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醫(yī)院感染是指住院患者住院期間發(fā)生的感染以及在醫(yī)院內(nèi)獲得出院后發(fā)生的感染，現(xiàn)代醫(yī)療技術發(fā)展增加了侵入性操作、抗生素使用、放療化療、免疫抑制劑推廣等，均可能致使醫(yī)院感染問題加重，導致臨床耐藥菌株增加[1]。由于醫(yī)生使用抗生素治療感染時全憑經(jīng)驗，存在盲目性，導致更多耐藥菌株產(chǎn)生。為此，本文旨在對2009年10月～2010年6月住院患者的標本進行病原菌種類分布、菌株耐藥性分析，以期達到提高抗生素合理使用水平的目的，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2009年10月～2010年6月住院患者的660份常規(guī)送檢標本，包括患者的痰液、中段尿、傷口分泌物、糞便、胸腹水、膽汁等各類送檢標本，排除同一患者的相同部位重復菌株，共分離出病菌457株。

1.2 質控菌株

本試驗選用的質控菌株來自衛(wèi)生部的臨床檢驗中心，菌株包括：大腸埃希菌ATCC 25922、金葡菌ATCC 25923、白色假絲酵母菌ATCC 90029、銅綠假單胞菌ATCC 27853。

1.3 實驗儀器和試劑

包括K-B紙片、ATB全自動微生物藥敏鑒定分析儀、哥倫比亞瓊脂、藥敏板、鑒定板及相關配套試劑等。

1.4 實驗方法

1.4.1 標本檢測

送檢標本的細菌分離培養(yǎng)均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第3版）進行，將檢出的細菌作革蘭染色、生化反應鑒定，得出菌種分離鑒定結果。

1.4.2 藥敏實驗

采用K-B紙片瓊脂擴散法、稀釋法（包括肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法）、E試驗法、儀器法進行定性定量檢測細菌是否對藥物耐藥[2]。

1.4.3 耐藥菌的檢測方法

上述鑒定篩選出MRS及ESBLs菌株，按CLSI2005年版本所推薦的方法，使用頭孢西丁紙片確證葡萄球菌屬的MRS；采用雙紙片協(xié)同法對大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株進行確證[3]。腸球菌中的高耐藥菌株對高濃度慶大霉紙片(120μg/m)的抑菌直徑圈≤6mm可判為耐藥，抑菌圈直徑7～9mm時,應進一步用肉湯稀釋法測MIC以確證。肺炎鏈球菌檢測采用1μg苯唑青霉素紙片，抑菌圈直徑＞20mm提示對青霉素G敏感,如抑菌圈直徑＜19mm，提示該菌對青霉素耐藥或中度敏感,需用稀釋法進一步確證。測試ESBLs采用雙紙片協(xié)同試驗，β-內(nèi)酰胺內(nèi)酶監(jiān)測采用產(chǎn)色頭孢菌素法、碘-淀粉測定法。

2 結果

2.1 病原菌檢出

共分離出457株病原菌，革蘭氏陰性桿菌278株（60.8%），革蘭氏陽性菌116株（25.4%），真菌63株（13.8%）；G-菌中以銅綠假單胞菌居首位，G+菌以葡萄球菌為主，63株真菌中白色假絲酵母菌共41株（9.0%）。G-菌及G+菌檢出見表1。

表1 檢出G-菌及G+菌情況[n(%)]

2.2 藥敏試驗及耐藥性結果

2.2.1 藥敏試驗

G+球菌對各種常用抗菌藥物的耐藥率普遍＞50%，金葡菌對青霉素耐藥達100.0%，G+球菌僅對萬古霉素較為敏感；革蘭陰性桿菌對各種抗菌藥物的抗藥程度不等，對亞胺培南、阿米卡星較為敏感。

2.2.2 耐藥情況

①革蘭陰性菌的耐藥情況見表2；②革蘭氏陽性菌中對各種常用抗菌藥物的耐藥率見表3；③真菌耐藥率：真菌中占首位的白色假絲酵母菌對常用抗真菌藥保持較高的敏感性。

表2 革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率分布（%）

表3 G+菌對抗菌藥物的耐藥率（%）

3 討論

本次調查院內(nèi)感染的致病菌種類主要以革蘭氏陰性菌為主，其次為革蘭陽性菌及白色假絲菌屬，與國內(nèi)相關報道結果基本一致[4]。在所有檢出的病原菌中，銅綠假單胞菌位居首位，占所有檢出病菌的12.5%，對多種常用抗菌藥物的耐藥率達50.0%以上，臨床醫(yī)生不合理的單藥應用是導致泛耐藥銅綠假單胞菌的根本原因。

本次調查結果顯示，本院發(fā)生的醫(yī)院感染中，各種致病菌對常用抗菌藥物的耐藥率不容樂觀，抗菌藥物的臨床使用情況有待改善。革蘭陰性菌對阿米卡星、環(huán)丙沙星、亞胺培南有較高敏感性，大多數(shù)革蘭陽性菌對哌拉西林、氨芐西林耐藥率達80.0%以上。革蘭氏陽性菌中的金葡菌對青霉素、紅霉素、氨芐西林的耐藥率分別達到100.0%、89.2%、93.4%，其他葡萄球菌對青霉素、紅霉素、氨芐西林、苯唑西林也達到80.0%以上，此外，金黃色葡萄球菌對除了萬古霉素、阿米卡星、氯霉素以外的其他抗菌藥物均顯示高耐藥性（＞50.0%）。根據(jù)藥敏試驗結果，建議慎重使用萬古霉素、阿米卡星為預防性用藥, 以保護其敏感性。

致病菌產(chǎn)生耐藥菌株，與臨床醫(yī)生的不規(guī)范使用抗菌藥物有關。醫(yī)院感染治療時,建議對感染病人的標本進行細菌培養(yǎng)、藥敏實驗，根據(jù)結果適當選用抗菌藥物，可減緩耐藥菌的產(chǎn)生。

[1] 梁學柱.醫(yī)院感染病原菌的構成及耐藥性分析[J].安慶醫(yī)學，2007,28（2）：39-41.

[2] 張衛(wèi)華.細菌耐藥機理及其耐藥細菌的檢測與臨床[M].中國社區(qū)醫(yī)師醫(yī)學專業(yè)，2010,(35),12:151.

[3] 楊秀云，和建波，等.醫(yī)院感染病原菌的臨床分布特征及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2010,20（9）：1313-1315.

[4] 邱菊紅，何貴元,周成芳.臨床常見醫(yī)院感染病原菌及耐藥性觀察[J].中國消毒學雜志，2011,28（1）：45-47.