閆曉鵬 王林 李雪英

(焦作市中心血站 河南焦作 454000)

ABO新生兒溶血病(ABO-HDN)是由于母體內(nèi)存在與胎兒紅細(xì)胞不相合的IgG抗-A(B)抗體,并由該抗體引起的同種被動免疫性疾病。其對新生兒的最大危害是引起膽紅素腦病(核黃疸)而造成患兒早期死亡或使存活者留下不可逆的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥,一旦發(fā)生,治療效果甚微,僅能以預(yù)防為主[1]。所以,正規(guī)進(jìn)行孕婦血清中的IgG抗體檢測,可早期預(yù)測胎兒發(fā)生溶血病的可能并有利于及時采取防治措施,對改善此類患兒的預(yù)后及降低病死率意義重大。2005年8月至2009年12月,我室對581例孕婦及其新生兒進(jìn)行了血型血清學(xué)檢測,現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源 2005年8月至2009年12月,由焦作地區(qū)各醫(yī)療機(jī)構(gòu)推薦或自主來我室進(jìn)行產(chǎn)前檢查的孕婦夫婦,經(jīng)血型鑒定和不規(guī)則抗體篩查,選擇其中581例孕婦及其新生兒作為研究對象(孕婦不規(guī)則抗體篩查均為陰性且和丈夫為單純ABO血型不合)。

1.1.2 試劑 抗-A、抗-B、抗D、Ac、Bc、Oc、2-Me、抗人球蛋白試劑、篩選細(xì)胞均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供;聚凝胺試劑盒由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供;微柱凝膠卡由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供;所有試劑均在有效期內(nèi)使用;指示細(xì)胞和酶處理細(xì)胞由本室自制。

1.1.3 儀器設(shè)備 KA-2200血球洗滌離心機(jī)(日本KUBOTA公司);SBHW2-1型電熱恒溫水浴箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠有限責(zé)任公司);TD-3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)及FYQ型免疫微柱孵育器(長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司);DH-100新生兒總疸紅素測定儀(上海愛蓓兒醫(yī)用儀器有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 孕婦ABO-HDN血型抗體的初步確定 581例孕婦夫婦常規(guī)進(jìn)行ABO正反定型后,按表1初步確定孕婦血清中可能存在的IgG抗－A(B)抗體,并用抗人球蛋白法測定其效價,效價≥64者為抗體陽性,反之為抗體陰性,如表1。

表1 孕婦血清中可能存在的ABO-HDN抗體

表2 581例孕婦IgG抗-A(B)效價及ABO-HDN患兒發(fā)病率[例(%)]

1.2.2 孕婦IgG抗－A(B)效價測定[2]取孕婦血清100uL與等量2-Me混合,加塞,37℃放置10min或室溫放置30min;用生理鹽水倍比稀釋2-Me處理后的血清,并加入等量相應(yīng)的紅細(xì)胞;直接離心以檢測殘余IgM抗體效價;37℃孵育30min,洗滌3次,加1滴抗人球蛋白試劑,3400r/min離心15秒,輕輕搖動試管觀察結(jié)果,紅細(xì)胞凝集的最高稀釋度的倒數(shù)即為IgG抗－A(B)效價(必須比殘余IgM抗體效價高兩管以上檢測結(jié)果才有意義)。

1.2.3 新生兒ABO-HDN確認(rèn)試驗[3]取0～7d新生兒靜脈血4mL,進(jìn)行ABO和Rh(D)定型;紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗;血清中游離抗體測定;紅細(xì)胞抗體放散試驗;血清膽紅素測定。ABO-HDN診斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[2]。

1.2.4 患兒換血的交叉配合試驗[3]一般采用患兒母親的血清作“主側(cè)”交叉配血試驗。因為患兒發(fā)生溶血的抗體來自母親,且患兒出生后其抗體含量總低于母親血清中抗體的含量,所以供血者紅細(xì)胞與母親血清配合者,也一定與患兒血清配合;如果當(dāng)時只有患兒血樣,則可用患兒的紅細(xì)胞放散液或血清作“主側(cè)”配血。因為進(jìn)入患兒的抗體已大部分被患兒紅細(xì)胞吸附,所以放散液要比患兒血清更具代表性。在“次側(cè)”交叉配血試驗中,因為患兒紅細(xì)胞已被不完全抗體致敏,所以必然顯示凝集,不作配血禁忌考慮,只要“主側(cè)”配血無凝集即可進(jìn)行換血。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,O型孕婦與A、B型孕婦抗體陽性率及ABO-HDN患兒發(fā)病率的比較均行χ2檢驗,P＜0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 孕婦IgG抗-A(B)效價測定及新生兒ABO-HDN發(fā)病情況

