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        通心絡對糖尿病大鼠血糖及非酶糖基化終產(chǎn)物的影響*

        2011-06-21 02:17:48蘇曉乾張常喜謝春毅
        天津藥學 2011年2期
        關鍵詞:通心絡糖基化糖化

        蘇曉乾 , 張常喜 ,謝春毅

        (1.寧夏醫(yī)科大學附屬醫(yī)院, 銀川 750004; 2.寧夏回族自治區(qū)中醫(yī)研究院,銀川 750021; 3.上海中西結合醫(yī)院,上海 200082)

        通心絡具有益氣通絡的作用,有實驗證明該藥對血糖有降低作用[1],也有實驗證明通心絡對血糖作用不明顯。但臨床發(fā)現(xiàn)通心絡對于糖尿病患者多種心血管疾病均具有一定治療作用。本實驗旨在觀察通心絡對糖尿病大鼠血糖和糖化血清蛋白的影響,探討通心絡對糖尿病病變的防治環(huán)節(jié)。

        1 材料和方法

        1.1材料 實驗選用清潔級、體重(210±20) g、SD雄性大鼠60只(上海復旦大學動物實驗中心提供,許可證號:SCXK滬2002-0002)。動物飼養(yǎng)溫度25 ℃,濕度40%。

        1.2藥品及試劑 通心絡由石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司提供。鏈脲佐菌素購自美國Sigma公司,進口分裝。糖化血清蛋白(GSP)購自南京建成生物工程公司。G1ucolxend血糖試紙采用德國羅氏公司產(chǎn)品。

        1.3主要儀器設備 深低溫冰箱:美國REVCO,型號, ULT7150-9V/ULT10140-9V;電子精準天平:Quantum 10509-00347; UV-2102C分光光度計2.1:上海精密科學儀器有限公司 (儀器編號:SFZ 1606016686);G1ucolxend血糖儀:德國羅氏公司。

        1.4方法

        1.4.1動物分組及處理 雄性SD大鼠60只,隨機取17只分為8周、12周正常對照組,8周組9只、12周組8只,正常飼養(yǎng),不予特殊處理。其余43只SD大鼠禁食12 h后,按55 mg/kg劑量腹腔內(nèi)注射濃度為1 mg/ml的鏈脲佐菌素(用檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液溶解配制,pH 4.2)。注射72 h后用羅氏血糖儀測定大鼠尾尖空腹血糖,血糖值>16.7 mmol/L,且伴有多飲、多食和尿量增加者確定為糖尿病(DM) 模型,納入糖尿病大鼠分組,不合格者剔除。最后有40只糖尿病造模成功,將其隨機分為兩組:模型組和通心絡組,每組又按取材時間分為8周和12周組;正常對照組和模型組每天予2 ml生理鹽水灌胃,通心絡治療組按1.0 g/kg·d-1給藥量稀釋于2 ml生理鹽水中灌胃。正常對照組8周組9只,12周組8只,余各組每組10只。分別于給藥8周、12周后腹腔注射1%戊巴比妥鈉麻醉后腹主動脈采血約10 ml左右并分離血清,大鼠采血后處死。以分光光度計測定糖化血清蛋白水平。

        1.4.2統(tǒng)計學分析 多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析,組間比較采用LSD檢驗,均由 Spss 12.0軟件完成。

        2 結果

        本實驗持續(xù)12周。實驗每4周監(jiān)測血糖1次。以上實驗在上海復旦大學實驗動物中心完成。重復造模不夠標準脫失3只。除正常大鼠組,糖尿病組及各藥物組大鼠均出現(xiàn)多食、多飲、多尿、消瘦等癥。實驗中途脫失4只,其中正常8周組灌胃不當死亡1只,糖尿病8周組死亡1只,通心絡8周組、12周組各因灌胃不當各死亡1只,最終進入結果分析53只。

