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        GC 法測定香茅中香葉醇的含量

        2011-11-09 14:40:46陳妙芬馮靜儀劉秋瓊林秋曉肖志杏廣東省人民醫(yī)院藥學(xué)部廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院廣州市50080南方醫(yī)科大學(xué)廣州市5005
        中國藥房 2011年31期

        陳妙芬,馮靜儀,劉秋瓊,林秋曉,肖志杏(.廣東省人民醫(yī)院藥學(xué)部/廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院,廣州市50080;.南方醫(yī)科大學(xué),廣州市 5005)

        香茅Cymbopogon citratus(DC.)Strapf為多年生禾本科植物,別名大風(fēng)茅、檸檬茅、檸檬草、茅草茶、姜巴茅、姜草、香巴茅、香茅草、風(fēng)茅草、姜巴草。它廣泛種植于全世界的熱帶地區(qū),在我國南方地區(qū)作為經(jīng)濟(jì)作物栽培。從其葉中提取的香茅油是重要的香料原料,也可作藥用,具有抗菌[1]、抗炎、降壓[2]、免疫調(diào)節(jié)和腫瘤抑制作用[3]。

        香茅揮發(fā)油的成分隨香茅具體品種不同而不同。程必強(qiáng)等[4]對西雙版納熱帶植物園中種植的6種香茅屬植物精油成分進(jìn)行了分析,從亞香茅中分到38種化合物,主含香茅醛(36.055%)、香葉醇(21.33%);從爪哇香茅中分到30種化合物,主含香茅醛(25.75%)、香葉醇(19.01%)、欖香樹脂(10.64%)。陳集雙等[5]對香茅葉揮發(fā)油成分進(jìn)行分析,其主要成分是香葉醛和橙花醛,其次是β-香葉烯、香葉醇、乙酸香葉酯、香葉酸等??梢?,香葉醇是香茅油的主要成分,可作為其質(zhì)量控制的重要指標(biāo),故本試驗通過氣相色譜(GC)法測定香茅中香葉醇的含量。

        1 儀器與試藥

        SHIMADZU-2010型GC儀、氫火焰離子化檢測器(FID)、色譜工作站(日本島津公司);gh-300c氫氣發(fā)生器(北京中興匯利科技發(fā)展有限公司);QL型純凈空氣泵(濟(jì)南應(yīng)用化工科技開發(fā)有限公司);KH-500型超聲波清洗器(昆山市禾創(chuàng)超聲儀器有限公司);CP2245電子天平(德國Sartorius公司)。

        高純度氮氣(廣州氣體廠,含量≥99.999%,壓力(20℃)≥13.6 MPa);乙醇(分析純,廣州化學(xué)試劑廠);香茅藥材采自廣州從化,由廣東省藥品檢驗所林惠容主任中藥師鑒定為香茅C.citratus(DC.)Strapf,存放于廣東省藥品檢驗所,編號為01、02、03、04、05、06);香葉醇對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號:111643-200301)。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 色譜條件

        色譜柱:Agilent Technologies DB-WAX(30 m×0.25 mm×0.25 μm);固定相:聚乙二醇(PEG-20M),涂布質(zhì)量濃度:20%;柱溫:130℃;檢測器:FID;進(jìn)樣口溫度:230℃;檢測器溫度:250℃;分流進(jìn)樣,分流比:20∶1;程序升溫:初始80℃,保持2 min,以7℃·min-1升至200℃,保持5 min;載氣:氮氣,流量為1.0 mL·min-1;燃?xì)猓簹錃?,流量?0 mL·min-1;助燃?xì)猓嚎諝?,流量?00 mL·min-1。色譜見圖1。

