程相鐸，雍 磊，梅海豫，李 波

嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 （eosinophil cationic protein，ECP）是活化的嗜酸性粒細(xì)胞釋放的毒性蛋白，在支氣管哮喘的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，可作為評(píng)價(jià)哮喘療效的指標(biāo)。為探索變應(yīng)原快速特異性免疫治療 （fast specific immunotherapy FSIT）的機(jī)制，筆者對(duì)60例支氣管哮喘患者進(jìn)行了快速特異性免疫治療，測定了治療前后血清ECP的變化，并與60例對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比觀察，結(jié)果如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選擇符合支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，并經(jīng)過變應(yīng)原特異性IgE測定確診的支氣管哮喘120例；男54例，女66例；年齡平均（35.7±9.5）歲。隨機(jī)分為治療組60例，男28例，女 32 例，年齡平均（36.8±9.4）歲，病程平均（8.5±1.8）年；對(duì)照組 60 例，男 26 例，女 34 例，年齡平均（34.6±9.7）歲，病程平均（7.8±1.3）年。 兩組間年齡、病程均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。

1.2 藥物 北京新華聯(lián)藥業(yè)公司生產(chǎn)的變應(yīng)原浸液，均為一種變應(yīng)原原液配制成各濃度級(jí)，濃度分別為1∶105（W/V）、1∶104、1∶103、1∶102。

1.3 方法 治療組： 初始治療變應(yīng)原浸液濃度從1∶105（W/V）開始，以 0.1、0.2、0.4、0.8 ml劑量遞增，上午及下午各 1 次皮下注射， 爾后以 1∶104、1∶103、1∶102濃度遞增，8 d 即可達(dá)維持量，完成初始治療；從第9天開始進(jìn)行維持治療，用1∶102濃度0.5 ml皮下注射1次/周，1年后療程結(jié)束[2]。對(duì)照組依據(jù)病情嚴(yán)重程度給予布地奈德氣霧劑霧化吸入，療程與治療組相同。

1.4 血清ECP檢測

1.4.1 標(biāo)本采集 所有受檢患者2周內(nèi)未應(yīng)用皮質(zhì)類固醇激素，停用抗組胺藥3 d（息斯敏停藥1周），每位患者治療前和治療后1周各抽取靜脈血2.5 ml，置普通玻璃管中，在37℃下凝血 60 min，1 000～1 350 g離心分離血清，-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 儀器、試劑 Pharmasia Unicap100 System及ECP測定試劑盒，包括：β-半乳糖苷酶標(biāo)記抗ECP抗體、抗ECP包被的固相載體（CAP）、底物（4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖苷）、ECP標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品等均為瑞典Pharmasia公司生產(chǎn)。

1.4.3 測定方法及原理 包被的ECP抗體與血清中的ECP結(jié)合，經(jīng)洗滌后，加入熒光底物，在β-半乳糖苷酶作用下，產(chǎn)生熒光，儀器動(dòng)態(tài)檢測熒光強(qiáng)度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，自動(dòng)計(jì)算并報(bào)告血清標(biāo)本ECP濃度（μg/L）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 分別對(duì)兩組患者治療前后血清ECP值求出均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（±s），采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié) 果

血清ECP測定結(jié)果顯示：治療組與對(duì)照組治療前患者血清ECP值水平無顯著性差異（P＞0.05）。療程結(jié)束后兩組患者血清ECP水平具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。見表1。

表1 兩組支氣管哮喘患者治療前后血清 ECP 水平（μg/L，±s）

表1 兩組支氣管哮喘患者治療前后血清 ECP 水平（μg/L，±s）

治療組 對(duì)照組 t P治療前 24.34±5.12 25.16±5.79 0.82 ＞0.05治療后 15.68±3.28 18.27±4.62 3.54 ＜0.01 t 11.03 7.20 P ＜0.01 ＜0.05

3 討 論

支氣管哮喘是一種特殊的病理免疫反應(yīng)過程。當(dāng)機(jī)體通過吸入、食入、注入或接觸等各種途徑，接受某種變應(yīng)原后出現(xiàn)哮喘發(fā)作等強(qiáng)烈的變態(tài)反應(yīng)。隨著對(duì)支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制的深入研究及免疫治療機(jī)制的進(jìn)一步了解，對(duì)哮喘治療側(cè)重于病因治療。特異性免疫治療（specific immunotherapy，SIT）是目前唯一的變態(tài)反應(yīng)性疾病病因治療方法，是指給變應(yīng)患者以遞增劑量的變應(yīng)原提取物，改善變應(yīng)原引起的相應(yīng)癥狀，包括常規(guī)免疫治療和快速免疫治療等，其中快速免疫治療則是在劑量上升階段，縮短注射間隔時(shí)間，盡快遞增到維持劑量的一種脫敏治療方法，可以縮短初始階段治療時(shí)間，從而縮短療程，增加患者依從性。嗜酸粒細(xì)胞的浸潤和氣道高反應(yīng)性是支氣管哮喘的兩個(gè)重要特征，嗜酸粒細(xì)胞和支氣管哮喘的密切關(guān)系已得到公認(rèn)，許多的證據(jù)已說明嗜酸粒細(xì)胞是變應(yīng)性疾病中最活躍的細(xì)胞之一，速發(fā)型變應(yīng)性疾病的組織和器官的局部以及滲出液中均有大量的嗜酸粒細(xì)胞出現(xiàn)。ECP是活化的嗜酸性粒細(xì)胞釋放的一種單鏈、含鋅、強(qiáng)堿性糖蛋白，可引起肥大細(xì)胞釋放組胺，并具有極強(qiáng)的細(xì)胞毒性、神經(jīng)毒性和殺菌、殺蠕蟲作用，在凝血過程中與蛋白質(zhì)相互作用及纖維蛋白溶解作用[3]。一項(xiàng)對(duì)變應(yīng)性鼻炎、哮喘患者血清嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白水平的Meta分析結(jié)果顯示，哮喘患者血清ECP比正常人升高，急性發(fā)作期變應(yīng)性哮喘患者ECP水平明顯高于緩解期患者，認(rèn)為ECP水平高低與變應(yīng)性哮喘病程及嚴(yán)重程度相關(guān)，血清ECP水平可作為變應(yīng)性哮喘的一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)[4]。本研究對(duì)60例支氣管哮喘患者在快速特異性免疫治療前后血清ECP檢測，同時(shí)測定對(duì)照組60例支氣管哮喘患者給予布地奈德氣霧劑霧化吸入治療前后血清ECP值。兩組治療后血清ECP值均低于治療前，有顯著性差異，其中治療組血清ECP值明顯降低，與對(duì)照組治療后的血清ECP值相比有顯著性差異。本研究表明快速特異性免疫治療可有效抑制嗜酸性粒細(xì)胞聚集或釋放ECP，從而起到治療哮喘的作用。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南（支氣管哮喘的定義、診斷、治療機(jī)教育和管理方案）[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2003，26（3）：132-138.

[2]梅海豫，程相鐸，胡光榮.快速脫敏療法對(duì)真菌致敏性哮喘的療效及 IgE，ECP 的影響[J].臨床軍醫(yī)雜志，2004，32(6)：17-19.

[3]高 靜，林東紅.嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白在支氣管哮喘發(fā)病中的意義[J].醫(yī)學(xué)綜述，2005，11（3）：204-205.

[4]程 靖，林文盛，吳小海.變應(yīng)性鼻炎、哮喘患者血清嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白水平的 Meta分析[J].循證醫(yī)學(xué)，2009，9（3）：158-160，167.