劉君 黎志福 歐陽春華

三黃滴鼻液制劑處方中含有黃芪、黃芩、黃連等八味藥材，是我市某醫(yī)院的自制制劑，主治鼻炎和過敏性鼻炎。藥材黃芩在該處方中是主藥，有關(guān)黃芩中的黃芩苷含量測定，己有法定方法［1］，而三黃滴鼻液中黃芩苷含量測定的方法，國內(nèi)外未見報(bào)道。本文對三黃滴鼻液中黃芩苷含量進(jìn)行了定量測定。該方法簡便、準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，可以作為三黃滴鼻液中黃芩苷含量的質(zhì)量控制方法。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 LC-10ATvP高效液相色譜儀，SPD-10A檢測器，Lc solution工作站(日本島津公司);AG-135電子分析天平(瑞士梅特勒公司)。

1.2 試藥與試樣 甲醇(色譜純，上海國藥集團(tuán))、黃芩苷對照品(110715-201016，94.0%，中國藥品生物制品檢定所提供)、三黃滴鼻液樣品三批(批號(hào)101220，101221，110301株洲市某醫(yī)院制劑室提供)

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 選用 Agilent ZORBAX SB-C18(5 μm，250 mm×4.6 mm)為分析柱，以甲醇-水(50:50)為流動(dòng)相，流速1.0 ml/min，檢測波長274nm，柱溫為35℃，理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算不低于2500。

2.2 對照品溶液制備 精密稱取黃芩苷對照品I:0.01271 g，II:0.01145 g，置 100 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品溶液制備 精密量取樣品溶液5 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液作供試品溶液。

2.4 陰性對照溶液制備 按三黃滴鼻液處方與工藝要求，制備缺黃芩藥材的陰性樣品，取陰性樣品溶液，照2.3項(xiàng)下供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液。

2.5 專屬性試驗(yàn) 分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照液各5μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明:供試品色譜中，在與對照品色譜峰相應(yīng)的位置上有一相同的色譜峰，而陰性對照溶液在與對照品色譜峰相應(yīng)的位置處未見色譜峰(見圖1)。

圖1 HPLC色譜圖

2.6 線性關(guān)系與范圍 精密吸取黃芩苷對照品I續(xù)濾液2、4、6、8、10 μl進(jìn)樣，測定其峰面積，以樣品量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為:Y=4210327X-75979，r=0.9999(見表1)，線性范圍為:0.2389 ～1.1947 μg。

表1 線性關(guān)系考察結(jié)果

2.7 精密度試驗(yàn) 精密取同一對照品溶液5 μl，重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積(見表2)，計(jì)算 RSD=0.1%(n=5)，結(jié)果表明精密度良好。

表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試溶液分別于0、1、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣5 μl，記錄峰面積(見表3)。結(jié)果顯示，供試品溶液峰面積在24 h內(nèi)變化不大，RSD=0.1%(n=6)，表明樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

表3 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.9 回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量的樣品5 ml，置20 ml容量瓶中，分別精密加入黃芩苷對照品I溶液5.0、6.0、7.0 ml，加流動(dòng)相定容至刻度，作為供試液，每一濃度梯度制備三份供試液，分別測定含量，分別計(jì)算回收率(見表4)，RSD為0.3%，平均回收率為99.48%，結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確性符合要求。

表4 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.10 樣品測定 按擬定的含量測定方法，依法測定三批樣品中黃芩苷的含量，重復(fù)測定2次，計(jì)算平均值，結(jié)果(見表5)。

表5 三批樣品黃芩苷含量測定結(jié)果

3 討論

3.1 從三批樣品黃芩苷含量測定的結(jié)果分析，由于該制劑原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)未對黃芩苷的含量進(jìn)行控制，各批之間黃芩苷的含量相差比較懸殊，有可能是黃芩原藥材質(zhì)量差異造成的，也有可能是因?yàn)樯a(chǎn)過程中，工藝控制不嚴(yán)格造成的。鑒于此，有必要對該制劑黃芩苷的含量進(jìn)行控制。

3.2 采用該測定方法，其他藥材組分未對黃芩苷形成干擾，線性關(guān)系、精密度、穩(wěn)定性、回收率試驗(yàn)均較好地滿足方法學(xué)驗(yàn)證的要求，方法專屬性強(qiáng)，簡便、準(zhǔn)確，可以作為三黃滴鼻液中黃芩苷含量的質(zhì)量控制方法。

［1］中國藥典委員會(huì).中國藥典.二部.北京;化學(xué)工業(yè)出版社，2010:282.