甘立新，韓 剛，吳遠(yuǎn)江，鄭建華，楊慧蓉，周劍楠

(1、湖北省咸寧市婦幼保健院，湖北 咸寧 437100；2、湖北省秭歸縣中醫(yī)醫(yī)院，湖北 秭歸 443600)

生物參考區(qū)間是解釋、分析檢驗(yàn)結(jié)果的依據(jù)和尺度[1]。臨床檢驗(yàn)對(duì)象是患者，由于年齡、性別、民族、居住地等原因引起的差異，不同個(gè)體的生物參考區(qū)間也有差異。另外，在一些醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室對(duì)同一檢測項(xiàng)目使用多套檢測系統(tǒng)，由于檢驗(yàn)方法的差異，也會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的不一致；或同一檢測方法，儀器試劑不同，檢驗(yàn)結(jié)果也會(huì)產(chǎn)生差異。根據(jù)ISO15189：2003《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室—質(zhì)量和能力的專用要求》，實(shí)驗(yàn)室必須慎重建立自己的生物參考區(qū)間，并定期評(píng)審。本文采用NCCLS C28-42推薦方法，對(duì)心肌酶五項(xiàng)指標(biāo) AST、LDH、CK、α-HBDH、CK-MB 的生物參考區(qū)間的適用性進(jìn)行驗(yàn)證。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 健康參考個(gè)體40名來源于體檢中心幼兒入園或入學(xué)體檢的健康兒童，健康參考個(gè)體的具體條件：(1)沒有任何影響檢測結(jié)果的生理指標(biāo)；(2)未服用藥物或進(jìn)行飲食治療；(3)發(fā)育、精神正常，無心血管、肺、腎和肝、膽、胰等器質(zhì)性疾患；(4)3個(gè)月內(nèi)無輸血和手術(shù)史；1個(gè)月內(nèi)未患任何疾患。

1.2 標(biāo)本準(zhǔn)備與處理 對(duì)合格的參考個(gè)體按 《檢驗(yàn)標(biāo)本采集手冊》采集標(biāo)本、送檢及時(shí)分離血漿，所測試標(biāo)本性狀正常，無溶血、無脂血。五個(gè)生化項(xiàng)目于采集標(biāo)本后2h內(nèi)完成測試，

1.3 儀器 日立7020全自動(dòng)生化分析儀。操作過程嚴(yán)格遵照實(shí)驗(yàn)室SOP文件的有關(guān)要求，操作人員固定，儀器運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)良好。

1.4 方法

1.4.1 質(zhì)控 質(zhì)控品為美國bio rad公司生產(chǎn)，質(zhì)控品批號(hào)為201101，有效期至2012年1月。

1.4.2 校準(zhǔn) 校準(zhǔn)品為英國朗道公司生產(chǎn)，校準(zhǔn)品批號(hào)為682UN，有效期至2012年12月。

1.4.3 試劑 天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)為上海豐匯公司提供；乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)、α-羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)、肌酸激酶同工酶(CKMB)為德賽診斷系統(tǒng)(上海)有限公司提供。

1.4.4 驗(yàn)證項(xiàng)目的確定 本文選擇的項(xiàng)目有5項(xiàng)：AST、LDH、CK、α-HBDH、CK-MB， 參 照 NCCLSC 28-42推薦方法要求進(jìn)行驗(yàn)證。

1.4.5 對(duì)參考區(qū)間的驗(yàn)證 收集40名健康個(gè)體標(biāo)本，在經(jīng)過性能評(píng)價(jià)、驗(yàn)證可靠的檢測系統(tǒng)上檢測，檢測結(jié)果95%(38名)在現(xiàn)用或新建檢測方法新引用參考區(qū)間以內(nèi)，2名結(jié)果在現(xiàn)用或假設(shè)參考區(qū)間以外，判定該參考區(qū)間有效。假如實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有3名或3名以上檢測結(jié)果在參考區(qū)間以外，先檢查檢測系統(tǒng)性能、檢測程序是否正確，然后考慮該項(xiàng)目是否具有人群生物特性，做進(jìn)一步調(diào)查，重新選擇合適的生物參考區(qū)間，必要時(shí)考慮重建生物參考區(qū)間。

