周 健，柳小平

(南通大學(xué)附屬東臺(tái)醫(yī)院，江蘇南通224200)

多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種骨髓漿細(xì)胞惡性腫瘤，其發(fā)病機(jī)理尚不十分明確，至今仍無有效的治愈手段。MM臨床特征以患者骨髓中大量漿細(xì)胞的克隆性增生最為顯著，并激活破骨細(xì)胞引起骨質(zhì)破壞。研究顯示，MM的病程受多種細(xì)胞因子的調(diào)控。為此本研究通過檢測MM患者血清骨橋蛋白(OPN)和TNF-α水平，探討OPN和TNF-α在MM的輔助診斷及預(yù)后判斷中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2008年1月～2009年8月南通大學(xué)附屬東臺(tái)醫(yī)院和蘇州大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院收治MM患者33例，其診斷均符合張之南等［1］主編的《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》。男22例、女11例，年齡39～70(57.78±5.09)歲。33例患者中，初診10例，復(fù)發(fā)16例，緩解7例。臨床分期Ⅰ期3例、Ⅱa期7例、Ⅱb期8例、Ⅲa期10例、Ⅲb期5例。對(duì)照組30例為同期南通大學(xué)附屬東臺(tái)醫(yī)院體檢中心的健康體檢志愿者，男20例、女10例，年齡35～65(54.23±4.22)歲。所有受試者除外嚴(yán)重感染、心肝腎臟功能損害、自身免疫性疾病及其他惡性腫瘤。

1.2 方法 所有受試者于清晨空腹抽取靜脈血3 m l，3 000 g離心5 min后分離血清置-70℃冰箱保存待用。血清OPN測定采用ELISA法，用武漢博士德公司的人OPN檢測試劑盒，使用RAD550酶標(biāo)儀(BIO-RAD公司)在450 nm測定吸光度值。TNF-α檢測采用放射免疫分析法，試劑為科美生物工程公司產(chǎn)品，儀器為中科院上海日環(huán)儀器廠的SN-695B放免儀。所有操作由專人嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0軟件;檢測數(shù)據(jù)用±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同病程MM患者OPN和TNF-α檢測結(jié)果初診和復(fù)發(fā)MM患者血清OPN水平低于對(duì)照組，TNF-α水平高于對(duì)照組(P均＜0.05);MM緩解患者OPN和TNF-α水平與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。見表1。

表1 不同病程MM患者OPN和TNF-α檢測結(jié)果(±s)

表1 不同病程MM患者OPN和TNF-α檢測結(jié)果(±s)

注:與對(duì)照組比較，*P ＜0.05

組別 n OPN(pg/m l) TNF-α(ng/ml)MM 組初診 10 132.0 ±56.8* 9.45 ±1.09*復(fù)發(fā) 16 143.6 ±51.0* 9.12 ±1.12*緩解 7 387.0 ±113.7 1.98 ±0.23對(duì)照組30 412.0 ±109.9 2.32 ±0.33

2.2 不同臨床分期MM患者血清OPN和TNF-α水平 Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清OPN水平依次降低(P均＜0.05)，Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清TNF-α水平逐漸升高(P均＜0.05)，Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之間無差異(P＞0.05)。見表2。

表2 不同臨床分期MM患者血清OPN、TNF-α水平(±s)

表2 不同臨床分期MM患者血清OPN、TNF-α水平(±s)

注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期間 OPN、TNF-α 水平比較，P ＜0.05

臨床分期 n OPN(pg/m l) TNF-α(ng/ml)3 207.7 ±78.9 4.87 ±0.66Ⅱa 7 120.9 ±56.8 6.01 ±0.78Ⅱb 8 124.7 ±67.3 7.86 ±0.71Ⅲa 10 67.8 ±24.1 9.58 ±1.01ⅢⅠb 5 64.1 ±20.8 9.89 ±1.08

