王艷宏，王 銳，管慶霞，高宏偉，劉振強(qiáng)，包 蕾，李永吉

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江哈爾濱150040)

隨著現(xiàn)代生活方式和人類生態(tài)環(huán)境的急劇變化，變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis，AR)，己成為亟待解決的全球性健康問(wèn)題之一。利用藥物經(jīng)皮吸收和經(jīng)絡(luò)效應(yīng)雙重作用的穴位貼敷法對(duì)AR的療效正日益受到重視［1］。麻黃附子細(xì)辛湯為出自《傷寒論》的經(jīng)典方劑，現(xiàn)代臨床及實(shí)驗(yàn)研究表明其對(duì)變應(yīng)性鼻炎療效顯著［2～5］。本研究選擇治療 AR的常用穴——大椎穴和神闕穴為給藥部位，通過(guò)考察麻黃附子細(xì)辛湯提取物穴位貼敷對(duì)抗炎、鎮(zhèn)痛作用的影響，探討其經(jīng)穴位給藥治療AR的有效性，并為臨床選穴提供依據(jù)，進(jìn)而為麻黃附子細(xì)辛湯給藥途徑和臨床用途的擴(kuò)大奠定基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 儀器與藥品

AB265－S電子天平，梅特勒－托利多儀器(上海有限公司);二甲苯，天津市東天精細(xì)化學(xué)試劑廠(批號(hào):20051104);麻黃、附子、細(xì)辛藥材購(gòu)自哈爾濱市藥材公司，生藥學(xué)鑒定其原植物分別為麻黃科植物草麻黃、馬兜鈴科植物北細(xì)辛和毛茛科植物烏頭的子根的加工品，符合《中國(guó)藥典》規(guī)定。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種小白鼠，體重 18～22 g，合格證號(hào)為P00102004，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 麻黃附子細(xì)辛湯的制備

處方量麻黃、附子、細(xì)辛，經(jīng)醇提、樹(shù)脂純化，回收溶劑適當(dāng)濃縮后獲得麻黃附子細(xì)辛湯提取物。

2.2 二甲苯所致小鼠耳腫脹的處理方法

取體重18～22 g的小鼠60只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為6組，分別為空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(鼻炎康片組)、麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴組、麻黃附子細(xì)辛湯神闕穴組、麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴+神闕穴組、麻黃附子細(xì)辛湯非穴位組。除空白對(duì)照組外，陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給予鼻炎康片，給藥體積為1.0 ml/100 g，其余各組分別貼敷麻黃附子細(xì)辛湯提取物于大椎穴、神闕穴及大椎穴+神闕穴，給藥面積7.2 cm2/100 g。每日給藥1次，連續(xù)7天。末次給藥后2 h后，立即在小鼠左耳前后兩面涂抹二甲苯0.04 ml，2 h后，將小鼠脫臼處死，齊耳根剪下左右兩耳片，用7 mm直徑打孔器，分別在同一部位打下圓耳片，用分析天平稱兩耳片的重量，用每只鼠的左耳片重量減去右耳片重量，最后比較各組的耳片腫脹程度，計(jì)算各組腫脹度之均值與標(biāo)準(zhǔn)差，按下面的公式求出給藥組的腫脹抑制率，并作t檢驗(yàn)，比較組間差異顯著性。

2.3 醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的處理方法

取體重18～22 g的小鼠60只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為6組，分組及給藥方式、給藥劑量同二甲苯所致小鼠耳腫脹的處理方法。于末次給藥2 h后，腹腔注射0.7%HAc溶液0.1 ml/10 g，觀察注射HAc后15 min內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)次數(shù)。

2.4 統(tǒng)計(jì)方法

3 結(jié)果

3.1 對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。與空白對(duì)照組比較，鼻炎康片組及麻黃附子細(xì)辛湯各給藥組均有極顯著性差異(P＜0.01);與非穴位組比較，麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴組有顯著性差異(P＜0.05)，麻黃附子細(xì)辛湯神闕穴組及大椎穴+神闕穴組差異不明顯(P＞0.05)。

