焦蓉，朱小燕

(湖北省襄陽(yáng)市第一人民醫(yī)院兒科，441001)

神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor，NGF)對(duì)中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)及其他組織細(xì)胞具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，是維持外周感覺神經(jīng)系統(tǒng)分布、存活、突觸活動(dòng)的重要因子。最近研究表明，NGF在調(diào)節(jié)心血管功能、維持循環(huán)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和心血管動(dòng)態(tài)自身穩(wěn)定方面發(fā)揮重要的作用，如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、動(dòng)脈粥樣硬化、缺血性心肌病等循環(huán)血液中NGF都有改變［1］。心力衰竭時(shí)存在交感神經(jīng)活動(dòng)過度，但心力衰竭患兒的心臟交感神經(jīng)密度降低，其原因一直缺乏合理解釋。在小兒心力衰竭中NGF水平變化研究較少，筆者在本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)25例心力衰竭患兒血漿NGF、去甲腎上腺素(norepinephrin，NE)水平變化，并用卡托普利干預(yù)研究其改善心功能的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2009年4月～2010年5月在本院住院及隨診的心力衰竭患兒25例，診斷依據(jù)為1985年全國(guó)小兒心血管專業(yè)學(xué)術(shù)會(huì)議制定的小兒心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn);心功能分級(jí)符合紐約心臟學(xué)會(huì)(Newyork Heart Association，NYHA)標(biāo)準(zhǔn)及Ross嬰兒心力衰竭標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn):所有入選患兒均排除惡性腫瘤、自身免疫性疾病、內(nèi)分泌疾病、急慢性感染、入院前1個(gè)月未曾使用糖皮質(zhì)激素。25例患兒隨機(jī)分為常規(guī)組12例和卡托普利組13例;兩組患兒年齡、性別、心功能、病因分類等因素差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;將在我院門診健康體檢正常的兒童20例作為對(duì)照組。治療前及治療后3個(gè)月檢測(cè)各指標(biāo);所有入選患兒均行心臟彩色B超檢查。

1.2 治療方法 常規(guī)組給予地高辛(第一天給予負(fù)荷量，＜2歲 25～30 μg· kg-1，≥2歲 20～25 μg·kg-1。初次給予50%負(fù)荷量，剩下分2次平均給藥，間隔6 h。此后12 h給予維持劑量，維持量為負(fù)荷量的20% ～25%，分2次服用，每12 h1次。對(duì)有心肌病變的患兒，劑量可稍減)、利尿藥(氫氯噻嗪:每次1 ～2 mg·kg-1，tid，po;螺內(nèi)酯，1 ～2 mg·kg-1·d-1，po)及血管擴(kuò)張藥(主要用于難治性心力衰竭，硝普鈉:開始劑量0.5 ～1.0 μg·kg-1·min-1，靜脈滴注，最高3～5 μg·kg-1·min-1)，卡托普利組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用卡托普利(中美上海施貴寶制藥公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào):國(guó)藥準(zhǔn)字 H31022986，規(guī)格:每片12.5 mg)，1 ～2 mg·kg-1·d-1，bid，連用3 個(gè)月。

1.3 標(biāo)本采集及檢測(cè)方法 所有入選患兒均在入院后1～2 d，或門診就診時(shí)及治療3個(gè)月后在清晨空腹采靜脈血4 mL，置于抗凝管(含乙二胺四乙酸)中，正常兒童也在清晨空腹采血，3 000 r·min-1(離心半徑15 cm)離心5 min，收集上清液，于-70℃冰箱保存待檢。用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測(cè)血漿中NGF水平，試劑盒購(gòu)于深圳即晶美生物制劑有限公司;用高效液相色譜-電化學(xué)法檢測(cè)血漿NE。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS11.5軟件包處理結(jié)果，先做變量正態(tài)分布和方差齊行檢驗(yàn)，再行t檢驗(yàn)、方差分析、直線相關(guān)分析、Ridit分析，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s)表示。

2 結(jié)果

2.1 心力衰竭組與正常對(duì)照組血漿NGF、NE水平比較 結(jié)果見表1。心力衰竭組血漿NE水平較正常對(duì)照組明顯升高，心功能越差升高越明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);NGF水平較正常對(duì)照組明顯降低，心功能越差降低越明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);血漿NGF水平與NE水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.771，P＜0.01)。

2.2 常規(guī)組與卡托普利組各項(xiàng)指標(biāo)變化 結(jié)果見表2。與治療前比較，常規(guī)組治療3個(gè)月后，血漿NE水平明顯降低(P＜0.01)，NGF水平升高(P＜0.05)，射血分?jǐn)?shù)(ejection fraction，EF)無(wú)明顯變化(P＞0.05);卡托普利組治療前后血漿NE水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，NGF水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，EF明顯升高(P＜0.01)。兩組治療后比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

2.3 心功能改善情況 常規(guī)組與卡托普利組治療3個(gè)月后心功能分級(jí)有不同程度的降低，后者降低更明顯，兩組經(jīng)Ridit分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

表1 心力衰竭組患兒與健康兒童血漿NGF和NE水平比較Tab．1 Comparion of the plamsa levels of NGF and NE between children with congestive heart failure and normal children ±s

表1 心力衰竭組患兒與健康兒童血漿NGF和NE水平比較Tab．1 Comparion of the plamsa levels of NGF and NE between children with congestive heart failure and normal children ±s

組別 例數(shù)NGF/(pg·mL-1)NE/(ng·L-1)心力衰竭組25 27.8±8.1 723.9±112.7心功能Ⅱ級(jí) 7 34.7±6.8 618.1±55.7心功能Ⅲ級(jí) 10 25.4±6.8 752.8±65.0心功能Ⅳ級(jí) 8 17.6±3.1 865.7±49.9正常對(duì)照組20 46.5±12.7 139.1±30.6

