楊潤梅，李金蓮，高南南，陳慧敏，蔡大勇，屠宴會(huì)

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所藥理毒理研究中心，北京 100193)

通過動(dòng)物和人類臨床研究，動(dòng)脈粥樣硬化被分為早期和晚期階段。1993年Ross首先提出動(dòng)脈內(nèi)皮結(jié)構(gòu)損害和功能紊亂是動(dòng)脈粥樣硬化最早期的特征性病變［1］，隨后經(jīng)大量研究得到證實(shí)。并發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化上述早期病變是可以逆轉(zhuǎn)的，而進(jìn)展后形成的纖維斑塊和粥樣斑塊病變則很難逆轉(zhuǎn)［2］，因此動(dòng)脈粥樣硬化早期病變的診斷以及藥物的干預(yù)治療顯得尤為關(guān)鍵。

集中在動(dòng)脈粥樣硬化早期階段的藥物的發(fā)現(xiàn)和評(píng)價(jià)需要一種適合的動(dòng)物模型，10余年來，許多動(dòng)物模型被用于動(dòng)脈粥樣硬化研究，包括兔、猴、小型豬、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等，它們共同存在造模周期長、灌胃不方便、來源困難、成本高等問題。

一個(gè)理想的研究早期動(dòng)脈粥樣硬化的動(dòng)物模型應(yīng)包括建模周期相對(duì)較短、性質(zhì)穩(wěn)定、重復(fù)性好，操作方便，同時(shí)應(yīng)具有與人近似的早期動(dòng)脈粥樣硬化典型的病理改變，豚鼠顯示出了許多這些特性。豚鼠是為數(shù)不多的，像人類一樣以LDL為載體攜帶血液中大部分膽固醇的模型動(dòng)物，此外，豚鼠還具有肝臟游離膽固醇較酯化膽固醇濃度高，合成和分解膽固醇比率適當(dāng)，及許多其它的與人的情況相似的特征［3］。目前國內(nèi)外對(duì)豚鼠早期動(dòng)脈粥樣硬化模型及其形成機(jī)制的研究未見報(bào)道，因此本研究主要應(yīng)用高膽固醇飼料誘導(dǎo)方法，建立豚鼠早期動(dòng)脈粥樣硬化模型，并對(duì)模型形成機(jī)制及其生物學(xué)特征進(jìn)行深入研究和探討，同時(shí)與大鼠模型進(jìn)行比較，為豚鼠模型在抗動(dòng)脈硬化藥物研究中的應(yīng)用及其優(yōu)勢提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1動(dòng)物Hartley豚鼠，♂，體質(zhì)量200～250 g，7～8周齡，來源于北京科宇動(dòng)物養(yǎng)殖中心，生產(chǎn)許可證:SCXK(京)2008-0003。Wistar大鼠，♂，體質(zhì)量 200～220 g，7～8周齡，來源于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，生產(chǎn)許可證:SCXK(京)2007-0001。

1.2試劑血清TC(批號(hào)080411)、LDL-C(批號(hào)080151)測定試劑盒為中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品。豚鼠CETP(批號(hào)301330221202)、大鼠 CETP(批號(hào)301330221111)、豚鼠 LP(a)(批號(hào) 301330012331)、大鼠 LP(a)(批號(hào)301330012001)、豚鼠 ox-LDL(批號(hào) 3013221031111)、大鼠ox-LDL(批號(hào)3013031031233)酶聯(lián)免疫試劑盒均為美國ADL公司進(jìn)口產(chǎn)品。兔抗大鼠PCNA抗體(批號(hào)091028)、CD36抗體(批號(hào)091010)、VCAM-1抗體(批號(hào)091022)、二抗試劑盒(批號(hào)SP-0023)、DAB顯色液(批號(hào)C-0010)，均購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司。兔抗豚鼠PCNA抗體為Minipoer產(chǎn)品;兔抗豚鼠CD36、VCAM-1抗體均為UCL公司進(jìn)口分裝產(chǎn)品。

