含量為76.22%，油酸含量43.31%，亞油酸含量27.38%。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計與分組

健康雄性ICR小鼠50只，平均體質(zhì)量(25±2)g，基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后，根據(jù)體質(zhì)量隨機(jī)分為5組：正常對照組(NC)、高脂模型組(HF)、黃粉蟲油低劑量組(LD)、黃粉蟲油中劑量組(MD)和黃粉蟲油高劑量組(HD)，每組10只。正常對照組進(jìn)食基礎(chǔ)飼料，其余4組進(jìn)食高脂飼料。其中黃粉蟲油低、中、高劑量組用黃粉蟲油分別按5、10、20mL/(kg·d)劑量灌胃，正常對照組灌以20mL/(kg·d)劑量的蒸餾水，連續(xù)灌胃30d。實(shí)驗(yàn)組小鼠按組別同室分籠飼養(yǎng)，環(huán)境溫度25℃左右，濕度60%左右，每隔2d更換1次墊料，給予充足的光照，自由飲水與進(jìn)食。

1.2.3 指標(biāo)測定

實(shí)驗(yàn)期間每周稱量記錄小鼠體質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，小鼠處死前12h禁食，稱質(zhì)量后摘眼球取血，4000r/min離心15min，分離血清，分裝后于－20℃冷凍保存?zhèn)溆?。小鼠取血后，頸椎脫臼處死并分離肝臟，經(jīng)生理鹽水洗去污血后用濾紙吸干，稱質(zhì)量后于－20℃保存?zhèn)溆?。TG、TC、HDL-C、LDL-C、T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT、MDA的測定均按照試劑盒說明書進(jìn)行。按式(1)、(2)計算動脈粥樣硬化指數(shù)(AI)[14]與肝臟指數(shù)。

1.3 統(tǒng)計分析

2 結(jié)果與分析

2.1 黃粉蟲油對小鼠體質(zhì)量和肝臟指數(shù)的影響

圖1 黃粉蟲油對小鼠體質(zhì)量的影響(±s，n=10)Fig.1 Effect of Tenebrio molitor oil on body weight of mice (x± s，n=10)

圖2 黃粉蟲油對小鼠肝臟指數(shù)的影響(±s，n=10)Fig.2 Effect of Tenebrio molitor oil on liver index of mice (x± s，n=10)

實(shí)驗(yàn)期間，各組小鼠生長正常。由圖1可知，灌胃黃粉蟲油高、中、低劑量組小鼠體質(zhì)量增長均低于高脂模型組小鼠，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。由圖2可知，黃粉蟲油各劑量組小鼠肝臟指數(shù)亦均低于高脂模型組，低劑量組與高脂模型組無統(tǒng)計學(xué)差異，中劑量組和高劑量組顯著低于高脂模型組(P＜0.05或P＜0.01)。由此表明，黃粉蟲油對高脂血癥小鼠的肝臟指數(shù)具有明顯的降低作用，但對小鼠體質(zhì)量的影響并不顯著。

2.2 黃粉蟲油對小鼠血脂水平的影響

由表1、2可知，高脂模型組小鼠血清TC、TG、LDL-C顯著高于正常對照組(P＜0.05或P＜0.01)，HDL-C顯著降低(P＜0.01)，AI顯著增高(P＜0.01)增高，表明高脂血癥小鼠模型誘導(dǎo)成功。

表1 黃粉蟲油對小鼠血清TC、TG水平的影響(±s, n=10)Table 1 Effect of Tenebrio molitor oil on serum TC and TG levels of mice (±s, n=10)

表1 黃粉蟲油對小鼠血清TC、TG水平的影響(±s, n=10)Table 1 Effect of Tenebrio molitor oil on serum TC and TG levels of mice (±s, n=10)

注：a.與高脂模型組比較，有顯著性差異(P＜0.05)；b. 與高脂模型組比較，有極顯著性差異(P＜0.01)。下同。

組別 灌胃劑量/(mL/(kg·d)) TC濃度/(mmol/L)TG濃度/(mmol/L)正常對照組 0 1.83±0.52b 0.79±0.28a高脂模型組 0 3.68±0.56 1.20±0.38低劑量組 5 2.93±0.72a 0.82±0.14a中劑量組 10 2.80±0.79a 0.60±0.16b高劑量組 20 2.34±0.56b 0.55±0.11b

