亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        酒花黃酮提取工藝和含量測(cè)定

        2011-10-13 08:06:58楊建華胡君萍
        食品科學(xué) 2011年6期
        關(guān)鍵詞:酒花酒糟啤酒

        李 敏,楊建華,李 淵,胡君萍,*

        (1.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830011;2.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院,新疆 烏魯木齊 830011)

        酒花黃酮提取工藝和含量測(cè)定

        李 敏1,楊建華2,李 淵1,胡君萍1,*

        (1.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830011;2.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院,新疆 烏魯木齊 830011)

        建立酒花黃酮的提取方法和含量測(cè)定方法。采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色法,以蘆丁為對(duì)照品,通過單因素試驗(yàn)和L9(34)正交設(shè)計(jì)確定酒花黃酮的提取方法,并測(cè)定和比較酒花、酒糟和啤酒中黃酮的含量。結(jié)果表明:酒花黃酮提取方法為樣品加入50倍的甲醇,超聲提取2次,每次1h,酒花黃酮含量為69.98mg/g,酒糟和啤酒中黃酮的含量較低。對(duì)照品蘆丁在10.2~40.8μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系,平均回收率99.33%,RSD=3.60%。該提取方法合理,含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確,可用于酒花黃酮提取物制備及其質(zhì)量控制。

        酒花;黃酮;提取工藝;含量測(cè)定

        啤酒花Humulus lupulusL.是桑科(Moraceae)葎草屬(HumulusLinn.)多年生草質(zhì)蔓生藤本植物,其雌性球穗花序簡(jiǎn)稱酒花[1]。酒花是一種使用歷史悠久的藥食同源植物,不僅用于啤酒的釀制,還具有抗菌和鎮(zhèn)靜作用,傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)用作結(jié)核病、麻風(fēng)病、神經(jīng)衰弱癥的治療[2-3]。酒花原產(chǎn)歐洲,主產(chǎn)地分布于美國(guó)、歐洲、澳大利亞、南美洲和中國(guó),我國(guó)新疆天山、阿爾泰山的山坡林間有大量野生分布,在東北、華北有栽培[4]。酒花富含樹脂、揮發(fā)油、多酚、黃酮等多種生物活性成分,其中黃酮類成分(酒花黃酮)是代表酒花多種生物活性的一類重要物質(zhì)。酒花黃酮包括黃

        酮醇糖苷和異戊二烯查爾酮兩類,前者主要包括黃芪苷、異槲皮素、蕓香苷、山柰酚苷等成分,具有抗病毒、抗菌、抗腫瘤、抗氧化等活性[5];后者包括黃腐酚、異黃腐酚、異戊二烯基柚皮素等成分,為酒花所特有,具有預(yù)防癌癥和抑制癌細(xì)胞擴(kuò)增[6-9]、抗病毒[10]、抗菌[11]、抗氧化[12]及雌激素樣作用[13]。酒花黃酮結(jié)構(gòu)類型多樣、生物活性顯著、在啤酒花中含量高、藥食用途廣泛,顯示了良好的開發(fā)利用前景。新疆是酒花的主產(chǎn)區(qū),酒花資源豐富,但其藥用價(jià)值尚未得到有效開發(fā)。本實(shí)驗(yàn)建立酒花黃酮的提取工藝和含量測(cè)定方法,比較不同酒花樣品的黃酮含量,為進(jìn)一步制備酒花黃酮提取物及其功能性開發(fā)利用提供一定參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料、試劑與儀器

        顆粒酒花(產(chǎn)地新疆吉木薩爾縣)經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院胡君萍副教授鑒定為啤酒花Humulus lupulusL.;啤酒花及酒糟樣品干燥,粉碎,過40目篩,冷藏備用。顆粒酒花、酒糟、啤酒 新疆烏蘇啤酒廠。

        蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 中國(guó)藥品生物制品檢定所;亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、9 5%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮(均為分析純)。

        ST-02A型多功能粉碎機(jī) 永康帥通工具有限公司;AB104-N電子天平 上海Mettler Toledo公司;SX721分光光度計(jì) 山東高密分析儀器廠;KQ300DE型數(shù)控超聲清洗機(jī)(功率300W,頻率400kHz) 昆山市超聲儀器有限公司;KD-S2.4數(shù)顯恒溫水浴鍋 金壇市醫(yī)療儀器廠。

