何菊芳,佟愛(ài)華,董 梅,蔣 瀅,褚衍闖,楊彩娥

(解放軍309醫(yī)院 檢驗(yàn)科,北京 100091）

近年來(lái)結(jié)核病的發(fā)病有上升趨勢(shì),我國(guó)每年新增160萬(wàn)例。結(jié)核病患者血清蛋白電泳譜的特征及其與體液免疫水平相關(guān)性的報(bào)道國(guó)內(nèi)極少。為此,本研究采用法國(guó)SEBIA公司高效全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行血清蛋白電泳分析,調(diào)查其體液免疫水平。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 對(duì)照組 體檢健康者51例,男27例,女24例,平均年齡35歲,健康體檢者。

1.1.2 肺結(jié)核組 本院初治的符合中國(guó)結(jié)核痰分類方法標(biāo)準(zhǔn)[1]肺結(jié)核住院患者63例,男32例,女44例,年齡平均為 38歲,所有病例均經(jīng) X線、CT、病史、癥狀、體征等證實(shí),采用同樣的抗結(jié)核治療方案。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器 法國(guó)SEBIA CAPILLRYS全自動(dòng)高效毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行血清蛋白電泳分析,在200 nm波長(zhǎng)檢測(cè)各種蛋白質(zhì)的百分比濃度;其它指標(biāo)的檢測(cè)在日立7 600全自動(dòng)分析儀上進(jìn)行。

1.2.2 試劑 TP、ALB試劑為北京萊邦公司產(chǎn)品,免疫球蛋白等指標(biāo)的試劑由德賽公司提供。電泳試劑為法國(guó)SEBIA公司CAPILLRYS全自動(dòng)毛細(xì)管電泳配套產(chǎn)品。

1.3 方法空腹靜脈采血分離血清。TP、ALB檢測(cè)方法分別為雙縮脲法、溴甲酚綠法。免疫球蛋白等項(xiàng)目的檢測(cè)方法為免疫比濁法。血清蛋白電泳分析方法為高效毛細(xì)管法,按照操作規(guī)程進(jìn)行。

應(yīng)用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布的兩組均數(shù)比較采用t檢驗(yàn),非正態(tài)分布的兩組均數(shù)比較采用秩和檢驗(yàn),結(jié)果用(±s）表示,P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 見表1。

2.2 通過(guò)電泳圖譜的比較可以看出:ALB區(qū)帶所占比例有所下降,α1、γ區(qū)帶有所升高(三者均為P＜0.05）;α2區(qū)帶明顯升高(P＜0.01）。

表1 兩組血清蛋白電泳及體液免疫等指標(biāo)水平的比較(±s）

表1 兩組血清蛋白電泳及體液免疫等指標(biāo)水平的比較(±s）

肺結(jié)核組(n=63） 正常對(duì)照組(n=51）ALB(%） 51.03±6.74* 59.5±2.86 α1(%） 5.93±1.70* 3.87±0.4 α2(%） 14.61±18.82** 8.96±1.12 β1(%） 5.38±0.85 5.85±0.58 β2(%） 5.72±1.13 4.75±0.83 γ(%） 21.99±4.78* 17.6±2.45 TP(g/L） 68.9±8.41* 70.55±4.87 ALB(g/L） 39.26±5.77** 45.75±4.72 C3(g/L） 1.65±0.39 1.28±0.254 C4(g/L） 0.41±0.13 0.27±0.082 IgG(g/L） 16.06±5.41** 12.34±2.72 IgM(g/L） 1.21±0.70 1.42±0.564 IgA(g/L） 3.74±2.11* 2.45 ±0.75 CRP(mg/L） 73.22±70.63** 1.02±1.07

圖1 肺結(jié)核患者血清蛋白電泳典型圖譜

圖2 正常人血清蛋白電泳圖譜

3 討論

由表1可見,肺結(jié)核組血清中ALB水平下降(P＜0.01）,TP水平下降(P＜0.05）,說(shuō)明患者存在蛋白合成代謝障礙,血清TP的降低主要是ALB下降所致。發(fā)熱是肺結(jié)核最常見的癥狀,主要是因結(jié)核菌毒力很強(qiáng)而出現(xiàn)中毒癥狀[2]。另外因結(jié)核菌毒素的影響,使人體蛋白合成代謝障礙[3]。如蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)補(bǔ)充不足或因消化系統(tǒng)功能差,影響吸收時(shí)會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)代謝負(fù)平衡[4],引起不同程度的血清ALB低下,此降低在血清蛋白電泳的圖譜上表現(xiàn)更為直觀,因ALB主要是由肝細(xì)胞合成,故其水平的顯著下降可能與肝臟受損有關(guān)[5]。