由表1 可知，3個黃粉蟲油劑量組小鼠血清TC含量均顯著低于高脂模型組(P＜0.05或P＜0.01)，表明黃粉蟲油有抑制高脂飼喂小鼠血清TC含量升高的效果，且高劑量組好于中、低劑量組；與高脂模型組比較，3個劑量組小鼠血清TG也有顯著差異(P＜0.05或P＜0.01)，表明黃粉蟲油能夠抑制高脂飼喂小鼠血清TC含量升高，且劑量越高效果越明顯。

表2 黃粉蟲油對小鼠血清HDL-C, LDL-C 及AI的影響(±s,n=10)Table 2 Effect of Tenebrio molitor oil on serum HDL-C, LDL-C and AI of mice (x－± s, n=10)

表2 黃粉蟲油對小鼠血清HDL-C, LDL-C 及AI的影響(±s,n=10)Table 2 Effect of Tenebrio molitor oil on serum HDL-C, LDL-C and AI of mice (x－± s, n=10)

組別 灌胃劑量/ HDL-C濃度/ LDL-C濃度/ AI(mL/(kg·d)) (mmol/L) (mmol/L)正常對照組 0 1.65±0.12b 0.74±0.12b 0.43±0.10b高脂模型組 0 1.24±0.11 1.24±0.22 0.98±0.23低劑量組 5 1.37±0.08a 1.02±0.15a 0.75±0.13a中劑量組 10 1.45±0.14b 0.99±0.08a 0.68±0.06b高劑量組 20 1.59±0.12b 0.85±0.16b 0.53±0.11b

由表2可知，與高脂模型組比較，黃粉蟲油高、中、低劑量組小鼠血清LDL-C顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，HDL-C顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)，AI顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，表明黃粉蟲油有顯著降低血清LDL-C、AI和升高HDL-C的作用，且劑量越高效果越好。

2.3 黃粉蟲油對小鼠肝臟抗氧化能力的影響

由表3可知，與正常對照組比較，高脂模型組小鼠肝臟T-AOC、CAT及GSH-Px活性顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)。黃粉蟲油高、中、低劑量組小鼠肝臟CAT活性與高脂模型組均有顯著差異(P＜0.01)；與高脂模型組比較，黃粉蟲油中、高劑量組小鼠肝臟T-AOC、GSH-Px活性顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)，低劑量組與高脂組差異不顯著(P＞0.05)，表明黃粉蟲油能夠增加肝臟T-AOC、CAT及GSH-Px活性，提高肝臟抗氧化能力。

表3 黃粉蟲油對小鼠肝臟T-AOC, CAT及GSH-Px活性的影響(±s, n=10)Table 3 Effect of Tenebrio molitor oil on the activities of T-AOC, CAT and GSH-Px in liver of mice (± s, n=10)

組別 灌胃劑量/T-AOC活力/ CAT活力/ GSH-Px活力/(mL/(kg·d)) (U/mg pro) (U/mg pro) (U/mg pro)正常對照組 0 1.34±0.13b 25.62±4.78b371.49±57.41a高脂模型組 0 1.00±0.14 17.95±4.72 314.39±31.91低劑量組 5 1.26±0.33 25.33±4.19b344.39±28.41中劑量組 10 1.31±0.29a 27.45±5.46b357.18±32.35a高劑量組 20 1.39±0.11b 32.70±6.27b368.87±47.25a

表4 黃粉蟲油對小鼠肝臟SOD活性、MDA含量的影響(±s, n=10)Table 4 Effect of Tenebrio molitor oil on SOD activity and MDA content of mice (± s, n=10)

表4 黃粉蟲油對小鼠肝臟SOD活性、MDA含量的影響(±s, n=10)Table 4 Effect of Tenebrio molitor oil on SOD activity and MDA content of mice (± s, n=10)

組別 灌胃劑量/ SOD活力/ MDA含量/(mL/(kg·d)) (U/mg pro) (nmol/mg pro)正常對照組 0 75.18±5.96b 1.37±0.37a高脂模型組 0 61.66±4.52 1.74±0.20低劑量組 5 64.88±5.69 1.54±0.24中劑量組 10 67.53±5.25a 1.41±0.31a高劑量組 20 72.87±5.85b 1.43±0.28a