3.2 對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。與空白對(duì)照組比較，除麻黃附子細(xì)辛湯非穴位組有顯著性差異(P＜0.05)外，鼻炎康片組及麻黃附子細(xì)辛湯各穴位給藥組均有極顯著性差異(P＜0.01);與非穴位組比較，麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴組有顯著性差異(P＜0.05)，麻黃附子細(xì)辛湯神闕穴組及大椎穴+神闕穴組差異不明顯(P＞0.05)。

表1 麻黃附子細(xì)辛湯穴位給藥對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(±s，n=10)

表1 麻黃附子細(xì)辛湯穴位給藥對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(±s，n=10)

注:與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與非穴位組比較，△P＜0.05，△△P ＜0.01。

組別 劑量(mg/100 g) 腫脹度(mg) 抑制率(%)空白對(duì)照組40.3910.349 ±1.08鼻炎康片組 57.66 4.759±1.00＊＊ 54.63麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴組 79.53 4.924±1.05＊＊△ 52.42麻黃附子細(xì)辛湯神闕穴組 79.53 6.019±1.09＊＊ 41.83麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴+神闕穴組 79.53 5.905±0.95＊＊ 42.94麻黃附子細(xì)辛湯非穴位組 79.53 6.169 ±1.09＊＊

表2 麻黃附子細(xì)辛湯穴位給藥對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(±s，n=10)

表2 麻黃附子細(xì)辛湯穴位給藥對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(±s，n=10)

注:與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與非穴位組比較，△P＜0.05，△△P ＜0.01。

組別 劑量(mg/100g) 扭體次數(shù)(次) 抑制率(%)空白對(duì)照組16.948.4 ±8.72鼻炎康片組 57.66 28.6±5.87＊＊ 40.9麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴組 79.53 33.3±5.96＊＊△ 31.2麻黃附子細(xì)辛湯神闕穴組 79.53 34.5±5.82＊＊ 28.7麻黃附子細(xì)辛湯大椎穴+神闕穴組 79.53 37.6±6.35＊＊ 22.3麻黃附子細(xì)辛湯非穴位組 79.53 40.2 ±8.20*

4 討論

中藥經(jīng)皮給藥的難點(diǎn)在于制劑載藥量小、有效成分含量低、給藥面積及藥物透過(guò)量有限等。傳統(tǒng)的中藥給藥形式多為藥材原粉以蜂蜜、生姜汁、蛋清、酒或醋等調(diào)成糊狀應(yīng)用，給藥劑量大，生物利用度低。本研究采用樹(shù)脂分離純化技術(shù)結(jié)合使用透皮吸收促進(jìn)劑技術(shù)制備麻黃附子細(xì)辛湯提取物，為麻黃附子細(xì)辛湯經(jīng)皮給藥提供了重要保障。

麻黃附子細(xì)辛湯經(jīng)皮給藥具有顯著的抗炎及鎮(zhèn)痛作用。麻黃附子細(xì)辛湯為出自漢代張仲景《傷寒論》的經(jīng)典方劑，具有溫經(jīng)散寒、助陽(yáng)解表的功效，可謂溫經(jīng)散寒之圣劑。但現(xiàn)有研究資料表明［6］，麻黃附子細(xì)辛湯長(zhǎng)期以來(lái)沒(méi)有得到足夠的重視，與其相關(guān)的研究報(bào)道較少，更無(wú)上市的制劑產(chǎn)品。究其原因可能由于方中各藥味的有效成分麻黃為麻黃堿等生物堿、附子為烏頭堿等生物堿，細(xì)辛為α－細(xì)辛醚等揮發(fā)油。其中麻黃堿、烏頭堿等生物堿既是其有效成分，也是其毒性成分，而其給藥途徑主要為經(jīng)胃腸給藥，存在副作用大、給藥不方便的缺點(diǎn)，從而限制了麻黃附子細(xì)辛湯的臨床應(yīng)用。分析麻黃附子細(xì)辛湯中主要藥味麻黃、細(xì)辛自古以來(lái)單味藥即可外用，結(jié)合現(xiàn)代理化性質(zhì)及其藥理研究結(jié)果，麻黃堿、烏頭堿等分子量小、熔點(diǎn)低，藥理作用劇烈，適于開(kāi)展經(jīng)皮給藥研究。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，麻黃附子細(xì)辛湯經(jīng)皮給藥無(wú)論貼敷于穴位還是非穴位區(qū)均具有顯著的抗炎及鎮(zhèn)痛作用，從而為其經(jīng)皮給藥治療AR的有效性評(píng)價(jià)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