581 例孕婦中,IgG抗-A(B)效價≥64者共256(44.1%)例,新生兒確診為ABO-HDN者共117例(20.1%)。其中O型孕婦432例(74.4%),效價≥64者210例(36.1%),確診為ABO-HDN的患兒共106例(18.2%);A型孕婦96例(16.5%),效價≥64者30例(5.2%),確診為ABO-HDN的患兒共8例(1.4%);B型孕婦53例(9.1%),效價≥64者16例(2.8%),確診為ABO-HDN的患兒共3例(0.5%)。見表2。

2.2 患兒換血情況

117例ABO-HDN患兒中共有9例進(jìn)行了換血治療,占ABO-HDN患兒的7.7%。其中A型患兒5例,B型患兒4例,均有嚴(yán)重貧血和黃疸癥狀,血清膽紅素＞12mg/dL,IgG抗-A(B)效價≥256。經(jīng)換血治療后,患兒貧血明顯好轉(zhuǎn),血清膽紅素大幅度下降,結(jié)合藥物和藍(lán)光照射治療,1周后均痊愈出院。

3 討論

ABO-HDN是母嬰ABO血型不合,母體產(chǎn)生的抗胎兒紅細(xì)胞抗原的免疫性抗體IgG抗-A(B)通過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán),并與胎兒紅細(xì)胞的相應(yīng)抗原結(jié)合而使其在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)內(nèi)被破壞,從而引起胎兒和新生兒發(fā)生血管外溶血[4]。孕婦血清IgG抗-A(B)效價的高低對ABO-HDN的發(fā)病率有直接關(guān)系。目前臨床通常以64作為臨界值,隨著IgG抗體效價的上升,ABO-HDN的發(fā)病率也相應(yīng)升高[5]。本研究顯示,O型孕婦IgG抗-A(B)效價陽性率明顯高于A、B型孕婦,所以O(shè)型孕婦的ABO-HDN發(fā)病率也相應(yīng)比A型和B型孕婦顯著增高。此點(diǎn)提示當(dāng)孕婦為O型,丈夫為非O型時,應(yīng)及早對孕婦進(jìn)行IgG抗體效價測定并觀察其動態(tài)變化,當(dāng)IgG抗-A(B)效價＞128時要給予藥物治療,當(dāng)IgG抗-A(B)效價＞512時,有必要時考慮血漿置換,以減少新生兒溶血病的發(fā)生[6]。

由于O型孕婦血清中的抗A和抗B也可由自然環(huán)境中類似A、B抗原物質(zhì)的免疫刺激產(chǎn)生,并于妊娠后通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)引起溶血,故ABO-HDN也可以發(fā)生在第一胎,且發(fā)生率約50%[7～8],此點(diǎn)也應(yīng)引起產(chǎn)科醫(yī)生的足夠重視。再者ABO-HDN和Rh-HDN比較,患兒出現(xiàn)黃疸的時間相對較晚,一般在生后2～5d,黃疸出現(xiàn)初期易被忽略為生理性黃疸而延誤溶血病的診斷。據(jù)報道,臨床上母嬰ABO血型不合患兒就診時間以≥3d為最多,占47.6%,最長者為生后10d,從而使患兒病程延長而導(dǎo)致發(fā)生膽紅素腦病及換血率增加,失去早期治療的有利時機(jī)[1]。

綜上所述,廣大產(chǎn)科醫(yī)生及育齡婦夫要正確認(rèn)識ABO-HDN的危害性,積極進(jìn)行產(chǎn)前血型血清學(xué)檢測,當(dāng)夫婦ABO血型不合時,應(yīng)定期觀察孕婦IgG抗-A(B)效價的變化,并適時采取干預(yù)措施,以有效控制并降低孕婦體內(nèi)的IgG抗體效價,減少胎兒的溶血程度,提高對HDN的早期預(yù)防效果。新生兒分娩后要及時送檢和治療,防止患兒嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生。切實(shí)做到早期預(yù)測、早期干預(yù)、早期診斷和早期治療,從而提高新生兒的生存質(zhì)量。

[1] 山艷春.新生兒母嬰ABO血型不合溶血病的早期診斷與治療[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志.2002,10(5):91～92.

[2] 劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2002:128～144.

[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:246～271.

[4] 李文斌,常立文,容志惠,等.新生兒ABO溶血病的早期診斷及治療[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2007,22(14):1055～1056.

[5] 可秋萍,王慶九,龐桂芝,等.不同比例重組血對新生兒溶血病換血治療后血液內(nèi)環(huán)境的影響[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2008,23(14):1078～1079.

[6] 林瓊琳,彭燕.100例母嬰ABO血型不合者血型血清學(xué)檢測[J].臨床輸血與檢驗,2006,8(3):236～237.

[7] 李勇,馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用血液免疫學(xué)血型理論和實(shí)驗技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社,2006:411～414.

[8] 曹文武,劉渝霞.153份母嬰ABO血型不合新生兒溶血病血樣標(biāo)本檢測結(jié)果分析[J].中國輸血雜志,2005,18(6):494～495.