饒紅欣，彭信海，羅先權(quán)，陳 靈，蔣利媛

(湖南省森林植物園，湖南長沙 410116)

邊沁桉 (Eucalyptus benthamii)為桉屬 (Eucalyptus)雙蒴蓋亞屬 (Symphomyrtus)高大喬木，天然分布僅限于悉尼西南部沿納平河長100 km、寬40 km的地區(qū)。隨著桉樹逐漸往中亞熱帶地區(qū)大面積推廣，我國開展了優(yōu)良桉屬樹種的選擇試驗［1－4］，邊沁桉在引種和選擇試驗中表現(xiàn)了出速生、耐寒、抗高溫灼傷等特性［5－6］，是一個較適合中亞熱帶地區(qū)推廣的優(yōu)良桉屬樹種［7－9］。目前國內(nèi)外僅湖南省森林植物園有邊沁桉組織培養(yǎng)研究的相關(guān)報道［10］。我們對影響邊沁桉試管苗生長的因子進(jìn)行了更深入的研究。

1 材料與方法

1.1 材料來源

剪取湖南省森林植物園桉樹品比試驗林中2年生邊沁桉耐寒優(yōu)株上的半木質(zhì)化枝條，選取枝條上頂芽或腋芽為外植體。

1.2 試驗方法

1.2.1 培養(yǎng)條件 培養(yǎng)基中瓊脂含量0.7%，蔗糖3%，pH值5.8;培養(yǎng)溫度24～28℃;光照強度2 000～3 000 lx，每1天光照時間14 h。

1.2.2 激素對試管苗生長的影響 以邊沁桉試管苗為試材，以MS為基本培養(yǎng)基，分別附加不同濃度的BA、IBA激素，共12個處理，每1個處理20株，各重復(fù)3次，30 d時統(tǒng)計增殖系數(shù)、平均苗高、生根率、平均根數(shù)等，并對試驗結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析，新復(fù)極差測驗。

1.2.3 蔗糖濃度對試管苗生長的影響 以邊沁桉試管苗為試材，在 MS+BA0.5 m/L+IBA0.8 m/L+NAA0.2 m/L培養(yǎng)基中加入不同濃度蔗糖，5個處理，每1個處理20株，各重復(fù)3次，30 d時統(tǒng)計增殖系數(shù)、平均苗高等，并對試驗結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析，新復(fù)極差測驗。

1.2.4 光照對試管苗生長的影響 以邊沁桉試管苗為試材，培養(yǎng)基配方為MS+BA0.5 m/L+IBA 0.8 m/L+NAA 0.2 m/L，設(shè)3種光照處理:①標(biāo)準(zhǔn)光照，即光照強度2 000～3 000 lx，每1天光照時間14 h;②標(biāo)準(zhǔn)光照加自然輔助光照，即光照強度3 000～4 000 lx;③暗培養(yǎng)。每1個處理均為20株，各重復(fù)3次，30 d時統(tǒng)計增殖系數(shù)、平均苗高、葉色等生長情況，并對試驗結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析，新復(fù)極差測驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 激素對試管苗生長的影響

BA濃度對邊沁桉試管苗生長的影響結(jié)果見表1—2。由表1—2可以看出，BA濃度對增殖系數(shù)的影響極顯著，當(dāng)BA的濃度從0.5 m/L增至1.0 m/L時，增殖系數(shù)由2.8上升到3.5;當(dāng)BA的濃度大于1.0 m/L時，隨著BA濃度的增加，增殖系數(shù)反而下降，BA濃度達(dá)2.0 m/L時葉色變黃，BA濃度達(dá)4.0 m/L時部分試管苗死亡;BA的濃度對苗高生長無顯著影響。綜上所述，BA的適宜濃度為0.5～1.5 m/L。

IBA濃度對邊沁桉試管苗生長的影響結(jié)果見表3—4。由表3—4可以看出，IBA濃度對生根率和生根數(shù)都有極顯著影響，當(dāng)IBA濃度在0.5～2.0 m/L時，生根率隨著IBA濃度的增加而增加;IBA濃度為2.0 m/L時生根率最高，可達(dá)56.7%;IBA濃度在2.0～3.0 m/L時，生根率隨著IBA濃度的增加反而下降;IBA濃度在0.5～2.0 m/L時，生根數(shù)隨著IBA濃度的增加而增加;IBA濃度在2.0～3.0 m/L時，生根數(shù)無明顯變化。綜上所述，IBA的適宜濃度為1.5～3.0 m/L。

表2 BA對試管苗生長的影響Tab.2 Effect of different BA concentration on in vitro plantlets growth