        1.2 方法

        1.2.1 酒花黃酮測(cè)定原理[14]

        在黃酮類化合物溶液中加入鋁離子試劑后,黃酮類化合物中的酚羥基與鋁離子生成絡(luò)合物,控制適宜的pH值,所生成的絡(luò)合物在可見區(qū)能獲得特征吸收峰,其質(zhì)量濃度與吸光度符合比爾定律,其顏色深淺與黃酮類化合物的量成一定的比例關(guān)系,可以定量測(cè)定。

        1.2.2 對(duì)照品溶液的配制

        精密稱取干燥至質(zhì)量恒定的蘆丁對(duì)照品25.5mg,置于50mL容量瓶中,用50%甲醇溶解并定容至刻度,搖勻,制成質(zhì)量濃度0.51mg/mL的對(duì)照品溶液。

        1.2.3 供試品溶液的制備

        精密稱取顆粒酒花粉末1g、酒糟粉末3g,加入50倍體積的甲醇溶液,超聲提取2次,每次1h,過濾,合并濾液,濃縮,定容至50mL,搖勻,即分別制得酒花供試品溶液和酒糟供試品溶液。

        啤酒臨用前超聲20min去除泡沫,即得啤酒供試品溶液(每100mL啤酒的質(zhì)量為4.1382g)。

        1.2.4 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

        精密吸取酒花供試品溶液1mL,置于10mL容量瓶中,加入5% NaNO2溶液0.3mL,搖勻,放置6min后加入10% Al(NO3)3溶液0.3mL,放置6min,再加入10%NaOH溶液4.0mL,搖勻,用溶劑稀釋至刻度,搖勻。以溶劑代替供試品溶液同法制備空白對(duì)照,15min后掃描200~800nm波長(zhǎng)范圍的吸光度,確定最大吸光度在510nm,因此分光光度法選擇510nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

        1.2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

        精密量取蘆丁對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL于10mL容量瓶中,分別加入5%NaNO2溶液0.3mL,搖勻,放置6min后加入10% Al(NO3)3溶液0.3mL,放置6min,再加入10% NaOH溶液4.0mL,搖勻,用溶劑稀釋至刻度,15min于波長(zhǎng)510nm處測(cè)定吸光度。以質(zhì)量濃度C(μg/mL)為橫坐標(biāo)、吸光度A為縱坐標(biāo),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程:A=0.0108C-0.023,r=0.9985,表明蘆丁在10.2~40.8μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。

        1.2.6 精密度實(shí)驗(yàn)

        精密吸取酒花供試品溶液0.3mL,按1.2.5節(jié)方法測(cè)定吸光度6次,其RSD為2.46%。

        1.2.7 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

        精密吸取酒花供試品溶液0.3mL,按1.2.5節(jié)方法,每隔0.5h測(cè)定1次吸光度,共測(cè)5次,計(jì)算吸光度的RSD為1.33%,表明顯色液在2.5h內(nèi)較穩(wěn)定。

        1.2.8 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

        精密吸取0.3mL酒花供試品溶液6份,按1.2.5節(jié)方法測(cè)定吸光度,計(jì)算結(jié)果的RSD為2.00%。

        1.2.9 回收率實(shí)驗(yàn)

        精密吸取酒花供試品溶液9份各0.15mL,分別加入對(duì)照品溶液(0.51mg/mL)0.2、0.4、0.6mL,按1.2.5節(jié)方法測(cè)定吸光度,計(jì)算回收率和RSD。結(jié)果見表1。

        表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 1 Results of recovery rate experiments

        1.2.10 酒花黃酮提取工藝優(yōu)化

        在建立酒花黃酮含量測(cè)定方法的基礎(chǔ)上,采用單因素試驗(yàn)篩選了酒花黃酮的5種提取溶劑(水、乙醇、甲醇、丙酮和乙酸乙酯)和4種提取方法(冷浸法、回流法、索式提取法和超聲法);并采用L9(34)正交設(shè)計(jì),考察了溶劑體積、提取時(shí)間和提取次數(shù)對(duì)酒花黃酮含量的影響,優(yōu)化并確定了酒花黃酮的最佳提取工藝。