患者組中α1、γ區(qū)帶有所升高(P＜0.05）,α2區(qū)帶明顯升高(P＜0.01）,雖β2輕度增高,β1輕度下降,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＞0.05）,通過(guò)圖譜的比較可直觀地看到。α1區(qū)帶主要可分為α1抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白,為主要的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,在急性炎癥時(shí)增高。肺結(jié)核是結(jié)核分枝桿菌感染引起的呼吸道傳染病,感染后即發(fā)生炎癥反應(yīng)。α2區(qū)帶主要包括結(jié)合珠蛋白、α2-巨球蛋白,急性時(shí)相反應(yīng)中血漿結(jié)合珠蛋白增加,在低白蛋白血癥時(shí)α2-巨球蛋白含量可增高,可能系一種代償機(jī)制以保持血漿膠體滲透壓?；颊呓Mγ區(qū)帶的比值升高(P＜0.05）,γ區(qū)帶球蛋白主要成份為免疫球蛋白IgG、IgA、IgM 和CRP,γ區(qū)帶百分比的增高與其中各蛋白組份水平的升高有關(guān),可能是感染刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng),使得免疫球蛋白和CRP含量增高[6-7]。CRP在機(jī)體炎癥或組織破壞時(shí)出現(xiàn)于血清中的一種特殊蛋白質(zhì),在正常人血清中含量極微,急性炎癥時(shí)可明顯升高,無(wú)組織器官特異性?；颊吒腥窘Y(jié)核后,病灶周圍聚集大量活性巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等,能釋放白細(xì)胞介素26和腫瘤壞死因子,刺激肝細(xì)胞誘使CRP合成增加,病變消退后迅速下降至正常,且不受放療等因素的影響[8];同時(shí)炎癥物質(zhì)和組織損傷物質(zhì)大量進(jìn)入肺循環(huán),產(chǎn)生免疫反應(yīng),通過(guò)相應(yīng)的細(xì)胞因子也可刺激肝細(xì)胞合成CRP[9]。表中顯示疾病組中CRP水平極度升高,為正常對(duì)照組的幾十倍,表明患者處于急性炎癥期,體液免疫處于應(yīng)急狀態(tài)。

有動(dòng)物和臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)體液免疫在調(diào)節(jié)抗結(jié)核免疫反應(yīng)中發(fā)揮作用,對(duì)過(guò)程中各種免疫球蛋白的變化尚有爭(zhēng)議[10],也有文獻(xiàn)報(bào)道機(jī)體體液免疫水平高低也和結(jié)核病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[11],較強(qiáng)的體液免疫反應(yīng)可增強(qiáng)結(jié)核病化療效果[12]。本研究中患者組血清IgG水平顯著升高(P＜0.01）,IgA略有增高(P＜0.05）,而IgM略有升高但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05）,與部分報(bào)道相類似[13-15]。補(bǔ)體是一組具有酶活性的蛋白質(zhì),具有多種生物效應(yīng),如增強(qiáng)吞噬作用,增加血管的通透性,中和病毒,免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用等,其中C3、C4是免疫功能的重要標(biāo)志[16]?；颊呓M中C3、C4水平略有升高但無(wú)顯著性差異,可能與IgG和IgM與結(jié)核菌結(jié)合,形成的激活物激活C4、C3有關(guān)。

綜上所述,肺結(jié)核患者血清蛋白電泳圖譜、體液免疫水平均可發(fā)生改變,兩者密切關(guān)聯(lián),通過(guò)對(duì)患者血清蛋白電泳圖譜的分析可對(duì)其肝損傷和體液免疫情況得到大致的了解,而對(duì)其體液免疫等指標(biāo)的檢測(cè)可以得到更為全面、詳盡的分析,聯(lián)合應(yīng)用可為臨床提供更多的參考價(jià)值。

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