俞玉忠 穆斌

用小鼠來檢測藥品的異常毒性，是各國藥品檢驗中用得最多的生物檢定方法，我國從1953年第一部藥典發(fā)行以來，異常毒性檢測方法一直被收載在各版藥典中，并且不斷地進行了改進。從2005年版藥典開始，雖然從很多品種的質(zhì)量標準中刪去了異常毒性的檢查項目，但一直到2010年版藥典仍然保留了部分品種的異常毒性檢查項目，并且在附錄中也介紹了異常毒性檢查法［1］。此外，在新藥的臨床安全性評價試驗中，小鼠仍得到了廣泛應用［2-3］，有時還用小鼠做成動物模型［4］，對新開發(fā)藥物的療效進行研究。靜脈注射和腹腔注射是小鼠最常見的兩種給藥途徑，小鼠的尾靜脈注射對初學者來說，可能有一定難度，但注射是否成功容易判斷，不會對實驗結果造成影響。而腹腔注射雖然看似簡單，可如果操作不當，很容易造成注射失敗，并不被發(fā)現(xiàn)，直接影響到實驗結果。本文主要對小鼠腹腔注射的正確方法及注射時需注意的事項進行了介紹。

1 小鼠的選擇

1.1 小鼠應同一來源同品系，雌者無孕，健康無傷，毛色光滑，眼睛紅亮，活潑，體重17 ～20 克［5］。

1.2 盡量選擇雌性小鼠，因為整群飼養(yǎng)的雄性小鼠時常打斗，如確實需要選擇雄性小鼠則應分開籠飼。

2 腹腔注射的方法

2.1 小鼠的抓取 左手握小鼠，用拇指、食指捏住小鼠頸背部，用無名指及小指固定其尾和后肢，腹部向上，頭呈低位［5］。

2.2 在下腹部離腹白線約0.5 cm處將注射針刺入皮下，沿皮下向前推進3～5 cm，然后使針頭與小鼠腹部約成30°角刺入腹腔，針頭刺入的速度要快，剛開始刺時會有一種明顯的抵抗力，那是因為鼠皮具有韌性，后來突然會有一種抵抗力消失的感覺，說明針頭已刺入腹腔內(nèi)，此時就可以開始進藥。

2.3 注射完畢后，輕輕將針頭旋轉(zhuǎn)一定角度，緩慢拔出針頭，防止藥液外漏。

2.4 注射成功與否的判斷 刺入腹腔后可輕拉針筒，如確認無血液或腸內(nèi)容物流入，說明注射成功。

3 試驗技巧

3.1 小鼠腹腔類似于小氣球，扎針前有阻力，扎穿后可直接進入，里面空空的。

3.2 如以前沒有腹腔注射經(jīng)驗，則在做實驗前應先練習幾次，可以選已做完實驗需淘汰的小鼠來練習，如果條件允許，最好選跟試驗條件要求一致的健康小鼠，用純化水替代藥品進行注射，注射后再觀察一段時間。這樣不僅能體驗手感，還可以判斷出針頭是否刺入內(nèi)臟。

3.3 針頭刺入小鼠腹腔內(nèi)一般不超過1 cm，如刺入過淺，不易刺破腹腔壁，過深的話就容易刺破內(nèi)臟。

4 注意事項

4.1 注射時，小鼠頭部一定呈低位，尾部稍稍提起，使內(nèi)臟前移。

4.2 有的實驗人員為了避免針頭刺入內(nèi)臟，針頭剛插入皮膚就向上挑起，這是一種不正確的操作手法。首先，針頭剛插入皮膚時可能還沒刺破腹腔壁，此時挑起注射往往只是將藥液注射在皮下，而皮下注射和腹腔注射是兩種不同的給藥途徑。另外，針頭挑起后，一不小心就容易從皮膚上掉出，致使注射不能成功。

5 結論

5.1 腹腔注射成功的關鍵在于個人手法，只要按操作規(guī)程要求進行操作，不擅自創(chuàng)新或改變注射方法，就能順利完成實驗。

5.2 實驗人員膽子要大，心要細，注射時應做到穩(wěn)、準、狠，這樣操作起來就會更順利。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典.第2部.北京，中國醫(yī)藥科技出版社，2010:98-99，附錄XI C.

［2］ 劉冬戀，馬松濤，曾仁勇，等.肉桂揮發(fā)油對小鼠的半數(shù)致死量測定.西南國防醫(yī)藥，2010，20(5):481-482.

［3］ 吳正平.一枝黃花皂苷對小鼠腹腔注射半數(shù)致死量(LD50)的測定.黑龍江中醫(yī)藥，2009，(3):41-42.

［4］ 石丹萍，陳小嬌，陳銀寶，等.腹腔注射七氟烷對小鼠鎮(zhèn)痛及催眠作用的影響.中國實用醫(yī)藥，2010，5(3):1-2.

［5］ 中國藥品生物制品鑒定所.中國藥品檢驗總所.中國藥品檢驗標準操作規(guī)范.北京，中國醫(yī)藥科技出版社，2010:304-306.