        1.2.11 樣品中黃酮含量測(cè)定

        按1.2.3節(jié)分別制備酒花、酒糟和啤酒供試品溶液各6份,精密吸取酒花供試品溶液0.3mL、酒糟供試品溶液4.0mL、啤酒供試品溶液4.0mL,按1.2.5節(jié)方法測(cè)定吸光度,代入回歸方程計(jì)算各供試品中黃酮的含量[黃酮含量/(mg/g)=CDV/m×100,其中C為樣品溶液質(zhì)量濃度/(μg/mL),V為樣品溶液稀釋后總體積/mL,D為樣品稀釋倍數(shù),m為樣品質(zhì)量/g]。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 酒花黃酮提取工藝的篩選

        2.1.1 提取溶劑的選擇

        精密稱取顆粒酒花粉末1g共10份,分別加入水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯各5 0 m L,超聲提取30min,過濾。精密吸取濾液1.0mL,按1.2.5節(jié)方法測(cè)定吸光度,另取25mL濾液濃縮干燥,計(jì)算浸膏得率[浸膏得率/%= 浸膏質(zhì)量×2/樣品質(zhì)量×100]。結(jié)果見表2。

        表2 不同溶劑提取液的吸光度和提取率(n=2)Table 2 Absorbance and extraction rates of the extracts using different extraction solvents (n=2)

        由表2可知,各溶劑對(duì)酒花黃酮提取率差異明顯,以甲醇溶液的吸光度和浸膏得率為高,因此選擇甲醇為酒花黃酮的提取溶劑。

        2.1.2 提取方法的選擇

        精密稱取顆粒酒花樣品粉末適量,加入50倍量甲醇溶液,分別采用冷浸法(室溫浸泡30min)、回流法(75℃水浴回流30min)、索式提取法(75℃水浴至提取液無色)和超聲法(超聲30min)提取,提取液冷卻至室溫,補(bǔ)足質(zhì)量損失,過濾。分別取濾液1.0mL,按1.2.5節(jié)方法測(cè)定吸光度,另取25mL濾液濃縮干燥,計(jì)算浸膏得率。結(jié)果見表3。

        表3 不同提取方法所得提取液的吸光度和提取率(n=2)Table 3 Absorbance and extraction rates of the extracts using different extraction methods (n=2)

        結(jié)果表明,上述提取溶液中以超聲法吸光度略高,而回流法浸膏得率略高,考慮到超聲法簡(jiǎn)便易行,故采用超聲法提取酒花黃酮。

        2.1.3 酒花黃酮提取工藝優(yōu)化

        在以上單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用L9(3)4正交設(shè)計(jì)(表4),確定酒花黃酮最佳提取工藝。精密稱取酒花樣品粉末各1g,以甲醇為提取溶劑,采用超聲提取法,優(yōu)選溶劑體積、提取時(shí)間和提取次數(shù),提取液過濾,濾液濃縮并定容至50mL。精密吸取上述溶液0.3mL,按1.2.5節(jié)方法測(cè)定吸光度,按回歸方程計(jì)算黃酮的含量。結(jié)果見表5。

        表4 酒花黃酮提取正交試驗(yàn)的因素和水平Table 4 Factors and levels of orthogonal tests for optimizing the extraction conditions of flavonoids

        表5 酒花黃酮提取正交試驗(yàn)結(jié)果(n=2)Table 5 Results and analysis of orthogonal tests for optimizing the extraction conditions of flavonoids (n=2)

        由表5極差分析可得,各因素對(duì)黃酮提取工藝的影響順序?yàn)锽(提取時(shí)間)>C(提取次數(shù))>A(溶劑體積),酒花黃酮最佳提取工藝A2B2C2,即精密稱取供試品粉末適量,加入50倍體積甲醇溶液、超聲提取2次、每次1h。

        2.2 樣品中黃酮含量測(cè)定

        分別制備酒花、酒糟和啤酒供試品溶液,按1.2.10節(jié)方法測(cè)定各供試品中的黃酮含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6。結(jié)果表明,上述3種樣品中,顆粒酒花黃酮含量最高,其次為商品啤酒,而酒糟中黃酮含量很低。

        表6 3種供試品中的黃酮含量(n=6)Table 6 Contents of total flavonoids in three samples (n=6)

        3 結(jié) 論

        本研究采用單因素和正交試驗(yàn)確定了酒花黃酮的提取工藝,即精密稱取供試品粉末適量,加入50倍體積甲醇溶液、超聲提取2次、每次1h。并以蘆丁為對(duì)照品,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色法測(cè)定顆粒酒花、酒糟和啤酒中黃酮的含量,方法操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好,對(duì)設(shè)備要求低,是檢測(cè)酒花黃酮的可靠方法。

