阮殿清,史默怡,李建志,楊麗珍,王亞賢

(1.木蘭縣疾病控制中心,黑龍江 木蘭 151900;2.黑龍江中醫(yī)藥大學,黑龍江 哈爾濱 150040)

有很多中藥具有抗菌消炎的功效,更令人欣喜的是細菌不易對中藥產(chǎn)生耐藥性,因為中藥成分復雜,單味藥中也往往同時含有多種成分,能作用于細菌代謝的多個環(huán)節(jié),因此較抗生素不易產(chǎn)生耐藥性。我國有著豐富的中草藥資源,藥用植物種類約為11 020種,其中極少部分作抑菌、抗菌活性研究[1]。

1 實驗材料

1.1 儀器 電熱恒溫培養(yǎng)箱(D NP-9082,杭州匯爾儀器設備有限公司);醫(yī)用超凈工作臺(S W-C J-1F D,常州諾基儀器有限公司);分析天平(XP6,瑞士)。

1.2 菌株來源 金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌、耐萬古霉素腸球菌均從 2010年3～8月黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院不同的臨床病人標本中分離,實驗前對菌種進行了形態(tài),染色性,生化反應和抗原性鑒定。

1.3 實驗中藥 五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩、赤芍、白頭翁、射干、地丁、敗醬草、金銀花、魚腥草。

1.4 方法

1.4.1 中藥提取液的制備 中藥原藥均由黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院藥房提供。采用二次煮沸法[2-3]。稱取中藥黃連 300g,加入蒸餾水 1 000mL,浸泡 20min,強火加熱煮沸,文火煎煮 30min,攪拌,過濾;藥渣再加入蒸餾水 250m L按上法煎熬、過濾;兩次藥液合并濃縮成 300mL,調(diào)pH值至 7.4～7.6,并置離心管中,以 4 000r/min離心 10min;將中藥原液以高壓蒸氣滅菌 8磅 20min滅菌后即為實驗藥液(1m L藥液相當于原藥材 1g)。

1.4.2 菌液制備 在無菌條件下,用接種環(huán)分別將金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌、耐萬古霉素腸球菌等 4種細菌,分別接種于瓊脂斜面培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng) 24h,傳種于無菌肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)18h,再傳種于無菌肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng) 6h后,用前將菌液濃度 1∶1 000稀釋。

2 實驗方法與結(jié)果

采用中藥抗菌試驗試管法[4]測定藥物的最低抑菌濃度。見表 1,表 2,表 3。

表2 12種中藥對金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌抑菌活性對比

表3 12種中藥對腸球菌和耐萬古霉素腸球菌抑菌活性對比

3 討論

由結(jié)果可知,五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩、赤芍、白頭翁、射干、地丁、敗醬草、金銀花、魚腥草等 12種中草藥對金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌、耐萬古霉素腸球菌等 4種菌株均有不同程度抑制活性,其中五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩對金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有較強的抑菌作用;五倍子、黃連、黃柏、白頭翁、大黃、敗醬草對腸球菌和耐萬古霉素腸球菌有較強的抑菌活性,而且從表中我們可以看到,中藥對耐藥菌株和非耐藥菌株抑菌活性無明顯差異。本文所述的 12種中草藥皆為常用的內(nèi)服藥物,可為臨床治療各種感染性疾病提供參考。

[1]段勁生,王梅,胡本進.中草藥源殺菌劑的研究進展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2007,35(3):755,788.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1991:259-262.

[3]黃通旺,楊灝強,龐珊.抑制 β-內(nèi)酰胺酶的中草藥篩選研究[J].汕頭大學學報,2000,15(2):46-49.

[4]杜思邈,馬麗強,孫俊杰,等.苦參提取物體外抗菌實驗研究[J].中醫(yī)藥學報,2010,38(3):74-76.