1.3儀器日立7060型全自動(dòng)生化分析儀;Fluko F6/10型組織勻漿機(jī);DM-V型自動(dòng)組織包埋機(jī);Leica RM2016型石蠟切片機(jī);Leica DM4000B生物顯微鏡;Bio-RAD MQX200微孔板掃描酶標(biāo)儀。

1.4實(shí)驗(yàn)方法將豚鼠和大鼠隨機(jī)分成對(duì)照和模型組，分別定量飼喂常規(guī)顆粒飼料和高脂飼料(質(zhì)量構(gòu)成比為膽固醇0.01、豬油0.10，常規(guī)飼料0.89)。于實(shí)驗(yàn)第6周處理動(dòng)物，烏拉坦麻醉后股動(dòng)脈取血，離心分離血清酶法檢測TC、LDL-C水平，ELISA測定CETP、LP(a)和ox-LDL含量。剖取肝左大葉，酶分析法測定肝臟ACAT活性(以油酰輔酶A和膽固醇為底物進(jìn)行酶促反應(yīng)，產(chǎn)物用DTNB顯色定量用于計(jì)算ACAT活性)。分離主動(dòng)脈，固定于體積分?jǐn)?shù)為0.10的甲醛溶液中，乙醇梯度脫水，取主動(dòng)脈弓部，石蠟包埋，4 μm切片，H＆E染色。低倍鏡下(×200)，取完整主動(dòng)脈弓部的橫斷面。LAS采圖，用Image pro plus 6.0分別測量外彈力板以內(nèi)面積(S1)及管腔面積(S2)，按R=(S1-S2)/S1計(jì)算內(nèi)膜-中膜面積構(gòu)成比，以此換算出內(nèi)膜-中膜厚度變化。高倍鏡下(×400)每個(gè)切片隨機(jī)選取5個(gè)視野，計(jì)數(shù)內(nèi)皮細(xì)胞及內(nèi)彈力板以外范圍的炎性細(xì)胞核總數(shù)，主要是浸潤與局部增生的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，并觀察脂斑形成情況(表現(xiàn)為內(nèi)含大量脂質(zhì)的泡沫細(xì)胞聚集和堆積)。

應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法測定主動(dòng)脈壁PCNA、CD36及VCAM-1蛋白表達(dá)。高倍鏡(×400)下每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)選取9～10個(gè)視野，使用專業(yè)采圖軟件LAS采集圖片，分析軟件Image pro plus 6.0分別測定動(dòng)脈壁PCNA、CD36和VCAM-1陽性表達(dá)的平均光密度值(OD)、陽性染色面積(AP)以及觀察視野區(qū)面積(AT)，以單位體積內(nèi)膜細(xì)胞陽性表達(dá)平均光密度值變化表示動(dòng)脈壁PCNA、CD36和VCAM-1蛋白表達(dá)的變化(通過公式MOD=［OD×(AP/AT)3/2］計(jì)算)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以±s表示，采用SPSS 10.0軟件進(jìn)行非獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1血清TC、LDL-C、CETP、LP(a)、ox-LDL濃度及肝臟ACAT活性變化高脂飼料誘導(dǎo)6周后，豚鼠血清TC、LDLC水平明顯升高，比對(duì)照組分別升高11.13倍和7.82倍;大鼠模型組血清TC和LDL-C較對(duì)照組分別升高2.00倍和3.16倍，明顯低于同期豚鼠模型組。此外，豚鼠血清CETP、LP(a)水平，ox-LDL表達(dá)，肝臟ACAT活性均較對(duì)照組明顯增強(qiáng)(P＜0.05，P＜0.01)，而相同高脂飼料誘導(dǎo)下大鼠上述指標(biāo)均未出現(xiàn)明顯變化，見Tab 1、2。2.2主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化豚鼠與大鼠正常對(duì)照組動(dòng)脈內(nèi)膜完整光滑無損傷，中膜平滑肌細(xì)胞排列整齊，厚薄均勻，少見單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞黏附和浸潤。高脂飼料誘導(dǎo)6周后豚鼠模型組動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞水腫、脫落，中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂，部分平滑肌細(xì)胞水腫和增殖，內(nèi)膜-中膜厚度與對(duì)照組比較明顯增加。沿內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附較多單核細(xì)胞;內(nèi)膜出現(xiàn)大量單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和泡沫細(xì)胞聚集。此外有比例為0.40的動(dòng)物動(dòng)脈內(nèi)膜出現(xiàn)脂紋脂斑，表現(xiàn)為大量泡沫細(xì)胞聚集成堆，周邊可找到單核巨噬細(xì)胞，但病灶內(nèi)未出現(xiàn)變性的膠原纖維帽，該病變屬于動(dòng)脈粥樣硬化的脂紋脂斑期。而大鼠模型組動(dòng)脈內(nèi)膜較完整平坦，內(nèi)皮黏附及浸潤于內(nèi)膜的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞少于豚鼠模型組，且無一例出現(xiàn)脂質(zhì)斑塊，見 Fig 1、2。