3 討論

MM是一種常見的惡性血液系統(tǒng)腫瘤，以產(chǎn)生M蛋白單克隆漿細(xì)胞惡性增生為特點(diǎn)，骨髓中克隆性增生的漿細(xì)胞浸潤骨骼和軟組織引起骨骼破壞、貧血、腎功能損害等表現(xiàn)，目前仍是一種不能治愈的疾?。?］。MM發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，其臨床特點(diǎn)之一就是進(jìn)行性骨質(zhì)破壞而導(dǎo)致的MM骨病。MM患者分化得到的B細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤骨髓，分泌破骨細(xì)胞活性因子，從而導(dǎo)致骨損傷。骨髓微環(huán)境作為一個(gè)具有多重功能、復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，由基質(zhì)細(xì)胞及其他復(fù)雜的細(xì)胞外基質(zhì)分泌的細(xì)胞因子對(duì)骨髓瘤細(xì)胞增殖和分化起到一定的調(diào)控作用［3］。

OPN是一種由多種細(xì)胞(成骨細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等)分泌的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，OPN能調(diào)節(jié)骨骼的礦物化，參與腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移，影響細(xì)胞間的信號(hào)傳遞。有研究認(rèn)為，OPN能阻止RANKL與RANK結(jié)合，抑制破骨細(xì)胞活性，減少破骨細(xì)胞數(shù)量［4］。Lipton等發(fā)現(xiàn)，與霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤患者OPN水平升高相比，MM患者OPN水平反而降低［2］。本研究結(jié)果也顯示，MM初診和復(fù)發(fā)的患者血清OPN水平顯著低于對(duì)照組，而緩解組患者OPN水平和對(duì)照組比較無差異。本研究還發(fā)現(xiàn)，OPN與MM病程進(jìn)展也有著密切的關(guān)系。Ⅰ期患者的OPN水平明顯高于Ⅱ、Ⅲ期患者，但Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之間無差異;說明隨著患者腎功能損害、骨損害病程的進(jìn)展，OPN水平會(huì)進(jìn)一步下降。國外文獻(xiàn)也報(bào)道，沒有骨損害患者血清OPN水平高于有骨損害患者，OPN血清水平降低與骨病嚴(yán)重程度密切相關(guān)［5］。因此，我們認(rèn)為OPN可作為MM預(yù)后診斷的一個(gè)重要的指標(biāo)。

TNF-α是由骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，屬腫瘤壞死因子超家族成員，具有廣泛的生物學(xué)活性。細(xì)胞因子的分泌異常會(huì)影響B(tài)細(xì)胞的激活、發(fā)育及分化。有文獻(xiàn)［6］報(bào)道，TNF-α通過直接刺激骨髓瘤前體細(xì)胞分化、發(fā)生，促使B細(xì)胞增殖分化，在MM患者溶骨性損害中發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果顯示，MM初診和復(fù)發(fā)的患者血清TNF-α顯著高于緩解組和對(duì)照組，Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清TNF-α水平逐漸升高，與國外報(bào)道相似［7］。說明TNF-α與MM的發(fā)生和發(fā)展均有著密切的關(guān)系。

［1］張之南，沈娣.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)［M］.2版.北京:科學(xué)出版社，1998:168-373.

［2］Lipton A，Alis M，Leitze K，et al.Serum osteoprotegerin levels in healthy controls and cancer patients［J］.Clin Cancer Res，2002，8(12):2306-2310.

［3］Preston SL，Alison MR，F(xiàn)orbes SJ，etal.The new stem cellbiology something for everyone［J］.JClin Pathol Molpathol，2003，56(9):86.

［4］SimonetWS，Lacey DL，Dunstancr，et al.Osteoprotegerin:a novel secreted protein involved in the regulation of bone density［J］.Cell，1997，89(2):309-319.

［5］Seidel C，H jertner Y，AbildgaardN，et al.Suerum osteoprotegerin levels are reduced in patientswith multiple myeloma with lytic bone disease［J］.Blood，2001，98(6):2269-2271.

［6］Balaille R.Ncw insight in theclinical biology ofmultiple myeloma［J］.Semin Haematol，1997，34(Suppl1):23.

［7］Singhal S，Mehta J，Desikan R，etal.Antitumor activity of thalidomide in refractorymultiple myeloma［J］.New End JMed，1999，341(21):1565.