張 娜，張 娜，康虞玲，楊更亮（河北大學(xué)藥學(xué)院/河北省質(zhì)量分析控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，保定市 071000）

葛根黃豆苷元（daidzein），又名大豆苷元，提取于葛根，其化學(xué)成分為8-β-D-葡萄糖-4，7-二羥基異黃酮，1972年由我國(guó)人工合成。其具有治療冠心病、高血壓、高血脂，抗腫瘤與預(yù)防骨質(zhì)疏松等多種藥理作用[1]。但是由于該藥脂溶性比較強(qiáng)、溶出速度慢、口服吸收差、生物利用度低，影響了藥效的發(fā)揮。自微乳化藥物傳遞系統(tǒng)（self-microemulsifying drug delivery system，SMEDDS）是一種新型藥物傳遞系統(tǒng)，由油相、表面活性劑和助表面活性劑（不含或含少量水）構(gòu)成。SMEDDS因能提高難溶性藥物的溶解度，增加細(xì)胞膜的流動(dòng)性，促進(jìn)藥物淋巴吸收，從而能夠提高藥物的口服生物利用度[2]。

葛根黃豆苷元自微乳為本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)篩選、處方優(yōu)化后制備的一種新制劑。為有效控制藥品質(zhì)量，確保臨床療效，筆者建立了采用紫外分光光度法測(cè)定葛根黃豆苷元自微乳藥物含量的方法。該方法簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確，可用于本品的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

T6型紫外分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；萬(wàn)分之一電子天平（奧豪斯儀器（上海）有限公司）；KQ-250B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，工作頻率：40 kHz，功率：250 W）。

葛根黃豆苷元標(biāo)準(zhǔn)品（楊陵?yáng)|科麥迪森制藥有限公司，批號(hào)：HD080201，含量：98.63%）；葛根黃豆苷元自微乳（河北大學(xué)藥劑實(shí)驗(yàn)室自制，批號(hào)：100304、100307、100311）；無(wú)水乙醇、聚乙二醇400（天津市華東試劑廠，分析純）；乳化劑OP（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所，分析純）；油酸乙酯（上海千為油脂科技有限公司，分析純）；其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液 精密稱取葛根黃豆苷元標(biāo)準(zhǔn)品25.0 mg，用無(wú)水乙醇溶解至100 mL，配成250 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品貯備液。用無(wú)水乙醇稀釋適當(dāng)倍數(shù)配制成濃度分別為0.5、1.0、2.0、5.0、7.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.1.2 空白自微乳溶液 精密稱取乳化劑OP、聚乙二醇400、油酸乙酯各適量，37℃磁力攪拌（300 r·min-1）20 min即得空白自微乳。取適量空白自微乳，置于100 mL容量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.1.3 供試品溶液 向空白自微乳中加入一定量干燥至恒重的葛根黃豆苷元，70℃超聲振蕩至藥物完全溶解。取載藥自微乳適量，置于100 mL容量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

制備適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、供試品溶液。標(biāo)準(zhǔn)品溶液以無(wú)水乙醇為空白對(duì)照，供試品溶液以相同濃度的空白自微乳為空白對(duì)照，在200～600 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描。結(jié)果，二者均在250 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故選擇250 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。紫外掃描光譜見(jiàn)圖1。

圖1 紫外掃描圖譜Fig 1 UV scanning spectra

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

以無(wú)水乙醇為空白對(duì)照，用紫外分光光度計(jì)在250 nm波長(zhǎng)處依次測(cè)定上述系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液的吸光度。以吸光度（Y）為縱坐標(biāo)，溶液濃度（X）為橫坐標(biāo)，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y＝0.086 48X+0.008 13（r＝0.999 5，n＝5）。結(jié)果表明，葛根黃豆苷元檢測(cè)濃度在0.5～7.0 mg·L-1范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn)

取葛根黃豆苷元3.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，以無(wú)水乙醇為空白對(duì)照，在250 nm波長(zhǎng)處連續(xù)測(cè)定吸光度5次。結(jié)果，RSD＝0.35%（n＝5），表明儀器精密度良好。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)

取載藥自微乳適量，用無(wú)水乙醇稀釋至適宜濃度，平行配成6份同一濃度供試品溶液，以空白自微乳為空白對(duì)照，在250 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度。結(jié)果，RSD＝0.47%（n＝6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取載藥自微乳適量，用無(wú)水乙醇稀釋至適宜濃度，以空白自微乳為空白對(duì)照，于0、1、2、4、8 h在250 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度。結(jié)果，RSD＝0.31%（n＝5），表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)[3]

分別精密稱取同一批次且已知含量的載藥自微乳適量，共9份，分別置于100 mL容量瓶中，分別精密加入葛根黃豆苷元標(biāo)準(zhǔn)品適量，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，以空白自微乳為空白對(duì)照，按“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）Tab 1Results of recovery test（n＝9）

2.8 樣品含量測(cè)定

按“2.1.2”項(xiàng)下方法制成載藥的葛根黃豆苷元自微乳（標(biāo)示量：2.20 mg·g-1）3批，按“2.1.3”項(xiàng)下方法配制成供試品溶液，按“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定吸光度，并計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 2Results of content determination of samples（n＝3）

3 討論

對(duì)自微乳中成分的檢測(cè)，文獻(xiàn)報(bào)道的方法多為高效液相色譜法，而本試驗(yàn)采用紫外分光光度法[4，5]，更簡(jiǎn)單、快捷，結(jié)果準(zhǔn)確。本試驗(yàn)制備的葛根黃豆苷元自微乳在無(wú)水乙醇中溶解性能很好，且制備中所用的乳化劑及助乳化劑在250 nm波長(zhǎng)處不影響葛根黃豆苷元的含量測(cè)定。

綜上，本法樣品處理簡(jiǎn)便、去除干擾效果好、專屬性強(qiáng)，可用于自微乳藥物制劑的快速分析。

[1] 王艷梅，呂立勛.黃豆苷元的藥理作用及臨床應(yīng)用[J].中國(guó)藥師，2007，10（9）：910.

[2] 李劍惠，胡 英.HPLC測(cè)定槲皮素自微乳中槲皮素的含量[J].華西藥學(xué)雜志，2006，21（5）：489.

[3] 邵紅燕，王封銳.琥乙紅霉素顆粒溶出度的測(cè)定[J].中國(guó)藥房，2010，21（25）：2 378.

[4] 葉建新，陳 杰.紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定豆腐果苷片中間體中豆腐果苷的含量[J].中國(guó)藥房，2009，20（19）：1 501.

[5] 呂長(zhǎng)淮.格列齊特片（Ⅱ）鑒別與含量測(cè)定方法改進(jìn)[J].中國(guó)藥房，2007，18（25）：1 977.