Tab 1 Changes of serum TC，LDL-C concentration in guinea pigs and rats fed with high lipid diets for 6 weeks(ˉx ± s，n=10)

Fig 1 ⅠInflammatory cell infiltration in animals fed with control and high lipid diets for 6 weeks(±s，n=10)＊＊P＜0.01 vs control.ⅡRepresentative photomicrograph of HE staining in different groups(HC×400)A:Rat control group;B:Rat model group;C:Guinea pigs control group;D:Guinea pigs model group(As shown，aortic intima-media area significantly thickened，inflamatory cells aggregated and fatty streak developed)

2.3主動(dòng)脈PCNA、CD36及VCAM-1蛋白表達(dá)變化高膽固醇飼料誘導(dǎo)6周后，豚鼠模型組主動(dòng)脈內(nèi)膜PCNA(陽性細(xì)胞的細(xì)胞核染成黃褐色)、CD36和VCAM-1(陽性細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)染成黃褐色)表達(dá)較正常對(duì)照組明顯增多(P＜0.05);而相同誘導(dǎo)周期的大鼠模型組動(dòng)脈內(nèi)膜PCNA、CD36及VCAM-1表達(dá)均未發(fā)生明顯改變，見Fig 3。

Tab 2 Changes of serum CETP，LP(a)，ox-LDL concentration and hepatic ACAT activities in guinea pigs and rats fed high lipid diets for 6 weeks(±s，n=10)

Tab 2 Changes of serum CETP，LP(a)，ox-LDL concentration and hepatic ACAT activities in guinea pigs and rats fed high lipid diets for 6 weeks(±s，n=10)

*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01 vs control

Animal Group CETP/μg·L-1 LP(a)/μg·L-1 ox-LDL/mg·L-1 ACAT/nmol·g-1·min -1 Guinea pig Control 15.64±7.27 3.01±0.47 3.29±0.85 306.40±12.36 Model 21.88±4.31* 4.02±1.25* 4.00±0.55* 345.09±18.23＊＊Rat Control 4.77±1.54 3.37±0.81 3.81±1.41 326.62±12.86 Model 4.69±2.15 2.51±0.70 4.67±1.08 322.14±12.11

Fig 2ⅠChanges of aortic intima-media area constituent ratio in animals fed on high lipid diets for six weeks(±s，n=10)*P＜0.05 vs control group.ⅡRepresentative photomicrograph of aorta from guinea pigs and rats in different groups (H﹠ E×50)，the scale bar represents 25 μm. A:Rats control group;B:Rats model group;C:Guinea pigs control group;D:Guinea pigs model group(As shown，aortic intima-media area significantly thickened)

3 討論

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)豚鼠經(jīng)高脂飼料誘導(dǎo)6周后主動(dòng)脈壁已具有早期動(dòng)脈粥樣硬化典型病理特征，而相同高脂飼料及相同誘導(dǎo)周期的大鼠，動(dòng)脈未出現(xiàn)類似病理改變。說明豚鼠在高脂飼料誘導(dǎo)下比大鼠易于形成動(dòng)脈粥樣硬化病變。