3 討論

NEMOTO等［2］首先在大鼠主動(dòng)脈平滑肌中檢測(cè)到NGF、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain derived neurophic factor，BDNF)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素-3(neurotrophin-3，NT-3)及其特異性受體高親和力酪氨酸激酶受體A、B、C的表達(dá)。其他學(xué)者也先后發(fā)現(xiàn)上述因子在鼠和雞胚的心臟和大血管中的表達(dá)。有研究表明，血管內(nèi)皮細(xì)胞可能也合成和分泌BDNF。目前在成人心臟中也已發(fā)現(xiàn)NGF和BDNF的mRNA及其特異性受體的表達(dá)。NGF是維持外周交感神經(jīng)和感覺神經(jīng)系統(tǒng)分布、存活、突觸活動(dòng)的重要因子，通過NTs低親和力受體(p75NTR)和高親和力酪氨酸激酶受體發(fā)揮作用。受神經(jīng)支配的組織中交感神經(jīng)的密度和NGF表達(dá)水平相關(guān)，敲除NGF基因小鼠生后3 d交感神經(jīng)分布減少80%［3］。

表2 常規(guī)組與卡托普利組治療前后NGF、NE水平和EF變化比較Tab．2 Comparion of the plamsa levels of NGF and NE between ordinary regimen group and captopril regimen group before and after treatment

研究證實(shí)，心力衰竭時(shí)存在交感神經(jīng)活動(dòng)過度，但心力衰竭患兒的心臟交感神經(jīng)密度減少，其原因一直未有合理解釋。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)心力衰竭患兒血漿NE水平明顯升高，心功能越差NE水平越高，而NGF水平明顯降低，與NE水平呈負(fù)相關(guān)。心力衰竭時(shí)常伴有血漿NE增高，而一定濃度的NE常會(huì)減少心肌細(xì)胞NGFmRNA蛋白的表達(dá)，從而減少心臟交感神經(jīng)分布［4］;而NGF還可調(diào)節(jié)交感神經(jīng)和心肌細(xì)胞之間的突觸傳遞［5］。QIN等［6］在狗心力衰竭模型也發(fā)現(xiàn)血漿NE增高，心肌NGF、TrKA蛋白及mRNA的含量降低，以及交感神經(jīng)分布減少等相似的改變。這些研究結(jié)果提示，心力衰竭時(shí)交感神經(jīng)過度活動(dòng)而增加的血漿NE作用于心肌細(xì)胞，使血漿或心肌中的NGF和TrKA含量降低，進(jìn)而減少心臟中的交感神經(jīng)分布，這個(gè)與NGF相關(guān)的病理過程可能與心功能異常有密切關(guān)系。

心力衰竭時(shí)腎素-血管緊張肽-醛甾酮系統(tǒng)激活，血管緊張肽Ⅱ生成增多，而血管緊張肽Ⅱ可以增加NE的釋放，減少NE的攝取，使血漿中NE的濃度增高?？ㄍ衅绽梢酝ㄟ^抑制血管緊張肽Ⅱ的生成而減少血漿中NE的濃度。本研究結(jié)果顯示，卡托普利治療組血漿NE水平明顯降低，NGF水平升高，心功能改善，與常規(guī)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這一結(jié)果提示卡托普利可能通過升高血漿或心肌中NGF表達(dá)水平，從而增加心臟交感神經(jīng)分布;心力衰竭時(shí)心臟交感神經(jīng)末端功能紊亂對(duì)心肌β腎上腺素能受體下調(diào)起重要的作用［7］，卡托普利可能通過改善心臟交感神經(jīng)的分布，改善心力衰竭患兒的心功能。

對(duì)NGF在心力衰竭中作用的進(jìn)一步研究，有助于建立神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)理論并延伸神經(jīng)免疫框架至心力衰竭的病理生理中。

［1］ HILTUNEN J O，LAURIKAINEN A，VAKEVA A，et al.Nerve growth factor and brain-derived neurotrophic factor mRNAs are regulated in distinct cell populations of rat heart after ischaemia and reperfusion［J］.J Pathol，2001，194(2):247-253.

［2］ NEMOTO K，F(xiàn)UKAMACHI K，NEMOTO F，et al.Gene expression of neurotrophins and their receptors in cultured rat vascular smooth muscle cells［J］.Biochem Biophys Res Commun，1998，245(1):284-288.

［3］ SNIDER W D.Functions of the neurotrophins during nervous system development:what the knockouts are teaching us［J］.Cell，1994，77(5):627-638.

［4］ KAYE D M，VADDADI G，GRUSKIN S L，et al.Reduced myocardial nerve growth factor expression in human and experimental heart failure［J］.Circ Res，2000，86(7):E80-E84.

［5］ LOCKHART S T，TURRIGIANO G G，BIRREN S J，et al.Nerve growth factor modulates synaptic transmission between sympathetic neurons and cardiac myocytes［J］.J Neurosci，1997，17(24):9573-9582.

［6］ QIN F，VULAPALLI R S，STEVENS S Y，et al.Loss of cardiac sympathetic neurotransmitters in heart failure and NE infusion is associated with reduced NGF［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2002，282(1):363-371.

［7］ HIROYA K，TAI-HWANG M F，ERDAN D，et al.ACE inhibition improvescardiac NE uptake and attenuates sympathetic nerve terminal abnormalities in heart failure［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，1999，277(4):1609-1617.