1.1.6 檢測系統(tǒng)/方法準(zhǔn)備 參考區(qū)間驗(yàn)證試驗(yàn)前需掌握檢測系統(tǒng)的性能和使用的檢測方法，對(duì)檢測系統(tǒng)/方法分析性能進(jìn)行有效驗(yàn)證、評(píng)價(jià)，確定實(shí)驗(yàn)室檢測系統(tǒng)性能關(guān)鍵指標(biāo)不精密度和不準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)方法和可接受標(biāo)準(zhǔn)，保證檢測系統(tǒng)/方法的準(zhǔn)確、穩(wěn)定。檢測系統(tǒng)用配套的質(zhì)控品每天做質(zhì)控，按儀器說明定期校準(zhǔn)，在檢測系統(tǒng)在控狀態(tài)下檢測實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，保證驗(yàn)證項(xiàng)目結(jié)果的可靠。

2 結(jié)果

本文檢測的5個(gè)檢測項(xiàng)目的驗(yàn)證結(jié)果見表1。

在健康參考個(gè)體組AST項(xiàng)目40名結(jié)果分布范圍10～44U/L。參考區(qū)間上線超出了現(xiàn)用的參考區(qū)間0～40U/L，查閱原始結(jié)果為 39 名結(jié)果在 0～40U/L，超出范圍的1名檢測結(jié)果是：44U/L。在健康參考個(gè)體組LDH項(xiàng)目40名結(jié)果分布范圍153～281U/L。參考區(qū)間在現(xiàn)用的參考區(qū)間150～300U/L之內(nèi)。在健康參考個(gè)體組α-HBDH項(xiàng)目40名結(jié)果分布范圍65～202U/L。參考區(qū)間上線超出了現(xiàn)用的參考區(qū)間0～182U/L，查閱原始結(jié)果為38名結(jié)果在0～182U/L，超出范圍的2名檢測結(jié)果是：191U/L、202 U/L。在健康參考個(gè)體組CK項(xiàng)目40名結(jié)果分布范圍37～241U/L。參考區(qū)間上線超出了現(xiàn)用的參考區(qū)間24～229U/L，查閱原始結(jié)果為39名結(jié)果在24～229U/L，超出范圍的1名檢測結(jié)果是：241U/L。在健康參考個(gè)體組CK-MB項(xiàng)目40名結(jié)果分布范圍0～24U/L。參考區(qū)間在現(xiàn)用的參考區(qū)間0～24U/L之內(nèi)。

表1 兒童心肌酶項(xiàng)目現(xiàn)用參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

3 討論

病毒性心肌炎已成為兒童臨床上的常見病，且發(fā)病率有上升趨勢[2]。目前兒童病毒性心肌炎診斷標(biāo)準(zhǔn)中，心肌酶仍為主要指標(biāo)。本文LDH、CK-MB兩個(gè)項(xiàng)目完全適用，雖然AST在檢測的40例中有1例超過40U/L(為44U/L)，α-HBDH在檢測的40例中有 2 例高于 182U/L(為 191U/L、202 U/L)，CK 在檢測的 40例中有 1例高于 229U/L(為 241U/L)，但總體不違反 95%的可信度的要求，說明 AST、α-HBDH、CK這三個(gè)項(xiàng)目試劑說明書上的參考區(qū)間還是適用的。

眾所周知，生物參考區(qū)間是判斷健康與否的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)室必須保證給臨床提供的生物參考區(qū)間正確適用，否則會(huì)導(dǎo)致誤診誤治，所以實(shí)驗(yàn)室建立生物參考區(qū)間工作意義重大，但由于一般實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)行條件自行制定生物參考區(qū)間存在客觀難度，因而對(duì)實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證是十分必要的，也是可行的。當(dāng)發(fā)現(xiàn)生物參考區(qū)間出現(xiàn)偏離，我們應(yīng)采集大量健康人群的標(biāo)本進(jìn)行生物參考區(qū)間的建立，以確保生物參考區(qū)間的準(zhǔn)確性。

本次驗(yàn)證表明心肌酶5項(xiàng)指標(biāo)AST、LDH、CK、α-HBDH、CK-MB現(xiàn)用的參考區(qū)間適用本地兒童。

[1]陳桂山.臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目生物參考區(qū)間適用性驗(yàn)證探討[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31,170.

[2]吳梓梁.小兒內(nèi)科學(xué)[M].鄭州:鄭州大學(xué)出版社,2003:1793-1795.