文建軍 陳興元

黃褐斑，是一種獲得性色素沉著皮膚病，多發(fā)于青年女性，表現為色素對稱性沉著，輕者淡黃色或淺褐色，點片狀散布于面頰兩側。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組方法

昆明種小鼠72只，均為雌性，體重（20±2）g。隨機分成6組：正常對照組（A）、模型組（B）、低劑量調經祛斑片組（C）、中劑量調經祛斑片組（D）、高劑量調經祛斑片組（E）、陽性對照組（F），每組12只，分籠喂養(yǎng)。實驗動物由河南省實驗動物中心提供。

1.2 動物模型制作

①脫毛：先用剪刀剪去鼠背上的粗毛，再用電動剃須刀將剩余的絨毛剔除干凈，使背部皮膚充分暴露，剃毛面積2cm×2cm。每周脫毛1次，脫毛后用溫清水洗凈。②紫外線照射：將裝有實驗小鼠的籠子放在SS—03P型光療儀燈具正下方的2cm處，紫外線劑量設定為120μw/cm2照射時間為20min/d，連續(xù)照射8周，達到文獻所敘述的劑量。每周使用紫外線輻照度監(jiān)視計檢測紫外線光療儀輻照強度1次。

1.3 實驗藥物

調經祛斑片（河南靈佑藥業(yè)有限公司提供，國藥準字Z20080446.20090103-2）。成份為：黃芪、菟絲子、墨旱蓮、女貞子、枸杞子、當歸、白芍、何首烏等。將原藥片粉碎，加熱提取。制成煎劑，分為低、中、高劑量制劑。①空白組：蒸餾水0.2mL／10g體重灌服；②模型組：同正常組；③調經祛斑片低劑量組：以16%調經祛斑片水溶液0.2mL／10g體重（相當于人臨床用量的5倍）體重灌服；④調經祛斑片高劑量組：1倍于調經祛斑片低劑量組的劑量；⑤調經祛斑片高劑量組：2倍于調經祛斑片低劑量的劑量；⑥陽性對照組：以20.6%百消丹水溶液0.2mL／10g體重（相當于人臨床用量的2倍）灌服。

1.4 取材方法

1.4.1 取材

實驗第16周末，小鼠背部器械脫毛，面積為2cm×1cm.斷頸處死全部小鼠后，立即取下背部脫毛處全層皮膚，冷凍于-70℃冰箱內保存待測。

1.4.2 應膚組織勻漿的鉗備

每組小鼠皮膚組織標本取0.5g，在冰生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，用眼科小剪剪碎組織塊，倒入勻漿器中進行勻漿管中，用量筒量取4.5mL，冷生理鹽水，倒入勻漿器中進行勻漿；以400r／min的速度離心10min，取上清液進行指標涮定。

1.5 指標測定

皮膚及血液中SOD括性的測定采用黃嘌呤氧化醇法，皮膚組織的丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法。SOD、MDA（批號：20091222）測定試劑盒，均購于河南醫(yī)學生物工程研究所。

2 結果

2.1 調經祛斑片對紫外線照射致黑色素沉著模型小鼠皮膚中SOD活性的影響

紫外線照射后，照射皮膚組織SOD活性下降，模型組皮膚組織及血液中SOD含量下降與各用藥組之間存在非常顯著性差異與模型組相比。在皮膚及血液中，中藥中劑量組SOD含量明顯升高（P＜0.01），各給藥組之間無顯著性差異（P＞0.05），見表1。

表1 各組實驗動物皮膚及血清中SOD活性的影響（x-土s)

2.2 各組實驗動物皮膚及血液中MDA含量酌影響

模型組小鼠經紫外線照射后，血液及皮膚中MDA含量明顯升高，模型組MDA含量的升高與各用藥組之間存在顯著性差異，與模型組相比。中藥中劑量組SOD含量明顯下降（P＜0.01），各給藥組之間無顯著性差異（P＞0.05）見表2。

表2 各組實驗動物皮膚及血清中MDA含量的影響（±s）

表2 各組實驗動物皮膚及血清中MDA含量的影響（±s）

注：與摸型組相比.*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 皮膚中MDA（nmol/mgprol） 血清中MDA（nmol/mL）空白組 12 41.01±5.40** 5.80±0.81**模型組 10 61.30±5.00 6.70±0.86中藥低劑量組 9 52.29±4.42* 6.40±0.73*中藥中劑量組 10 43.62±6.80** 5.90±0.90**中藥高劑量組 10 52.91±4.50* 6.10±0.90*陽性對照組 12 42.94±6.40** 5.80±0.90**

3 討論

祖國醫(yī)學認為，黃褐斑是全身性疾病的一種局部反應，多與氣血、臟腑功能失調有關。本組實驗經過長期臨床觀察發(fā)現，該病以肝氣郁結和氣滯血瘀型的為多，故認為“無瘀不成斑”。所以調經祛斑片具有疏肝解郁、活血化瘀、祛斑養(yǎng)顏之功。

現代醫(yī)學認為，彌漫性過度色素沉著，常伴內分泌失調，在垂體分泌促腎上腺皮質激素時，也分泌過量的黑色素細胞刺激素，因而皮膚黑色加深。色素過多的原因之一是由于皮膚黑色素產生過多，而酪氨酸酶在黑色素生物合成過程中起著極為重要的作用。酪氨酸酶是黑色素代謝中的關鍵酶，對酪氨酸酶活性調節(jié)可直接影響黑色素的合成。研究表明，調經祛斑片對酪氨酸酶活性有顯著抑制作用，能降低“黃褐斑”大鼠皮膚、肝臟中酪氨酸含量，這可能是調經祛斑片治療黃褐斑的藥理學基礎之一。

模型組小鼠皮膚組織及血液中SOD活性明顯降低。MDA含量明顯增加， 調經祛斑片低、中、高劑量組的皮膚及血液中SOD和MDA含量與正常組動物比較無顯著性差異，與模型組比較，調經祛斑片低、中、高組的皮膚及血液中SOD活性明顯增高且有顯著差異，調經祛斑片低、中、高劑量組的皮膚組織中MDA含量則明顯降低。調經祛斑片提取液對紫外線照射引起的小鼠黃褐斑病理模型具有明顯的保護和治療作用。

以上研究還表明，調經祛斑片毒性小，安全可靠，臨床療效肯定，值得進一步研究、開發(fā)利用、臨床分析。

［1］ 揚智榮，張麗宏，黃昕紅.加堿滋水清肝飲對皮膚SOD及脂褐質的調節(jié)作用[J].中國美容醫(yī)學，2005，14（4）：485-487

［2］ 陳奇.中藥藥理實驗方法學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000.305