        啤酒釀造企業(yè)使用的酒花制品有全酒花、酒花粉、顆粒酒花、酒花浸膏、酒花油制品等[15]。本實(shí)驗(yàn)的研究對(duì)象顆粒酒花是世界上使用最廣泛的酒花制品,它是將粉碎至一定規(guī)格的粉狀酒花壓制成直徑為2~8mm,長(zhǎng)約15mm的短棒,充以惰性氣體并包裝,因此顆粒酒花能有效防止酒花中有效成分的氧化和損失。酒花黃酮是酒花多酚的重要組成部分[16],本研究結(jié)果表明,顆粒酒花、酒糟和啤酒3種酒花樣品的黃酮含量差異很大,其中顆粒酒花黃酮含量最高,達(dá)69.98mg/g,而酒糟中黃酮含量極低,不足顆粒酒花的1%。

        [1] 中國(guó)科學(xué)院植物研究所. 中國(guó)高等植物圖鑒: 第1冊(cè)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1994: 502.

        [2] 周娟, 鄒翔, 季宇彬. 啤酒花的有效成分及活性研究[J]. 哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2005(4): 414-417.

        [3] 歐陽(yáng)軍. 啤酒花化學(xué)藥理研究與臨床應(yīng)用[J]. 中國(guó)民族醫(yī)藥雜志,1999(1): 95.

        [4] 朱丹, 牛廣才, 姜述君, 等. 酒花的化學(xué)成分及藥理作用[J]. 中國(guó)藥業(yè), 2008, 17(21): 1-2.

        [5] 李雋, 崔承彬, 蔡兵, 等. 啤酒花黃酮的研究進(jìn)展[J]. 中草藥, 2008,39(7): 1110-1114.

        [6] PAN L, BECKER H, GERHAUSER C. Xanthohumol induces apoptosis in cultured 40-16 human colon cancer cells by activation of the death receptor- and mitochondrial pathway[J]. Mol Nutr Food Res, 2005, 49(9): 837-843.

        [7] HO Y C, LIU C H, CHEN C N, et al. Inhibitory effects of xanthohumol from hops (Humulus lupulusL.) on human hepatocellular carcinoma cell lines[J]. Phytother Res, 2008, 22(11): 1465-1468.

        [8] COLGATE E C, MIRANDA C L, STEVENS J F, et al. Xanthohumol,a prenylflavonoid derived from hops induces apoptosis and inhibits NF-kappaB activation in prostate epithelial cells[J]. Cancer Lett, 2007, 246(1/2): 201-209.

        [9] DELMULLE L, BELLAHCENE A, DHOOGE W, et al. Anti-proliferative properties of prenylated flavonoids from hops (Humulus lupulusL.)in human prostate cancer cell lines[J]. Phytomedicine, 2006, 13(9/10):732-734.

        [10] WANG Qian, DING Zhihui, LIU Jikai, et al. Xanthohumol, a novel anti-HIV-1 agent purified from HopsHumulus lupulus[J]. Antiviral Res,2004, 64(3): 189-194.

        [11] GERHAUSER C. Broad spectrum anti-infective potential of xanthohumol from hop (Humulus lupulusL.) in comparison with activities of other hop constituents and xanthohumol metabolites[J]. Mol Nutr Food Res,2005, 49(9): 827-831.

        [12] STEVENS J F, MIRANDA C L, FREI B, et al. Inhibition of peroxynitrite-mediated LDL oxidation by prenylated flavonoids: the alpha, beta-unsaturated keto functionality of 2'-hydroxychalcones as a novel antioxidant pharmacophore[J]. Chem Res Toxicol, 2003, 16(10):1277-1286.

        [13] MILLIGAN S R, KALITA J C, POCOCK V, et al. The endocrine activities of 8-prenylnaringenin and related hop (Humulus lupulusL.) flavonoids[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2000, 85(12): 4912-4915.

        [14] 努爾阿米娜·阿尤甫, 阿不都拉·阿巴斯. 曼陀羅種子中總黃酮含量測(cè)定及提取工藝的研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 29(3): 260-263.

        [15] 朱恩俊. 酒花及酒花制品在啤酒工業(yè)中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng),2006(8): 25-28.

