彭崢國，薛健，吳曉波，薛雯

(1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193;2.江西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，南昌 330004)

α-松油醇是油松節(jié)揮發(fā)油的主要成分之一［1］，是《中華人民共和國藥典》2010年版新收錄的藥材品種油松節(jié)(Lignum Pini Nodi)［2］鑒別的指標(biāo)性成分，筆者對(duì)油松節(jié)中α-松油醇的提取純化工藝進(jìn)行了研究，采用硅膠柱色譜法從油松節(jié)揮發(fā)油中分離出純度較高的α-松油醇，對(duì)其進(jìn)行了純度方面的分析，并對(duì)所得的α-松油醇做了一系列相關(guān)的穩(wěn)定性研究實(shí)驗(yàn)。為滿足藥材鑒別的需要，為藥材質(zhì)量控制提供了有力的保證，更為α-松油醇的儲(chǔ)存提供了科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 6890氣相色譜儀(FID檢測器);電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司，DHG-9023A);梅特勒PL203型分析天平(瑞士梅特勒-托利多國際股份有限公司);硅膠;α-松油醇標(biāo)準(zhǔn)品購于和光純藥工業(yè)株式會(huì)社;硅膠預(yù)制板(青島海洋化工廠)。

1.2 試藥 油松節(jié)藥材由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所張本剛教授鑒定;正己烷(美國Fisher公司)為色譜純，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 高純度 α-松油醇的制備

2.1.1 制備方法 采取水蒸氣蒸餾法，從油松節(jié)中提取揮發(fā)油約2 g。利用薄層色譜法，分析揮發(fā)油成分。選取石油醚∶乙酸乙酯作為展開系統(tǒng)，香草醛硫酸作為顯色劑［2］。通過調(diào)整展開系統(tǒng)的極性，以達(dá)到提取分離α-松油醇，最終確定展開系統(tǒng)為石油醚∶乙酸乙酯(20∶1)。稱取硅膠10 g，石油醚濕法裝柱。稱取揮發(fā)油0.2 g，上樣，用石油醚:乙酸乙酯(20∶1)洗脫，前50mL棄去，然后每20mL接為一個(gè)餾分，濃縮，點(diǎn)薄層，顯色，確定在130～170mL可以得到較純的α-松油醇。

2.1.2 α-松油醇的純度測定 取油松節(jié)揮發(fā)油適量，精密稱定，加正己烷制成濃度為0.2 g·mL-1的溶液。取分離所得 α-松油醇適量，加正己烷制成濃度為0.02 g·mL-1的供試品溶液。進(jìn)樣氣相FID檢測器。

色譜條件:HP-5毛細(xì)管色譜柱(0.32mm×30 m，0.25 μm);氫火焰離子化檢測器(FID);進(jìn)樣口溫度230℃ ;檢測器溫度320℃ ;柱溫以60℃為起始溫度，保持1min，以3℃·min-1升溫至140℃，再以50℃·min-1的升溫至300℃;載氣:氮?dú)?進(jìn)樣方式為分流進(jìn)樣，分流比10∶1;進(jìn)樣量1 μL。見色譜圖1。圖1可知所提取分離物質(zhì)為α-松油醇;比較圖1中B和C得油松節(jié)揮發(fā)油經(jīng)“2.1”項(xiàng)方法處理后，大大提高了α-松油醇的純度;根據(jù)圖1中色譜圖C，用面積歸一化法得出分離所得α-松油醇的純度為95.2%。

圖1 3種溶液的HPLC色譜圖A.α-松油醇對(duì)照品;B.油松節(jié)揮發(fā)油;C.提取分離得 α-松油醇;1.α-松油醇Fig.1 HPLC chromatogram of 3 kinds of solutionA.reference substance of α-terpineol;B.volatile oil from pine nodular branch;C.the extract α-terpineol;1.α-terpineol

2.1.3 工藝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 為進(jìn)一步考察工藝的可靠性及穩(wěn)定性，取6份藥材按上述提取分離工藝進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，操作方法同前述，6次實(shí)驗(yàn)提取分離得α-松油醇純度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)值為3.4%，表明工藝穩(wěn)定可靠。

2.2 穩(wěn)定性考察 取油松節(jié)中分離所得α-松油醇適量，置于干凈的稱量瓶中，攤成厚度≤5mm的薄層，然后分別置于60℃溫度和照度(4 500±500)lx條件下下放置10 d，每組實(shí)驗(yàn)做2個(gè)平行。于第5天和第10天取樣，按純度分析條件測試，純度情況見表1。

表1 α-松油醇高溫及光照處理后純度Tab.1 The purity of α-terpineol treated by high temperature and light %

結(jié)果表明:α-松油醇分別在溫度60℃和照度(4 500±500)lx條件下，于第5天和第10天純度都發(fā)生了較大的變化。其中分別在高溫和強(qiáng)光照的條件下，均存在第10天純度變化比第5天的純度變化大。由此可以確定α-松油醇應(yīng)避光低溫儲(chǔ)存。

3 討論

油松節(jié)在我國有大量的種植面積［3］，為生產(chǎn)生活中常用的藥材。不同產(chǎn)地的油松節(jié)所含的α-松油醇的量存在很大的差異。由于α-松油醇具有很強(qiáng)的揮發(fā)性，粉碎的油松節(jié)樣品應(yīng)盡快進(jìn)行α-松油醇的提取分離。光照實(shí)驗(yàn)的過程中，應(yīng)保證盛裝樣品的器皿敞口放置，且注意溫度的控制。筆者利用硅膠柱分離法，從油松節(jié)中分離得到高純度的α-松油醇，并針對(duì)分離得α-松油醇做相關(guān)的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，為進(jìn)一步研究α-松油醇的提取和理化性質(zhì)奠定了科學(xué)基礎(chǔ)。

［1］張林林，薛健.油松節(jié)藥材質(zhì)量研究［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，30(2):240－242.

［2］國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:211.

［3］董巖，邱琴.氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)法分析油松節(jié)揮發(fā)油化學(xué)成分［J］.理化檢驗(yàn):化學(xué)分冊，2003，12(12):718－720.