孫 勇 宋廣德
嗅癌犬使用方法初探
孫 勇 宋廣德
癌癥患者呼出的氣體中含有烷類和苯類衍生物,精確地探測這些化合物,現(xiàn)有的各種化學方法都難以做到,而通過犬的靈敏嗅覺卻可以識別,使用訓練良好的嗅癌犬篩查肺癌病患具有可行性,可以作為肺癌臨床輔助診斷的有效方法。為了充分利用嗅癌犬對肺癌病人氣味鑒別陽性率,合理避開對健康人群的假陽性率,并且使出具的結論科學客觀,在嗅癌犬的使用上,先以一例確診肺癌病人口腔呼出氣味作為檢驗嗅源(標準氣味),檢驗嗅癌犬是否具備正常的工作狀態(tài),再用3頭嗅癌犬分別對1例被檢測者和5例健康志愿者的口腔呼出氣味進行對比鑒別,用3頭犬結論的百分率出具被檢測者是否具有肺癌病患的篩查結果,以此闡述嗅癌犬的使用方法以及討論其可行性。
(一)嗅癌犬3頭:拉布拉多犬1頭,史賓格犬2頭。
(二)一例被檢測者口腔呼出氣味一式2份。
(三)5位健康志愿者口腔呼出氣味10份(每位2份)。
(四)一例確診肺癌病人(志愿者)口腔呼出氣味一式2份。
(五)其他材料:嗅癌犬工作間、鑒別臺、不銹鋼杯、帶孔杯蓋、不銹鋼鑷子、大、小廣口瓶、醫(yī)用紗布、無菌手套、口罩、密封袋、網(wǎng)球、秒表等。
嗅癌犬 本研究將其定義為一種經(jīng)過特殊訓練的,通過篩查人的口腔呼出氣味來認定該人是否患有肺癌的工作犬。檢驗嗅源(A/B) 吸附了確診肺癌病人(志愿者)的口腔呼出氣味的無菌紗布。送檢物(P/Q) 吸附了被檢測者口腔呼出氣味的無菌紗布。配物(A1/A2…,B1/B2…) 吸附了健康人(志愿者)的口腔呼出氣味的無菌紗布。被 鑒 物 (A/B,P/Q,A1/A2…B1/B2…)供嗅癌犬鑒別的吸附了人口腔呼出氣味的無菌紗布,是嗅源、送檢物、配物的統(tǒng)稱。鑒別臺 一種供嗅癌犬工作的6孔平臺。每孔內(nèi)可擺放一個被鑒物,由左至右排序為孔1、孔2、孔3、孔4、孔5、孔6。
(一)氣味提取
在專業(yè)人員的指導下,被提取人在清潔的室內(nèi)環(huán)境,當天無吸煙行為,飯前半小時,用清水漱口3遍,帶無菌手套,用手將10cm2方塊狀無菌紗布,豎直展平,緊貼在口前,用鼻吸氣,用口呼氣,自然呼吸1分鐘,輕咳(無痰漬)3下,使紗布充分吸附口腔呼出氣味。(二)氣味編號和保存
氣味提取后,專業(yè)人員用鑷子將紗布放入密封容器封口、編號,避光、常溫保存。編號記錄的是被提取人姓名、提取序號、性別、提取時間等,如SUNYONG 000001M 20090818B,SUNYONG表示姓名,000001表示提取序號,M表示男性(女性為W),20090818表示2009年8月18日提取,B表示早餐前(L表示午餐前,D表示晚餐前)。氣味保質(zhì)期將在以后研究中探討,本研究暫定為避光、常溫下3天。
(三)氣味分組
1. 將2份確診肺癌病人口腔呼出氣味制作成2份檢驗嗅源。標號為檢驗嗅源A、檢驗嗅源B(備用,以防嗅源A被污染,以下“備用”目的相同)。
2. 將2份被檢測者口腔呼出氣味標號為送檢物P、送檢物Q(備用)。
3. 將5位健康志愿者隨機排序,將其口腔呼出氣味用代碼表示,第1位的2份氣味代碼為配物1A、1B,第2位的代碼為配物2A、2B,以此類推,配物3A、3B,配物4A、4B,配物 5A、5B。