        [16] 劉玉梅, 湯堅(jiān), 劉奎舫. 啤酒花的化學(xué)研究及其和啤酒釀造的關(guān)系[J]. 釀酒科技, 2006(2): 71-75.

        Optimization of Extraction Process and Content Determination of Total Flavonoids inHumulus lupulusL.

        LI Min1,YANG Jian-hua2,LI Yuan1,.H.UJun-ping1,*
        (1. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University,..830011, China;2. Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University, 830011, China)

        Ultrasonic extraction conditions for total flavonoids fromHumulus lupulusL. were optimized by single factor experiments and orthogonal design with the aim of establishing a sample preparation method for determination of the content of total flavonoids inHumulus lupulusL. by NaNO2-Al(NO3)3-NaOH colorimetric method using rutin as the reference. The optimal extraction process parameters were material-to-liquid ratio of 1:50, extraction duration of 1 h and repeated extraction number of 2. The content of total flavonoids fromHumulus lupulusL. was 69.98 mg/g under the optimal extraction conditions, which was much higher than that of residues and beer. The linear range was between 10.2 μg/mL and 40.8 μg/mL with a correlation coefficient of 0.9985. The average recovery rate was 99.33% with a relative standard deviation of 3.60%. The extraction and determination methods were simple and feasible, which is suitable for the preparation and quality control of flavonoids extracted fromHumulus lupulusL.

        Humulus lupulusL.;total flavonoids;extraction;determination

        O623.54

        A

        1002-6630(2011)06-0016-04

        2010-04-18

        新疆維吾爾自治區(qū)高校科研計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(XJEDU2009I24)

        李敏(1983—),女,講師,碩士,主要從事天然藥用植物資源的開發(fā)與利用研究。E-mail:hjp-yft@163.com

        *通信作者:胡君萍(1971—),女,副教授,博士,主要從事新疆特色藥用資源的開發(fā)與利用研究。E-mail:yjh-yft@163.com

        猜你喜歡
        酒花酒糟啤酒
        基于酒花水分含量變化研究變溫干燥模式對(duì)酒花干燥效率的影響
        豬酒糟中毒發(fā)生的原因、臨床表現(xiàn)、診斷及防治
        白酒糟在毛驢養(yǎng)殖中的運(yùn)用
        酒花干燥技術(shù)研究
        三個(gè)國(guó)家Cascade酒花香氣對(duì)比分析
        《啤酒》
        流行色(2018年10期)2018-03-23 03:36:24
        哼哼豬買啤酒
        陽(yáng)朔啤酒魚
        山東青年(2016年2期)2016-02-28 14:25:44
        酒糟綜合利用技術(shù)研究進(jìn)展
        巧用酒糟喂鵝
        色窝窝手在线视频| 免费拍拍拍网站| 曰本女人与公拘交酡免费视频| 国产乱子伦精品免费无码专区| 国产黄色免费网站| 亚洲国产av剧一区二区三区| 日韩精品一二三区乱码| 欧美xxxx做受欧美| 免费av片在线观看网站| 无码精品人妻一区二区三区98| 在线观看国产精品一区二区不卡| 少妇下面好紧好多水真爽| 四虎影视久久久免费观看| 国产va免费精品观看| 国产国拍亚洲精品永久69| 亚洲一区二区综合精品| 日韩人妻ol丝袜av一二区| 国内揄拍国内精品少妇国语| 国产精品爽爽VA吃奶在线观看| 日本免费精品一区二区三区视频| 国产一区二区三区内射| 日韩人妻无码精品-专区| 国产91吞精一区二区三区| 日本中文字幕人妻精品| 中文字幕久久波多野结衣av不卡| 48久久国产精品性色aⅴ人妻| 女人大荫蒂毛茸茸视频| 香蕉久久夜色精品国产| 天堂av网手机线上天堂| 国产女人高潮叫床免费视频| 精品国产高清一区二区广区| 亚洲综合偷拍一区二区| 中文字幕有码无码人妻av蜜桃| 亚洲av无码一区二区三区观看| 三上悠亚免费一区二区在线| 一级黄色一区二区三区视频| 国产av无码专区亚洲av果冻传媒 | 成人国产一区二区三区av| 国产综合久久久久久鬼色| 久久精品中文字幕第23页| 熟女乱乱熟女乱乱亚洲|