王路梅，楊晉川，郭 惠，張 雷，景懷琦

從蟑螂體內(nèi)檢出O1群霍亂弧菌＊

王路梅，楊晉川1，郭 惠1，張 雷1，景懷琦2

霍亂弧菌可引起霍亂的發(fā)生，是國(guó)家法定的甲類(lèi)傳染病，多檢出于水體，海產(chǎn)品和水產(chǎn)品中；而從蟑螂體內(nèi)檢出霍亂弧菌尚未有報(bào)道。筆者于2010年12月份從蟑螂體內(nèi)檢出一株O1群霍亂弧菌，稻葉血清型?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來(lái)源 分別在徐州市區(qū)的超市、醫(yī)院、居民區(qū)、賓館、餐飲店，采集蟑螂共計(jì)30份。

1.1.2 試劑、血清及設(shè)備 霍亂弧菌熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒為深圳易瑞生物制品有限公司生產(chǎn)；霍亂弧菌O1/O139免疫磁珠為天津生物芯片技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品；堿性蛋白胨水、TCBS為杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)，弧菌顯色培養(yǎng)基為法國(guó)Chromagar產(chǎn)品，弧菌生化鑒定管購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；霍亂弧菌多價(jià)、小川、稻葉型血清由中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供。Invitrogen Bead RetrieverTM全自動(dòng)微生物磁珠分選儀、ABI 7500熒光定量PCR儀、智能恒溫恒濕培養(yǎng)箱單位自備。

1.2 方法

1.2.1 分離方法 將采集到的單只蟑螂用無(wú)菌的方法剖開(kāi)蟑螂，取其腸內(nèi)容物，剪碎放入2mL堿性蛋白胨水中，36℃增菌8h，取8h增菌液1mL進(jìn)行霍亂弧菌熒光PCR檢測(cè)，熒光PCR檢測(cè)陽(yáng)性者進(jìn)行2次增菌，36℃培養(yǎng)18h；分別取PCR陽(yáng)性的8h增菌液和二次增菌液各500μL進(jìn)行免疫磁珠富集，將免疫磁珠富集后的混懸液分別劃線于TCBS平板和弧菌顯色平板，36℃培養(yǎng)18h。

1.2.2 血清凝集 挑取TCBS和弧菌顯色平板上的可疑菌落轉(zhuǎn)種于營(yíng)養(yǎng)平板分純，取純菌落分別與O1群霍亂弧菌多價(jià)和O139群霍亂血清凝集，如O1群多價(jià)血清凝集陽(yáng)性再分別與稻葉型和小川型血清凝集，生理鹽水陰性。

1.2.3 生化確認(rèn) 取純菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，氧化酶試驗(yàn)，以及其它生化確認(rèn)試驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 霍亂弧菌檢出情況 經(jīng)熒光PCR方法、免疫磁珠富集、TCBS和弧菌顯色培養(yǎng)基分離證實(shí)，從30份蟑螂體內(nèi)檢出一株O1群霍亂弧菌，檢出率為3.33%。

2.2 菌株生物特性 革蘭氏染色陰性，菌體短小，呈弧狀；氧化酶＋；血清分型為O1群稻葉型霍亂弧菌，生化特征詳見(jiàn)表1。

表1 蟑螂體內(nèi)檢出霍亂弧菌生化譜

2.3 霍亂弧菌的帶毒情況 此株霍亂弧菌經(jīng)中國(guó)CDC傳染病所國(guó)家細(xì)菌分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)證實(shí)，不攜帶ctxAB毒素基因。