穴位較非穴位區(qū)有利于麻黃附子細(xì)辛湯抗炎作用的發(fā)揮。穴位貼敷法是在傳統(tǒng)針灸醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)上，將中藥制成丸、散、膏等劑型貼敷于穴位，利用藥物經(jīng)皮吸收和經(jīng)絡(luò)效應(yīng)的雙重作用而使療效倍增，而達(dá)到預(yù)防和治療疾病的一種獨(dú)特的中醫(yī)外治法。本研究表明麻黃附子細(xì)辛湯貼敷于“大椎穴”抗炎及鎮(zhèn)痛作用的發(fā)揮與貼敷于非穴位區(qū)有差別，以大椎穴為佳，說(shuō)明麻黃附子細(xì)辛湯經(jīng)皮給藥確有穴位貼敷的必要，對(duì)此筆者將作進(jìn)一步研究。穴位貼敷療法是以穴位作為治療區(qū)域，選好、選準(zhǔn)穴位十分重要。本研究選用的“大椎穴”［7～8］屬督脈，為諸陽(yáng)之會(huì)，可提升諸經(jīng)之陽(yáng)氣。藥物貼敷大椎穴可以通過(guò)督脈經(jīng)絡(luò)的傳導(dǎo)，散發(fā)陽(yáng)經(jīng)之氣，直達(dá)病所，而使氣血得通，營(yíng)衛(wèi)和調(diào)，邪氣得祛，起到宣肺通鼻竅的治療作用。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為穴位給藥的生物利用度明顯高于一般給藥，因腧穴對(duì)藥物具有敏感性和放大效應(yīng)［9］。

［1］王艷宏，劉振強(qiáng)，包蕾.穴位貼敷法治療變應(yīng)性鼻炎的研究進(jìn)展［J］.針灸臨床雜志，2010，26(2):68 －70

［2］大橋隆，陳恩典.變態(tài)反應(yīng)性鼻炎的特效藥“麻黃附子細(xì)辛湯”［J］.中醫(yī)藥，1997，13(1):38

［3］程竑.麻黃附子細(xì)辛湯在日本的研究應(yīng)用［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)·中醫(yī)中藥分冊(cè)，1997，19(3):30 －31

［4］山本巖.過(guò)敏性鼻炎漢方藥治療［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)·中醫(yī)中藥分冊(cè)，1984，6(5):12

［5］坂東正造.麻黃細(xì)辛附子湯治療過(guò)敏性鼻炎［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)·中醫(yī)中藥分冊(cè)，1990，12(5):38

［6］王艷宏，包蕾，劉振強(qiáng).麻黃附子細(xì)辛湯藥理作用研究進(jìn)展［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(173):216

［7］王蕊.抗敏靈穴位貼敷治療常年性變應(yīng)性鼻炎的臨床研究［D］.福州:福建中醫(yī)學(xué)院，2006:9－12

［8］文志，徐紹勤，彭斌.穴位貼敷防治變應(yīng)性鼻炎118例總結(jié)［J］.湖南中醫(yī)雜志，2007，23(2):3233

［9］王海，東貴榮.穴位特異性研究小結(jié)和展望［J］.針灸臨床雜志，2008，24(5):41 －42