        2.1通心絡對糖尿病大鼠血糖的影響 造模后初測模型組和通心絡治療組大鼠血糖水平均明顯高于正常對照組(P<0.05),而此兩組間血糖水平差異不明顯;實驗8周時,模型組大鼠血糖水平明顯高于正常8周對照組(P<0.05),通心絡治療組血糖水平略高于模型組(P>0.05)。實驗12周時,模型組大鼠血糖水平明顯高于正常12周對照組(P<0.05),通心絡12周治療組血糖水平與模型組無明顯差別(P>0.05)。見表1。

        表1 各組大鼠血糖比較 mmol/L

        2.2通心絡對糖尿病大鼠非酶糖基化終產(chǎn)物(糖化血清蛋白)的影響 實驗 8周時通心絡治療組糖化血清蛋白水平低于模型組8周組(但P>0.05);實驗12周后通心絡治療組糖化血清蛋白水平明顯低于模型組(P<0.05),見表2。

        表2 各組大鼠糖化血清蛋白的影響 mmol/L

        3 討論

        近年來隨著我國人民生活水平的提高,飲食結構的改變,糖尿病的發(fā)病率持續(xù)上升。糖尿病及其并發(fā)癥對人民的身體健康構成了嚴重的威脅,其心腦血管并發(fā)癥是致死致殘的主要原因。近10年來,中醫(yī)藥防治糖尿病并發(fā)癥取得了顯著的成績,開展中醫(yī)藥防治DM的基礎研究,對闡明中醫(yī)藥對DM的作用機制、提高中醫(yī)藥防治DM研究水平、推進中醫(yī)藥現(xiàn)代化進程,無疑將有所裨益。

        糖化血清蛋白是己糖(主要是葡萄糖) 與血清蛋白結合所形成的,其生成是一個緩慢、連續(xù)、不可逆的非酶促反應,其合成速率與血清蛋白所處環(huán)境中糖的濃度成正比, 有較長的半衰期,可代表6~8 周內(nèi)糖尿病病人血糖平均濃度[2 ,3]。也代表肌體內(nèi)組織蛋白非酶促糖基化蛋白的狀況。人類單核細胞表面具有糖基化終末產(chǎn)物(AGE)特異性受體[4],AGE與其受體結合后,可促使單核細胞釋放多種細胞因子及生長因子如腫瘤壞死因子ɑ、白介素-l、血小板源生長因子(PDGF)、IGF,TGF-β1等,增加內(nèi)皮細胞通透性及單核細胞趨化性,并促進血管及心肌ECM的增生[5],從而導致糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。

        通心絡具有益氣通絡的作用,但對降糖作用說法不一。通過本實驗發(fā)現(xiàn),通心絡對糖尿病大鼠的血糖降低不明顯,無統(tǒng)計學意義,而應用通心絡早期干預可以有效抑制蛋白的非酶糖基化反應,從而有效保護器官組織,并且通過8周組和12周組的比較可以看出,通心絡干預治療時間越長,對蛋白的非酶糖基化反應的抑制作用越好。

        1 林楠,宋王宣,薛麗.通心絡膠囊治療糖尿病腎病療效觀察.中國誤診學雜志,2005,5(9):1663

        2 Steinbrook R. Facing the diabetes epidemic-mandatory reporting of glycosylated hemoglobin values in New York City.N Engl J Med, 2006,354: 545

        3 Browless M. The role of non - enzymatic glucosulation in thepathogenesis of diabetic angiopathy. Molecular and cellular biology of diabetes mellitus Vol Ⅲ complication of diabetes mellitus. New York :Alan R.Liss Inc ,1989:9-18

        4 Myint K M , Yamamoto Y , Sakurai S,etal.Blockade of diabetic vascular injury by controlling of AGE-RAGE system. Curr Drug Targets, 2005, 6(4): 447

        5 Zhao H M, Malgorzata P, Wu I H,etal.Inhibiting Glycosphingolipid Synthesis Improves Glycemic Control and Insulin Sensitivity in Animal Models of Type 2 Diabetes.Diabetes, 2007,56: 1210

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