3 討 論

蟑螂或稱蜚蠊，俗稱偷油婆、茶婆子、灶螞子、貨郎等。在昆蟲(chóng)中，蟑螂是最古老的種類(lèi)之一。由于它們適應(yīng)性強(qiáng)，早已從發(fā)源地非洲通過(guò)海運(yùn)商船被帶到南美、東歐和南亞的港口城市，以后逐漸擴(kuò)散到溫帶，甚至到北方寒冷地區(qū)，現(xiàn)已成為當(dāng)今重要的衛(wèi)生害蟲(chóng)。蟑螂可攜帶多種細(xì)菌，病毒，真菌，寄生蟲(chóng)卵。若使用被蟑螂污染過(guò)的食物極易引起腸道傳染病和腸道寄生蟲(chóng)病的發(fā)生。據(jù)翟明芳［1］等人的報(bào)道，蟑螂在不同生境下體表帶菌率為93.65%，而在醫(yī)院，農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，賓館及居民區(qū)蟑螂的體表帶菌率為100%；而林英姿［2］等人對(duì)170只蟑螂體表帶菌的調(diào)查結(jié)果為：82.4%的蟑螂都不同程度的帶有大腸桿菌，銅綠假單胞菌，沙門(mén)氏菌，金黃色葡萄球菌，變形桿菌和霉菌等。

在我國(guó)蟑螂以前主要分布于南方地區(qū)，那里的氣候常年溫暖濕潤(rùn)，適宜蟑螂的生存。隨著交通、物流的日益發(fā)達(dá)，蟑螂逐漸被帶到了北方。徐州地區(qū)是從1995年以后才逐漸有蟑螂孽生的。蟑螂適宜生存溫度為20～30℃，低于0℃就會(huì)被凍死。徐州地區(qū)冬季較寒冷，但是隨著人民生活水平的提高，取暖設(shè)備的普遍使用，以致蟑螂可以終年活動(dòng)和繁殖。此次檢出的1株O1群的霍亂弧菌來(lái)源于本市某一大型超市加工區(qū)內(nèi)采集的蟑螂體內(nèi)。由于超市都具有取暖設(shè)施并且有充足的食物和水源，非常適宜蟑螂的孽生和繁殖。筆者分析此只蟑螂有可能污染過(guò)海水產(chǎn)品，并攜帶了海水產(chǎn)品中常見(jiàn)的霍亂弧菌。

霍亂弧菌可引起烈性腸道傳染病，起病急，傳播快，自1817年首次爆發(fā)以來(lái)已經(jīng)引起了7次世界范圍內(nèi)的霍亂大流行［3］。此株O1群霍亂弧菌雖然不攜帶ctxAB毒素基因，但是在特定的條件下，即使非產(chǎn)毒株的霍亂弧菌如污染水或食品，也可引起水源性或食源性病例甚至爆發(fā)流行［4］。超市內(nèi)的蟑螂如不被及時(shí)消滅，蟑螂隨處爬行，釋放排泄物，就極易造成超市內(nèi)霍亂弧菌的大面積污染。而霍亂的主要傳播途徑就是經(jīng)食物和水，所以要切實(shí)加強(qiáng)超市的衛(wèi)生管理，徹底滅除蟑螂。

［1］翟明芳，馬楨紅，張夢(mèng)寒，等.蘇州市蟑螂帶菌情況調(diào)查研究［J］.醫(yī)學(xué)動(dòng)物防制，2008，24（2）：133－134.

［2］林英姿，崔玉寶，楊文，等.海南5城市蟑螂種類(lèi)組成及其體表帶菌情況調(diào)查［J］.中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志，2008，26（1）：77－78.

［3］高守一.霍亂防治手冊(cè)［M］.5版.北京：中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部，1999：1－3.

［4］嚴(yán)寒秋，李偉，吳疆，等.一起有非產(chǎn)毒霍亂弧菌引發(fā)腹瀉暴發(fā)的調(diào)查［J］.中華流行病學(xué)雜志，2006，27（10）：918－919.

R378.3

A

1002－2694（2011）10－0948－02

＊江蘇省衛(wèi)生廳預(yù)防醫(yī)學(xué)科研項(xiàng)目（Y200722）。

景懷琦，Emai：jinghuaiqi＠icdc.cn

1.徐州市疾病預(yù)防控制中心，徐州 221006；2.中國(guó)CDC傳染病所，北京 102206

2011－05－03；

2011－08－07