        2.2 對照品溶液的制備

        精密稱取香葉醇對照品適量,加乙醇制成每1 mL含0.015 3 mg的對照品溶液,搖勻,即得。

        圖1 氣相色譜圖Fig 1 GC chromatograms

        2.3 供試品溶液的制備

        精密稱取香茅樣品粗粉5 g,置具塞三角燒瓶中,精密加入25 mL乙醇,稱重,超聲振蕩(頻率:40 kHz,功率:500 W)20 min后再稱重,用乙醇補(bǔ)足失重,過濾,取續(xù)濾液作為供試品溶液。

        2.4 線性關(guān)系考察

        精密吸取對照品溶液1、2、3、4、5、6、7 μL,按上述色譜條件分別進(jìn)樣,測定峰面積。以濃度(X)為橫坐標(biāo),峰面積積分值(Y)為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為Y=2 129.2X+1 091(r=0.997 3,n=7)。結(jié)果表明,香葉醇進(jìn)樣量在0.015 3~0.107 1μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

        2.5 精密度試驗

        精密吸取對照品溶液5μL,重復(fù)進(jìn)樣6次,測定峰面積。結(jié)果,RSD=0.83%(n=6),表明儀器精密度良好。

        2.6 穩(wěn)定性試驗

        取同一批供試品溶液適量,連續(xù)在0、1、2、4、8、12、24 h分別進(jìn)樣,考察其穩(wěn)定性。結(jié)果,香葉醇峰面積的RSD=1.4%(n=7),表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

        2.7 重復(fù)性試驗

        精密稱取香茅樣品粗粉適量,共6份,分別按“2.3”項下方法制成供試品溶液,按上述色譜條件測定峰面積。結(jié)果,RSD=1.55%(n=6),表明方法重復(fù)性良好。

        2.8 加樣回收率試驗

        取已知香葉醇含量(0.037 6%)的樣品6份,每份約2.5 g,精密稱定,分別添加已知濃度的香葉醇對照品溶液(0.945 mg·mL-1)1 mL,按“2.3”項下方法制成供試品溶液,按上述色譜條件測定,計算加樣回收率,結(jié)果見表1。

        2.9 樣品含量測定

        取6批香茅樣品各適量,分別按“2.3”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件測定樣品中香草醇的含量,結(jié)果見表2。

        表1 加樣回收率試驗結(jié)果(n=6)Tab 1Results of recovery test(n=6)

        表2 樣品含量測定結(jié)果(n=3)Tab 2Results of content determination of samples(n=3)

        3 討論

        筆者曾考察超聲時間對提取效果的影響。精密稱取香茅樣品3份,每份5 g,置具塞三角燒瓶中,精密加入25 mL乙醇,稱重,分別超聲10、20、30 min進(jìn)行提取后再稱重,補(bǔ)充溶媒至原重量,搖勻,過濾,取續(xù)濾液,按上述色譜條件進(jìn)行測定,結(jié)果見表3。

        表3 超聲時間對提取結(jié)果的影響Tab 3 Effect of ultrasonic time on the results of extraction

        由表3可知,超聲提取20、30 min的提取效果較超聲10 min的效果更好,而超聲20 min與30 min的提取效果無顯著性差異,故選擇超聲提取20 min為較佳方案。

        綜上,本方法簡便、快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于香茅的質(zhì)量控制。

        [1] 楊森艷,姚 雷.檸檬草精油抗菌性研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)科學(xué)版),2005,23(4):374.

        [2] 廉曉紅,李德山,竇玉琴,等.香茅草提取物的免疫調(diào)節(jié)作用與腫瘤抑制作用[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,2005,22(4):295.

        [3] 劉昌孝.香茅葉的藥理研究[J].國外醫(yī)藥·植物藥分冊,1989,1:29.

        [4] 程必強(qiáng),許 勇,喻學(xué)儉,等.六種香茅屬植物資源及精油成分[J].香料香精化妝品,1994,3:6.

        [5] 陳集雙,彭崇勝,杜琪珍,等.香茅葉揮發(fā)油化學(xué)成分的研究[J].中國藥學(xué)雜志,2000,35(7):462.

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