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        IGF-1R基因在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)

        2011-10-03 14:04:48熊劍華
        實(shí)用臨床醫(yī)學(xué) 2011年12期
        關(guān)鍵詞:陽性細(xì)胞生長因子染色

        熊劍華

        (南昌市第一醫(yī)院泌尿外科,南昌 330008)

        膀胱移行細(xì)胞癌(BTCC)是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。目前有關(guān)膀胱移行細(xì)胞癌發(fā)生侵襲及轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制仍不十分清楚,制約了臨床醫(yī)生對其早期診斷、治療和預(yù)后的評估。本文旨在研究IGF-1R mRNA在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)與意義,從而探討其與膀胱癌的發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移的關(guān)系,可望為膀胱癌的分子診斷和判斷預(yù)后提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 組織標(biāo)本

        40例膀胱移行細(xì)胞癌標(biāo)本取自2009年7月至2010年7月在南昌市第一醫(yī)院手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)為BTCC的腫瘤標(biāo)本。正常對照組15例為良性前列腺增生癥合并膀胱結(jié)石(12例)、輸尿管囊腫(2例)、膀胱陰道瘺(1例)患者經(jīng)膀胱手術(shù)時(shí)所取膀胱壁組織,均經(jīng)病理證實(shí)為正常膀胱黏膜組織。標(biāo)本為石蠟包埋處理后的組織切片:標(biāo)本組織用4%多聚甲醛固定,石蠟包埋,實(shí)驗(yàn)時(shí)連續(xù)切取厚5~6 μm的切片。40例膀胱移行細(xì)胞癌患者中男31例,女9例。 年齡 38~76(平均 60.5)歲。 40例膀胱移行細(xì)胞癌患者中行TUR-Bt術(shù)22例,膀胱部分切除術(shù)12例,膀胱全切術(shù)6例。腫瘤臨床分期按TNM標(biāo)準(zhǔn),Tis-T117例,T2-T423例。腫瘤病理分級按WHO分級標(biāo)準(zhǔn),I級9例,II級14例,III級17例。術(shù)后證實(shí)有淋巴結(jié)或局部轉(zhuǎn)移者9例。

        1.2 試劑與方法

        IGF-1R mRNA 采用原位雜交檢測,IGF-1R mRNA原位雜交探針(5'端標(biāo)記地高辛)由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。IGF-1R mRNA探針序列為:5'-TCTTCAAGTGCGGCTCCCT-3'。

        1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

        判斷標(biāo)準(zhǔn):隨機(jī)選擇5個(gè)高倍鏡視野 (400倍)進(jìn)行判斷,IGF-1R mRNA陽性表達(dá)時(shí)細(xì)胞漿著色呈淺黃色-黃褐色為陽性表現(xiàn)。最后表達(dá)以染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞率的得分之和進(jìn)行判斷:無染色記0分,弱染色(淺黃色)記1分,中等染色(棕黃色)記2分,強(qiáng)染色(黃褐色)記3分;陽性細(xì)胞率≤10%記0分,10%~45%記 1分,46%~65%記 2分,>65%記 3分。上述兩項(xiàng)積分相加,0分為陰性(-),1~2分為弱陽性(+),3~4 分為中等陽性(?),5~6 分為強(qiáng)陽性(?)。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        分類變量間比較采用NPar Tests檢驗(yàn),如某一格期望值<5,則用Fishers精確概率法,率的比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有結(jié)果均在統(tǒng)計(jì)軟件SPSS10.0上運(yùn)行。

        2 結(jié)果

        2.1 IGF-1R mRNA在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)

        對照組15例正常膀胱黏膜組織中未見IGF-1R mRNA陽性表達(dá),而40例膀胱移行細(xì)胞癌組織中IGF-1R mRNA 陽性表達(dá) 31例,陽性率 77.5%,與正常組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IGF-1R mRNA陽性染色主要位于癌(巢)細(xì)胞胞漿,呈棕黃色,陽性細(xì)胞多位于腫瘤邊緣,癌組織的邊緣染色強(qiáng)于中心部位。

        2.2 IGF-1R mRNA表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系

        IGF-1R mRNA陽性表達(dá)率隨膀胱移行細(xì)胞癌臨床分期和病理分級的升高而增加(P<0.05),腫瘤轉(zhuǎn)移者高于未轉(zhuǎn)移者(P<0.05),見表 1。

        3 討論

        膀胱移行細(xì)胞癌是泌尿系統(tǒng)最常見惡性腫瘤,具有易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移、術(shù)后易復(fù)發(fā)等生物學(xué)特性[1],約有70%的患者雖經(jīng)系統(tǒng)和正規(guī)治療,但仍然復(fù)發(fā),約有30%的腫瘤發(fā)生侵襲或(和)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[2]。而侵襲和轉(zhuǎn)移又是惡性腫瘤威脅患者健康乃至生命的最主要因素。

        胰島素樣生長因子(insulin-like growth factors,IGFs)是一類十分重要的生長因子,具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化等多種生物學(xué)活性,參與多種惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展過程,如結(jié)直腸癌、腎癌[3]。IGFs系統(tǒng)是一個(gè)龐大的家族,包括IGF-1和IGF-2兩類多肽類生長因子,以及其相應(yīng)受體 IGF-1R(IGF-1 receptor)、IGF-2R(IGF-2receptor)和至少 6 種胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGF-binding protein,IGFBP)[4]。 研究發(fā)現(xiàn)IGF-1與腫瘤的浸潤及轉(zhuǎn)移有關(guān),IGF-1能促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[5]。

        本研究通過原位雜交技術(shù)在膀胱移行細(xì)胞癌組織中對IGF-1RmRNA表達(dá)進(jìn)行了檢測,發(fā)現(xiàn)對照組15例正常膀胱黏膜組織中未見一例IGF-1R mRNA陽性表達(dá),而實(shí)驗(yàn)組中IGF-1R mRNA陽性表達(dá)31例(陽性率77.5%),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而且IGF-1R mRNA陽性表達(dá)率隨BTCC臨床分期和病理分級的升高而增加(P<0.05),腫瘤轉(zhuǎn)移者高于未轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。 可見 IGF-1R 基因與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展存在著密切的關(guān)系。

        表1 IGF-1R mRNA表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系

        [1]Simms M S,Mann Q,Kockelbergh R C,et al.The management of lymph node metastasis from bladder cancer[J].Eur J Surg Oncol,2005,31(4):348-356.

        [2]Santen R J,F(xiàn)an P,Zhang Z,et al.Estrogen signals via an extra -nuclear pathway involving IGF -1R [J].Steroids,2009,74(7):586-594.

        [3]Fagan D H,Yee D J.Crosstalk between IGF-1R and estrogen receptor signaling in breast cancer[J].Mammary Gland Biol Neoplasia,2008,13(4):423-429.

        [4]Freude S,Schilbach K,Schubert M.The role of IGF-1R receptor and insulin receptor signaling for the disease[J].Curr Alzheimer Res,2009,6(3):213-223.

        [5]Baserga R.Customizing the targeting of IGF-1R receptor[J].Future Oncol,2009,5(1):43-50.

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