劉 麗
安徽醫(yī)學高等專科學校,安徽 合肥 230000
重樓是延齡草科重樓屬植物的干燥根莖[1],藥用歷史悠久?!吨腥A人民共和國藥典》2010版收載的品種為百合科植物云南重樓 Parispolyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七葉一枝花 Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根莖。重樓的化學成分多樣,含有甾醇、甾醇苷、黃酮苷、甾體皂苷類成分等,其中甾體皂苷具有很強的生理活性和藥理活性?,F代藥理研究發(fā)現,重樓活性成分具有抗腫瘤、消炎、抑菌、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、止血等作用,廣泛用于臨床治療癌癥、子宮出血、巨性支氣管炎和流行性腮腺炎。重樓經加工制成的宮血寧膠囊具有涼血,收澀止血。用于崩漏止血,月經過多,產后或流產后宮縮不良出血及子宮功能性出血屬血熱妄行證者。近年來,隨著化學成分和藥理研究的深入,發(fā)現重樓的藥用價值具有巨大的開發(fā)潛力,越來越受到廣泛的重視。但重樓屬植物種類繁多,其根莖均可入藥,影響重樓藥材內在質量的因素較多,市售重樓藥材質量差異較大。對重樓的質量檢測方法主要有:TLC法、RP-HPLC法、HPLC-ELSD法、HPLC指紋圖譜法等。因此,為更好地開發(fā)利用這一豐富的自然資源,本文對重樓的化學成分和質量控制研究情況進行了歸納、綜述。
重樓化學成分復雜,主要有甾體類、黃酮類成分,以及多糖、脂肪酸酯、氨基酸、微量元素、鞣質等,主要有效成分是甾體皂苷,約占總化合物數目的80%。
重樓甾體類又可分為甾體皂苷、植物蛻皮激素、植物甾醇幾類。
1.1.1 甾體皂苷
目前研究表明甾體皂苷廣泛存在于重樓屬植物中,按苷元的不同主要有兩類,一類為薯蕷皂苷元 (diosgenin)的糖苷,另一類為偏諾皂苷元 (pennogenin)的糖苷,主要以薯蕷皂苷元的多種糖苷為主[2]。連接的糖主要有 D-葡萄糖、L-鼠李糖和L-呋喃阿拉伯糖3種,苷元與糖多在3位連接成苷[3]。其中含有薯蕷皂苷元的有重樓皂苷 p1、重樓皂苷p2、重樓皂苷 p3、重樓皂苷 p4、七葉一枝花皂苷、薯蕷素和纖細薯蕷皂苷等[4],[3],[6],含有偏諾皂苷元的有5個皂苷[7]。此外還含有蚤休皂苷A,B(pariphyllins A,B)、重樓甾酮 (paristerone)、孕甾雙烯醇酮苷與一些微量皂苷[7-9]。黃蕓等人還從華重樓中發(fā)現了一個新的類膽甾烷皂苷,這是在重樓屬植物中發(fā)現的第一個具有芳香環(huán)的類膽甾烷皂苷[10]。
1.1.2 植物蛻皮激素
重樓屬植物中分離得到的植物蛻皮激素有β–ecdysterone和α–ecdysterone,此外,王強等人還從多葉重樓中分離到新的植物蛻皮激素paristerone。
1.1.3 植物甾醇
現有資料表明,重樓中植物甾醇主要為β–谷甾醇、豆甾醇及其衍生的苷類[11]。
重樓中黃酮類化合物目前報道的主要有山柰酚–3-O–β-D-葡萄吡喃糖基 (1→6) -β-D-葡萄吡喃糖苷和7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山柰酚–3-O–β-D-葡萄吡喃糖基 (1→6)–β-D-葡萄吡喃糖苷[3]。
多糖、脂肪酸酯、氨基酸、微量元素、鞣質等。
隨著重樓藥效物質基礎逐漸被闡明和新的藥理活性被發(fā)現,同時由于藥材資源短缺,價格飛漲,使其近來受到廣泛關注。但不同來源重樓藥材品質差異較大,對其質量控制研究主要有以下幾方面。
取本品粉末0.5g,加乙醇10ml。加熱回流30分鐘,濾過,濾液作為供試品溶液。另取重樓對照藥材0.5g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法 (附錄Ⅵ B)試驗,吸取上述供試品和對照藥材溶液各5μl及〔含量測定〕項下對照品溶液10μl,分別點于同一硅膠 G薄層板上,以三氯甲烷-甲醇-水 (15:5:1)的下層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,置日光和紫外光燈 (365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點或熒光斑點[12]。
采用色譜柱:Agilent SB C18柱 (4.6 mm ×150 mm,5μm);流動相:乙腈-水,梯度洗脫,流速0.8mL/min;紫外檢測器,檢測波長:210nm。結果:4種重樓皂苷的標準曲線線性良好 (r>0.9998,n=5),回收率98.12% ~104.3%,最低檢測限11.8~21.0 ng,最低定量限38.4~75.0 ng。該方法準確、簡捷,可用于重樓中4種皂苷的定量分析[13]。
應用蒸發(fā)光散射檢測器,以乙腈2水為流動相梯度洗脫,流速1mL/min,在反相C18(416mm×150mm,5um)柱上,測定重樓藥材中11個甾體皂苷的含量。結果在30min以內,成功地分離分析11個甾體皂苷。精密度、穩(wěn)定性RSD均小于3%,加樣回收率在95%~97%。此方法對這11個甾體皂苷的測定具有良好的精密度[14]。
采用HPLC梯度洗脫的方法進行色譜分離,使用“相似度評價軟件”進行數據處理,對不同產地的滇重樓藥材皂苷部位進行指紋圖譜的研究。結果確立了滇重樓藥材皂苷部位指紋圖譜的高效液相分析條件,確定8個共有峰。不同產地的滇重樓藥材皂苷部位指紋圖譜有一定差異。采用HPLC法制定滇重樓藥材皂苷部位的指紋圖譜,其皂苷類成分得到較好的分離,方法重現性好,可用于滇重樓的質量評價[15]。
綜上所述,重樓化學成分復雜,質量控制方法多樣,其中HPLC-ELSD法和HPLC指紋圖譜法是目前公認的控制中藥質量較為有效的方法。近年來,隨著重樓藥理作用研究的不斷深入,其臨床應用范圍也日益廣泛。因此有必要進一步加強化學成分和質量控制的研究,以期為臨床提供質量合格的藥品。
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