鄭 靜 浙江省監(jiān)獄中心醫(yī)院檢驗科 杭州 310016

盧興國 龔旭波 朱 蕾 浙江大學附屬第二醫(yī)院血液科

骨髓涂片細胞學檢查是血液病診斷的主要方法，但其由于細胞增生程度常受細胞間吸附力、細胞與間質黏著力、有無纖維化等因素的影響，而不能客觀反映造血全貌，造成骨髓涂片形態(tài)診斷與骨髓印片、切片診斷上的差異[1]。骨髓切片雖是評估有核細胞的金標準，但檢查復雜和費時，又不能與骨髓涂片同步檢查[2]。骨髓印片和切片所顯示細胞量差異程度不大，常比骨髓涂片細胞量為多，能較真實地反映骨髓增生狀態(tài)，有利于提高疾病的診斷率。我們在應用骨髓印片細胞學檢驗中發(fā)現(xiàn)，骨髓涂片細胞學檢驗診斷成熟B淋巴組織腫瘤有明顯欠缺，而骨髓印片則在檢查有核細胞量、淋巴細胞百分比和淋巴細胞組織學結構方面，明顯優(yōu)于骨髓涂片，容易作出快速的形態(tài)學診斷。現(xiàn)將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 成熟B淋巴細胞腫瘤患者36例，均為浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院2007年9月—2010年9月期間住院和門診的初診患者，男20例，女16例，年齡37～78歲，中位年齡62歲。每例同步做血片、骨髓涂片、骨髓印片和骨髓切片檢查，并以骨髓切片為金標準而作出確診，均符合成熟淋巴細胞腫瘤的診斷標準。

1.2 觀察指標 觀察每例患者骨髓涂片和骨髓印片有核細胞量和淋巴細胞百分比，觀察骨髓印片淋巴細胞分布組織結構性概貌，并分析這些指標對成熟淋巴細胞腫瘤診斷的影響。

1.3 觀察方法 骨髓印片和骨髓涂片均用Wright-Giemsa染色，以10個油鏡視野（Olympus CX31顯微鏡）平均有核細胞數(shù)計數(shù)分級法比較有核細胞量[4]；分類計數(shù)500有核細胞，計算淋巴細胞百分比；骨髓印片組織概貌，參考組織學特征[5]分為散在性間質型、簇狀結節(jié)型、間質-結節(jié)型、浸潤彌散型。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSSl3.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)處理分析。計量資料以（） 表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 骨髓涂片與骨髓印片有核細胞量比較 36例成熟淋巴細胞腫瘤骨髓印片和骨髓涂片有核細胞量比較，骨髓涂片中有核細胞減少16例（44%），骨髓印片檢查未見減少病例；一般有核細胞量病例，骨髓涂片多于骨髓印片，但差異無統(tǒng)計學意義（χ2=1.424，P＞0.05）；骨髓印片有核細胞增多病例顯著多于骨髓涂片（χ2=23.063，P＜0.01），見表 1。

表1 36例成熟淋巴細胞腫瘤骨髓涂片與骨髓印片有核細胞量比較 例（%）

2.2 骨髓涂片與骨髓印片淋巴細胞百分比 骨髓涂片淋巴細胞在正常范圍（10%～25%）者4例（11.1%），骨髓印片未見1例。淋巴細胞比例明顯增高病例，骨髓印片多于骨髓涂片，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表 1。骨髓涂片淋巴細胞均值（62.64±22.48）%，骨髓印片為（72.83±20.35）%，后者高于前者（t=2.016，P＜0.05）。

2.3 骨髓印片組織結構概貌 骨髓涂片上淋巴細胞均呈散在性分布，不能觀察。骨髓印片淋巴細胞分布以彌散型最多（58.3%），結節(jié)型和間質-結節(jié)型各占20%左右。

2.4 骨髓涂片與骨髓印片細胞學診斷的符合率 骨髓涂片細胞學檢查符合診斷者僅占52.7%，骨髓印片細胞學檢查由于有核細胞豐富，淋巴細胞比例高，及顯示的組織結構性概貌，細胞學檢查診斷符合率達100%。骨髓印片與涂片對診斷的影響差異有統(tǒng)計學意義（χ2=22.255，P＜0.01）。