表1 BA對試管苗生長影響的方差分析Tab.1 Variance analysis of the effect of different BA concentration on in vitro plantlets growth

表4 IBA對試管苗生根的影響Tab.4 Effect of different IBA concentration on in vitro plantlets growth

表3 IBA對試管苗生長影響的方差分析Tab.3 Variance analysis of the effect of different IBA concentration on in vitro plantlets growth

2.2 蔗糖濃度對試管苗生長的影響

蔗糖濃度對邊沁桉試管苗生長的影響結(jié)果見表5—6。由表5—6可以看出，蔗糖對增殖系數(shù)和高生長均有極顯著影響。試管苗在蔗糖濃度為120 g/L的培養(yǎng)基中生長5 d就出現(xiàn)生長不良現(xiàn)象，30 d全部死亡;在無糖的培養(yǎng)基中生長15 d后出現(xiàn)明顯的生長不良和死芽現(xiàn)象;在蔗糖濃度為60 g/L培養(yǎng)基中生長20 d后葉色變黃，幾乎停止生長，且葉片易脫落;在蔗糖濃度為15 g/L和30 g/L培養(yǎng)基中生長旺盛，葉色綠，二者的增殖系數(shù)、苗高生長均無顯著差異。綜上所述，繼代培養(yǎng)時蔗糖的適宜濃度為15～30 g/L。

表5 不同蔗糖濃度對試管苗生長影響的方差分析Tab.5 Variance analysis of the effect of different sucrose concentration on in vitro plantlets growth

表6 不同蔗糖濃度對試管苗生長的影響Tab.6 Effect of different sucrose concentration on in vitro plantlets growth

2.3 光照對試管苗生長的影響

不同光照對邊沁桉試管苗生長的影響結(jié)果見表7—8。由表7—8可以看出，光照對增殖系數(shù)有顯著影響，但對苗高無顯著影響;與標(biāo)準(zhǔn)光照相比，增加輔助光照對增殖系數(shù)和苗高無顯著影響，但對葉色有較明顯的影響，加輔助光照時，葉色易變紅或變黃;暗培養(yǎng)降低了增殖系數(shù)和苗高的生長量，芽變細(xì)且葉色變黃。觀察還發(fā)現(xiàn)，暗培養(yǎng)18 d時芽明顯黃化;30 d時芽的增殖系數(shù)不到標(biāo)準(zhǔn)光照的1/2;若在40 d時恢復(fù)正常的標(biāo)準(zhǔn)光照，芽又能轉(zhuǎn)綠，但60 d后，部分芽死亡。綜上所述，適宜光照為2 000～3 000 lx。

表7 不同光照條件對試管苗生長影響的方差分析Tab.7 Variance analysis of the effect of different illumination on in vitro plantlets growth

表8 不同光照對試管苗生長的影響Tab.8 Effect of different illumination on in vitro plantlets growth

3 結(jié)論與討論

(1)激素BA、IBA對邊沁桉試管苗生長有不同的影響，BA的濃度對芽的增殖系數(shù)有極顯著影響，對苗高生長無顯著影響，BA的適宜濃度為0.5～1.5 mg/L;IBA的濃度對生根率和生根數(shù)都有極顯著影響，IBA的適宜濃度為1.5～3.0 mg/L。

(2)利用植物組織培養(yǎng)進(jìn)行快繁，往往力求成本最低。試驗中我們發(fā)現(xiàn)試管苗在蔗糖濃度為15 g/L和30 g/L的培養(yǎng)基中生長無顯著差異，但在蔗糖濃度為15 g/L的培養(yǎng)基連續(xù)繼代3次后，生長勢明顯減弱，莖逐漸變得纖細(xì)。因此，在工廠化育苗中可采用蔗糖濃度15 g/L和30 g/L的培養(yǎng)基交替使用的方式進(jìn)行，既可節(jié)約成本，又可保證試管苗的質(zhì)量。

(3)邊沁桉是強陽性植物，光照對邊沁桉試管苗的增殖系數(shù)有顯著影響，但對苗高無顯著影響，適宜光照為2 000～3 000 lx，輔以自然光照時，葉色易變紅或變黃，可能是陽光直接照射，光線過強的原因。

［1］劉友全，李志輝，馬英，等．速生耐寒鄧恩桉在桉樹分布北緣的適應(yīng)性［J］．中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報，2007，27(2):66－69．

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［10］饒紅欣，彭信海，蔣利媛，等．邊沁桉組織培養(yǎng)技術(shù)研究［J］．中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報，2008，28(6):81－85．