動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，其中膽固醇酯化過程是動(dòng)脈粥樣硬化產(chǎn)生的初始環(huán)節(jié)。ACAT是細(xì)胞內(nèi)唯一的催化游離膽固醇形成膽固醇酯(Cholesterolester，CE)的酶。在肝臟和小腸細(xì)胞中，ACAT還參與脂蛋白裝配［4］，對(duì)VLDL及apoB100分泌起促進(jìn)作用，可直接影響血液中膽固醇水平。在單核細(xì)胞分化成巨噬細(xì)胞后，ACAT1大量表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯的過量堆積被巨噬細(xì)胞吞噬形成泡沫細(xì)胞。因此ACAT是近年來研究降膽固醇和抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物的一個(gè)新的靶酶［5］。研究結(jié)果顯示，豚鼠模型組肝臟ACAT活性較正常組明顯升高，其膽固醇酯化能力及脂蛋白生成能力增強(qiáng)，因此表現(xiàn)出血清TC和LDL-C水平明顯上升，且升高幅度遠(yuǎn)高于大鼠，在短期內(nèi)形成了早期動(dòng)脈粥樣硬化病變，而大鼠模型組肝臟ACAT活性未見明顯變化，因此其高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化癥狀不如豚鼠模型明顯。

Fig 3 Changes of PCNA，VCAM-1 and CD36 expression in guinea pigs and rats for 6 weeks

CETP是一種疏水性糖蛋白［6］，可介導(dǎo)脂蛋白之間脂質(zhì)的交換，使 CE從 HDL向 VLDL、LDL轉(zhuǎn)運(yùn)。CETP活性增加，CE轉(zhuǎn)運(yùn)速率加快，更多富含CE的LDL和VLDL殘粒積聚于血漿，當(dāng)透過動(dòng)脈壁時(shí)，過多的LDL積聚于動(dòng)脈壁細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致CE沉積，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成［7］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，豚鼠正常組血清CETP表達(dá)水平明顯高于大鼠，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［8］，即與人的CETP表達(dá)活性相近。經(jīng)高膽固醇飼料誘導(dǎo)后，其血清CETP表達(dá)明顯高于對(duì)照組，而大鼠無明顯變化。此結(jié)果表明高脂飼料誘導(dǎo)活躍了豚鼠體內(nèi)脂質(zhì)交換，導(dǎo)致豚鼠血清出現(xiàn)大量富含CE的LDL和VLDL，這類脂蛋白極易被氧化修飾，并被巨噬細(xì)胞吞噬形成泡沫細(xì)胞，進(jìn)而在動(dòng)脈內(nèi)膜聚集形成脂紋脂斑，這是豚鼠脂代謝紊亂及動(dòng)脈粥樣硬化病變的主要機(jī)制及生物學(xué)特征。

LP(a)是一種存在于血清中的特殊脂蛋白，其中Apo(a)是LP(a)的特征性糖蛋白成分，并通過二硫鍵與中心脂質(zhì)上ApoB100相連接。研究發(fā)現(xiàn)，LP(a)水平升高可促進(jìn)其所攜帶CE被血管壁細(xì)胞攝取利用，進(jìn)而被單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞攝取，最終促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成，因此被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因子［9］。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，豚鼠脂紋脂斑的形成可能與高膽固醇飼料引起的血清LP(a)升高存在極其密切的關(guān)系。因此，兩種動(dòng)物之間血清LP(a)變化出現(xiàn)的差異性，可能是豚鼠較大鼠更易于形成早期動(dòng)脈粥樣硬化病變的另一個(gè)重要機(jī)制。