由表4可知，高脂模型組小鼠肝臟SOD活性顯著低于正常對照組(P＜0.01)，MDA含量顯著升高(P＜0.05)。與高脂組模型比較，黃粉蟲油低劑量組小鼠肝臟SOD活性差異不顯著(P＞0.05)，中、高劑量組小鼠肝臟SOD活性顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)；黃粉蟲油低劑量組小鼠肝臟MDA含量與高脂模型組無顯著差異(P＞0.05)，中、高劑量組小鼠肝臟MDA含量顯著低于高脂模型組(P＜0.05)，表明中等及以上劑量的黃粉蟲油有顯著升高肝臟SOD活性及降低MDA含量的作用。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)通過飼喂高脂飼料誘導(dǎo)小鼠高脂血癥模型研究黃粉蟲油對小鼠血脂水平和抗氧化能力的影響。結(jié)果顯示，黃粉蟲油能夠顯著降低血清TC、TG、LDL-C含量，顯著升高HDL-C含量，且存在明顯的量效關(guān)系，表明黃粉蟲油能夠顯著抑制高脂血癥小鼠血脂的升高。黃粉蟲油的主要成分是油酸、亞油酸等不飽和脂肪酸，能夠起到調(diào)整血脂及預(yù)防動脈粥樣硬化的作用。油酸具有比多不飽和脂肪酸更優(yōu)的生理活性和更高的氧化穩(wěn)定性，能夠降低血清TG和TC水平；亞油酸是天然的生物活性物質(zhì)，它能夠促進(jìn)膽固醇轉(zhuǎn)化為鹽類而排出體外，同樣具有降低血清TG和總膽固醇TC的功效[14]。

研究表明，動脈粥樣硬化的形成通常與脂質(zhì)過氧化所造成的機(jī)體損傷有關(guān)。當(dāng)機(jī)體抗氧化系統(tǒng)與氧化系統(tǒng)的平衡被破壞時，會形成大量的自由基，這些自由基會通過反應(yīng)最終產(chǎn)生終產(chǎn)物MDA[15-16]。本研究結(jié)果顯示，高脂模型組小鼠肝臟MDA含量顯著增加，同時機(jī)體內(nèi)幾種重要的抗氧化酶類，如CAT、GSH-Px、SOD的活性顯著下降，T-AOC降低，對機(jī)體內(nèi)自由基的清除能力降低。由此推斷，黃粉蟲油可能是通過提高機(jī)體內(nèi)幾種重要的抗氧化酶的活性，清除體內(nèi)的自由基，從而減少過多的自由基對機(jī)體所造成的損傷作用。

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Effect of Tenebrio molitor Oil on Blood Lipid and Antioxidant Function in Hyperlipidemic Mice

ZHANG Jian-xin，ZHANG Li-jia，WANG Lin-bin，LIN Fu-bi，ZHU Jie
(College of Food Science and Engineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, China)

Objective: To explore the effect of Tenebrio molitor oil on blood lipid and antioxidant function in ICR male mice with hyperlipidemia. Methods: High fat diet was used to create a hyperlipidemic model. Fifty healthy male ICR mice were randomly divided into 5 groups of 10 each: normal control group (fed basal diet), high fat model group (fed high fat diet) and low-,middle- and high-dose Tenebrio molitor oil groups (fed high fat diet and administered intragastrically with Tenebrio molitor oil at doses of 5, 10 mL/(kg·d) and 20 mL/(kg·d), respectively). After 30 consecutive days of intragastric administration, all the mice were measured for their body weight, liver index, blood lipid levels and antioxidant function in liver. Results: Tenebrio molitor oil could reduce serum total cholesterol (TC), triglyceride (TG), and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) levels as well as arteriosclerosis index (AI), and increase high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) level. It could also reduce the content of malondialdehyde (MDA) content, increase hepatic catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) activities, and improve liver total antioxidant capacity (T-AOC). Conclusion: Tenebrio molitor oil can regulate blood lipid and enhance antioxidant function.

Tenebrio molitor oil；hyperlipidemia；blood lipid；antioxidation

TS201.4

A

1002-6630(2011)05-0263-04

2010-07-05

張建新(1959—)，男，教授，碩士，主要從事食品質(zhì)量安全與標(biāo)準(zhǔn)化研究。E-mail：zhangjx59@foxmail.com