2.5 骨髓涂片細胞學特征 骨髓涂片作出診斷19例，其中16例為慢性淋巴細胞白血病，骨髓涂片細胞象具有慢性淋巴細胞白血病基本特征及典型特征；3例為小細胞性淋巴瘤骨髓侵犯患者，結合臨床有該病史和近期病情加重，有成熟淋巴細胞腫瘤細胞學的基本特征。骨髓涂片不能作出診斷的17例中，誤診再障4例，造血減低4例，判為骨髓稀釋5例。

3 討 論

骨髓印片是將骨髓組織直接在載玻片上印制，干擾因素較骨髓穿刺并將骨髓液制成涂片時明顯減少，故在一般情況下，骨髓印片的有核細胞量要高于骨髓涂片。良好的骨髓活檢組織印片還顯示組織結構的一些特征，不但在評估有核細胞量上優(yōu)于骨髓涂片，而且通過印在標本中的瘤細胞組織浸潤結構，更利于對疾病作出評估和診斷[6]。至今，血液形態(tài)學仍是血液病診斷的基礎和基本項目[7]，尤其是一些以細胞量多少為主要診斷依據(jù)的血液病，如再障、造血減低、脾功能亢進、骨髓增殖性腫瘤、繼發(fā)性造血細胞增多等，骨髓有核細胞量的可靠評估尤其重要；在造血腫瘤中，如漿細胞骨髓瘤、急性白血病骨髓檢查細胞量的減少也會影響診斷[8]。

成熟B淋巴細胞腫瘤是常見的惡性腫瘤，與細胞形態(tài)學相關的常見類型有慢性淋巴細胞白血病、小細胞淋巴瘤、淋巴漿細胞淋巴瘤、克隆性B淋巴細胞增多癥、濾泡淋巴瘤等。本文對36例成熟B淋巴細胞腫瘤進行骨髓涂片和骨髓印片細胞學同步觀察，表明骨髓涂片的有核細胞量明顯少于骨髓印片，尤其是細胞明顯減少者。顯然，骨髓涂片細胞量的評估不足，可影響疾病診斷。觀察骨髓涂片淋巴細胞百分比雖然也有一定差異，但明顯不如有核細胞顯著，因為在細胞學分析中，某一成熟細胞百分比變化的意義不及有核細胞量的變化敏感。觀察骨髓印片淋巴細胞分布的組織特性，36例成熟淋巴細胞腫瘤，一半以上淋巴細胞呈彌散型分布，這是腫瘤細胞浸潤替代造血組織的表現(xiàn)，結節(jié)型和混合型常為腫瘤細胞浸潤的早中期表現(xiàn)，這些均是瘤細胞生長的共性，難以在骨髓涂片中見到。骨髓印片的這一特點，以及比骨髓涂片有核細胞為多的優(yōu)勢，使成熟淋巴細胞腫瘤診斷較骨髓涂片更為容易。

我們認為，對于成熟淋巴細胞腫瘤，尤其是淋巴漿細胞淋巴瘤、單克隆B淋巴細胞增多癥或慢性淋巴細胞白血病早期病人的診斷中，單一的骨髓涂片細胞學檢查有明顯的欠缺，極易造成漏診和誤診。骨髓印片細胞學檢查簡便、實用、快速，是彌補骨髓涂片細胞學某些不足的最佳方法，兩者同步檢查可以明顯提高細胞形態(tài)學的診斷，在非慢性淋巴細胞白血病的成熟淋巴B細胞腫瘤中的診斷價值尤其凸顯。

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［3］Swerdlow SH，Campo E，Harris NL，et al.World Health Organization Classification of Tumors Pathology and genetics of tumors of haematopoietic and lymphoid tissues.4th ed［M］.Lyon：IARC press，2008：179-261

［4］Lu XG，Huang LS，Xu XH，et al.Application of bone marrow biopsy imprint in evaluating cellularity［J］.Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban，2006，35：331-335.

［5］Rozman C，Hemadez-Nieto L，Monserrat E，et al.Prognostic significance of bone-marrow patterns in chronic lymphocytic leukemia［J］.Br J Haematol，1981，47：529-537.

［6］James LP,Stass SA,Schumacher HR.Value of imprint preparations of bone marrow biopsies in hematologic diagnosis［J］.Cancer，1980，46：173-177.

［7］Chee CE,Kumar S,Larson Dr,et al.The importance of bone marrow examination in determining complete response to therapy in patients with multiple myeloma［J］.Blood，2009，114：2617-2618.

［8］盧興國.造血和淋巴組織腫瘤現(xiàn)代診斷學［M］.北京：科學出版社，2005：26-42.