高脂血癥時(shí)血漿中急劇升高的LDL易被氧化修飾形成ox-LDL，后者不能被肝臟LDL受體攝取進(jìn)行代謝。ox-LDL可直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞引起動(dòng)脈內(nèi)皮結(jié)構(gòu)損傷和功能紊亂，另一方面通過內(nèi)皮細(xì)胞膜受體介導(dǎo)而被巨噬細(xì)胞吞噬發(fā)展形成泡沫細(xì)胞，從而引發(fā)動(dòng)脈內(nèi)膜脂紋脂斑形成［10］。

CD36是B類清道夫受體家族的成員，是巨噬細(xì)胞表面識(shí)別、吞噬ox-LDL的主要受體，CD36還可介導(dǎo)單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，促進(jìn)單核細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞遷移和聚集，在那里分化形成巨噬細(xì)胞，不斷吞噬ox-LDL的巨噬細(xì)胞形成泡沫細(xì)胞，造成脂質(zhì)在血管壁堆積，因此，CD36受體是巨噬細(xì)胞攝取ox-LDL形成泡沫細(xì)胞的關(guān)鍵［11］。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高膽固醇飼料誘導(dǎo)豚鼠6周時(shí)即可顯著升高血清ox-LDL水平，同時(shí)主動(dòng)脈內(nèi)皮CD36蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組明顯增強(qiáng)，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞大量吞噬ox-LDL，進(jìn)而形成泡沫細(xì)胞堆積在動(dòng)脈內(nèi)皮表面。而大鼠模型組ox-LDL升高不如豚鼠模型明顯，動(dòng)脈壁CD36蛋白表達(dá)未見明顯變化，因此未觀察到動(dòng)脈內(nèi)皮泡沫細(xì)胞聚集形成的脂紋脂斑。

近期已有相關(guān)研究證實(shí)［12］，發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化病變時(shí)不僅存在脂代謝紊亂，同時(shí)也存在慢性炎癥反應(yīng)過程［13］，VCAM-1主要在內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)，可選擇性促進(jìn)單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞與內(nèi)皮黏附［14］，是單核細(xì)胞向動(dòng)脈壁遷移過程中起關(guān)鍵作用的黏附分子。

本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，高脂飼料誘導(dǎo)后的豚鼠模型組動(dòng)脈壁內(nèi)皮細(xì)胞脫落，平滑肌細(xì)胞排列紊亂，內(nèi)皮細(xì)胞黏附較多的單核細(xì)胞，內(nèi)膜也有大量單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤與聚集，與正常對(duì)照組相比，差異存在顯著性。同時(shí)免疫組化研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，VCAM-1在動(dòng)脈壁病灶中大量表達(dá)，以上結(jié)果提示豚鼠早期動(dòng)脈粥樣硬化病變存在炎癥反應(yīng)過程，相比之下，大鼠模型組動(dòng)脈內(nèi)皮少見單核細(xì)胞黏附，內(nèi)膜單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤較少，同時(shí)主動(dòng)脈壁VCAM-1蛋白表達(dá)增強(qiáng)不明顯，表明其炎癥反應(yīng)不如豚鼠強(qiáng)烈，因此內(nèi)皮細(xì)胞損傷后過度釋放VCAM-1可能是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生機(jī)制之一，也是大鼠不如豚鼠易于形成早期動(dòng)脈粥樣硬化的重要原因之一。

PCNA是一種細(xì)胞核內(nèi)酸性蛋白質(zhì)，在細(xì)胞分裂時(shí)協(xié)調(diào)DNA引導(dǎo)鏈和后隨鏈的合成，對(duì)細(xì)胞分裂及增殖起重要作用。檢測血管壁PCNA的表達(dá)，能較好地反應(yīng)血管細(xì)胞的增殖活性［15］。

本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，豚鼠模型組動(dòng)脈壁PCNA陽性表達(dá)較正常組明顯升高，表明經(jīng)高脂飼料誘導(dǎo)后，豚鼠血管細(xì)胞的增殖活性明顯增強(qiáng)，中膜平滑肌細(xì)胞增生明顯，并發(fā)生向內(nèi)膜的遷移，最終導(dǎo)致內(nèi)膜-中膜增厚。大鼠模型組動(dòng)脈PCNA表達(dá)及內(nèi)膜-中膜厚度未發(fā)生明顯的改變。因此，PCNA表達(dá)的增強(qiáng)可能與豚鼠模型組內(nèi)膜-中膜增厚的病理機(jī)制有密切關(guān)系。

