梁曉東，時秀英

（1.河北神威藥業(yè)有限公司，河北 廊坊 065201；2.神威藥業(yè)有限公司，河北 石家莊 051430）

逍遙丸（濃縮丸）收載于《中藥部頒標準》（第十一冊，標準號為：WS3－B－2220－96），由柴胡、當(dāng)歸、白芍、白術(shù)（炒）、炙甘草、茯苓、薄荷、生姜八味藥組成，具有疏肝健脾、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)的功效，用于肝氣不舒、胸脅脹痛、頭暈?zāi)垦?、食欲減退、月經(jīng)不調(diào)。我們對逍遙丸依照新藥質(zhì)量標準研究的技術(shù)要求，在中藥部頒標準逍遙丸（濃縮丸）標準的基礎(chǔ)上，對生產(chǎn)的樣品進行了質(zhì)量研究，根據(jù)研究結(jié)果并參考相關(guān)資料，制定了逍遙丸生產(chǎn)用質(zhì)量標準草案。其中白芍中所含芍藥苷為本制劑活性成分之一，采用高效液相色譜法測定制劑中芍藥苷的含量，從而控制產(chǎn)品質(zhì)量。

1 實驗依據(jù)及儀器試藥

實驗方法：所有試驗均參照《中國部頒標準》和《中國藥典》一部的有關(guān)規(guī)定進行。①供試品：逍遙丸（濃縮丸）：神威藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：051105－1、051105－2、051109－1；②對照品及對照藥材：芍藥苷：中國藥品生物制品檢定所，批號：110736－200422；③儀器與試劑：Waters 2695液相色譜儀，Waters 2996紫外檢測器，UV－2550紫外－可見分光光度計，JCX－250W（250W，50kHz）超聲波提取器，乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純，水為高純水。

2 試驗內(nèi)容和結(jié)果

逍遙丸（濃縮丸）收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準·中成藥分冊》第11冊，原標準尚無含量測定項，為提高本品質(zhì)量，加強控制，采用有關(guān)文獻［1］，用高效液相色譜法測定芍藥苷的含量，具體操作如下：

2.1 色譜條件

儀器與試藥：Waters 2695液相色譜儀，Waters 2996紫外檢測器，固定相：C18色譜柱（Waters symmetry C18，5μm，3.9 mm×150mm），流動相：乙腈－0.01%磷酸溶液（15：85）。

2.2 對照品溶液的制備

取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每1mL含89.7μg的溶液，即得。

2.3 測定波長的選擇

取芍藥苷對照品溶液用UV－2550分光光度計掃描，結(jié)果芍藥苷對照品在230nm處有最大吸收，故確定色譜條件中，檢測波長為230nm。紫外掃描圖譜見圖1。

圖1 芍藥苷對照品紫外掃描圖譜

圖2 芍藥苷對照品 溶液HPLC色譜

2.4 供試品溶液的制備及色譜條件的選擇

由于芍藥苷易溶于稀乙醇，參照藥典及有關(guān)資料，選用稀乙醇超聲處理，制備供試品溶液，固定相選用C18色譜柱，流動相采用乙腈－0.01%磷酸溶液（15：85），結(jié)果色譜分離度較好，并考察不同超聲時間對提取效果的影響，結(jié)果見表1。對照品及樣品色譜圖見圖2和圖3。

圖3 逍遙丸（濃縮丸）供試品溶液HPLC色譜

圖4 白芍陰性HPLC色譜

表1 提取條件的選擇

結(jié)果表明，提取30min即可提取完全，故確定提取方法為：取本品適量，研細，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25mL，密塞，稱定重量，超聲（功率250W，頻率50kHz）處理30min，放至室溫，再稱定重量，加稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.5 陰性對照溶液的制備

依本品制備工藝及供試品處理方法，依法制備出白芍陰性對照溶液，注入高效液相色譜儀，結(jié)果，在對照品的同一保留時間處，無吸收峰，故可確定本品白芍陰性無干擾（見圖4）。

2.6 線性關(guān)系考察

取芍藥苷對照品溶液（0.0897mg／mL），依上述色譜分別進樣5、10、12、15、20μL，測定峰面積積分值，以進樣量x（μL）為橫坐標，峰面積積分值y為縱坐標，繪制標準曲線，在0.44～1.79μg／mL范圍內(nèi)呈良好線形關(guān)系。結(jié)果見表2。線性關(guān)系見圖5。

圖5 線性關(guān)系

表2 線性關(guān)系測定結(jié)果

2.7 精密度試驗

精密量取同一供試品（批號：051105－1）溶液，連續(xù)進樣6次，依法測定峰面積，結(jié)果見表3。

表3 精密度試驗結(jié)果

2.8 供試品溶液穩(wěn)定性試驗

取同一樣品溶液（樣品批號為：051105－1）按標準所述方法制備供試品溶液，隔一段時間測定其含量，結(jié)果見表4。

表4 溶液穩(wěn)定試驗結(jié)果

由表4可知，供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 重現(xiàn)性考察

取同一樣品（批號：051105－1）6份，按標準所述方法制備供試品溶液，測定，結(jié)果見表5。

由表5可知，本方法重現(xiàn)性良好。

2.10 回收率試驗

取6份逍遙丸樣品（批號：051105－1；含量：7.28mg／g）粉末適量，精密稱定，分別精密加入芍藥苷對照品溶液（0.0897mg／mL）16mL、16mL、20mL、20mL、24mL、24mL，按供試品溶液的制備方法制備，測定其含量，結(jié)果見表6。

表5 重現(xiàn)性考察結(jié)果

表6 回收率試驗結(jié)果

由表6可知，平均回收率為99.7%，在95%～105%范圍內(nèi)。

2.11 含量測定結(jié)果

依法測定各批次逍遙丸（濃縮丸）中芍藥苷的含量，結(jié)果見表7。

表7 10批樣品測定結(jié)果

由表7可得，10批樣品中的含量平均值為1.24mg／丸，根據(jù)白芍藥材芍藥苷含量不得少于1.6%折算，故可初步定為本品中芍藥苷的含量不得少于0.9mg／丸。

3 與上市藥品的質(zhì)量對比

為充分說明我公司產(chǎn)品質(zhì)量，按照擬定的生產(chǎn)用藥品標準草案，對我公司生產(chǎn)的逍遙丸（濃縮丸）（批號：051105－1、051105－2、051109－1）與河南宛西制藥股份有限公司生產(chǎn)的逍遙丸（濃縮丸）（批號：060308）進行了質(zhì)量比較，結(jié)果見表8。

由表8可知，我公司研制的逍遙丸（濃縮丸）和已上市樣品質(zhì)量基本相同，驗證了我公司制定的質(zhì)量標準合理可行，能夠控制逍遙丸中的芍藥苷含量。同時證明了工藝穩(wěn)定、含量可控，彌補了現(xiàn)行逍遙丸（濃縮丸）質(zhì)量標準沒有含量測定的不足。

表8 質(zhì)量對比

［1］莊秋虹.高效液相干色譜法測定逍遙丸中芍藥苷的含量［J］.海峽藥學(xué)，2004，16（2）：50－52.