4. 將檢驗嗅源A與配物1A、配物2A、配物3A、配物4A、配物5A共6個氣味制作成氣味組M,用來檢驗嗅癌犬是否處于正常工作狀態(tài)。
5. 將送檢物P與配物1B、配物2B、配物3B、配物4B、配物5B共6個氣味制作成氣味組N,用來正式篩查。
6. 同組氣味中,各氣味的提取、保存條件和保存時間應相同。氣味分組見下表:
(四)嗅癌犬編號
隨機將嗅癌犬編號為嗅癌犬①、嗅癌犬②、嗅癌犬③。
(五)檢驗嗅癌犬是否處于正常工作狀態(tài)和配物的有效性。
1. 將氣味組M中6個氣味隨機擺入鑒別臺6個孔中,令嗅癌犬進入鑒別臺,進行未知篩查并用秒表計時。嗅癌犬在1分鐘內(nèi)果斷認定檢驗嗅源A,證明該犬處于正常工作狀態(tài),可以進行下一步對被檢測者的篩查。
2. 如嗅癌犬1分鐘內(nèi)沒有找出檢驗嗅源A或認定錯誤,則篩查停止,認定該犬沒有處于篩查肺癌的正常工作狀態(tài),不進行對被檢測者的篩查工作。
氣味組 被鑒物 配物M 檢驗嗅源A 1A 2A 3A 4A 5A N送檢物P 1B 2B 3B 4B 5B
3. 如3頭犬均對同一配物作出認定,則該配物不具備有效性,更換該配物,重新操作。
(六)經(jīng)過檢驗正常的嗅癌犬對被檢測者的篩查
1. 氣味組N中6個氣味隨機擺入鑒別臺6個孔中,令嗅癌犬進入鑒別臺,進行未知篩查并用秒表計時。嗅癌犬在1分鐘內(nèi)果斷找出送檢物P位置,證明該犬認定送檢物為肺癌氣味,篩查結論為陽性。
2. 如篩查持續(xù)時間到1分鐘時,犬還不能認定送檢物位置,則判定該次篩查結論為陰性。
3. 如嗅癌犬進入鑒別臺在1分鐘內(nèi),沒有認定送檢物P,而是認定配物,則剔除該配物,重新擺放被鑒物位置,計時清零,犬二次進入鑒別臺進行篩查。如犬還是不認定送檢物,判定該次篩查結果為陰性。
檢驗結果統(tǒng)計如下表:
表1:檢驗嗅癌犬正常工作狀態(tài)和配物有效性統(tǒng)計表
表2:嗅癌犬氣味篩查統(tǒng)計表
表3:篩查結論統(tǒng)計表
(一)使用方法設計科學、嚴密,具有可行性。嗅癌犬使用前檢驗其正常工作狀態(tài),具有實效性;氣味提取的條件限制,不對犬辨別肺癌氣味造成干擾,氣味分組時保證同組中各氣味提取、保存條件和時間相同,保證檢驗嗅源、送檢物、配物3者氣味的可比性;氣味分組、送檢物擺放位置隨機,具有科學性;通過3頭犬未知篩查認定,用百分率出具結論,防止一錘定音,具有可判斷性。條件允許,可以用多于3頭嗅癌犬對1名被檢測者進行篩查,結論更科學客觀。
(二)基于平時訓練時嗅癌犬的工作用時,篩查時間確定為1分鐘,比較嗅癌犬的工作量,符合警犬技術同類專業(yè)正常用時。
(三)氣味的保質(zhì)期應視盛裝氣味容器的密封程度、擺放容器的環(huán)境溫度等綜合考慮,由于氣味分組時考慮到同組中各氣味提取、保存條件和時間相同,本研究將保質(zhì)期暫定為3天,不會影響使用效果。
(作者單位:孫勇,公安部南京警犬研究所,210012;宋廣德:山東省醫(yī)科院附屬醫(yī)院,250062)
(編輯:顏 勤)
(山東省自然科學基金資助項目 Z2006C11)