以上研究表明，豚鼠攝入高膽固醇飼料6周后可形成早期動(dòng)脈粥樣硬化損傷，其病理機(jī)制主要反應(yīng)在促發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化形成過程中發(fā)揮重要作用的酶、蛋白、受體、黏附分子等發(fā)生了明顯改變，是豚鼠易形成早期動(dòng)脈粥樣硬化的主要機(jī)制，也是相同誘導(dǎo)條件下大鼠不易形成動(dòng)脈粥樣硬化的主要原因。因此，豚鼠作為早期動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的使用可能具有若干優(yōu)勢，尤其是對(duì)發(fā)現(xiàn)和評(píng)價(jià)作用于ACAT、CETP、LP(a)、CD36、VCAM-1等靶點(diǎn)的新類型藥物，豚鼠可能是一種較為理想的動(dòng)物模型。

［1］Ross R.The pathogenesis of atherosclerosis:A perspective for the 1990s［J］.Nature，1993，362(6423):801-9.

［2］Lusis A J.Atherosclerosis［J］.Nature，2000，407(6801):233-41.

［3］Fernandez M L，Volek J S.Guinea pigs:a suitable animal model to study lipoprotein metabolism，atherosclerosis and inflammation［J］.Nutr Metab(Lond)，2006，3:17-22.

［4］Chang T Y，Chang C C，Lu X，Lin S.Catalysis of ACAT may be completed within the plane of the membrane:a working hypothesis［J］.J Lipid Res，2002，42(12):1933-8.

［5］Bruckert E.New advancecs in lipid-modifying therapies for reducing cardiovascular risk［J］.Cardiology，2002，97(2):59-66.

［6］駱慶峰，孫 蘭，杜冠華.膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)過程中新靶點(diǎn)及其藥物的研究進(jìn)展［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2006，22(8):904-7.

［6］Luo Q F，Sun L，Du G H.Progress in new drugs targeting reverse cholesterol transport［J］.Chin Pharmacol Bull，2006，22(8):904-7.

［7］van der Hoogt C C，de Haan W，Westerterp M，et al.Fenofibrate increases HDL-cholesterol by reducing cholesteryl ester transfer protein expression［J］.J Lipid Res，2007，48(8):1763-71.

［8］Ha Y C，Barter P J.Differences in plasma cholesteryl ester transfer protein activity in sixteen vertebrate species［J］.Comp Biochem Physiol B，1982，71(2):265-9.

［9］He J，Gu D，Reynolds K，et al.Serum total and lipoprotein cholesterol levels and awareness，treatment，and control of hypercholesterolemia in China［J］.Circulation，2004，110(4):405-11.

［10］Verhoye E，Langlois M R;Asklepios Investigators.Circulating oxidized low-density lipoprotein:a biomarker of atherosclerosis and cardiovascular risk?［J］.Clin Chem Lab Med，2009，47(2):128-37.

［11］Rahaman S O，Lennon D J，F(xiàn)ebbraio M，et al.A CD36-dependent signaling cascade is necessary for macrophage foam cell formation［J］.Cell Metab，2006，4(3):211-21.

［12］Shen C X，Chen H Z，Ge J B.The role of inflammatory stress in acute coronary syndrome［J］.Chin Med J(Engl)，2004，117(1):133-9.

［13］李 磊，戴 敏.動(dòng)脈粥樣硬化血管內(nèi)皮分泌功能失調(diào)與平滑肌細(xì)胞增殖［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2010，26(2):155-8.

［13］Li L，Dai M.The cause of atherosclerosis:secretory dysfunction in vascular endothelial cells and proliferation of smooth muscle cells［J］.Chin Pharmacol Bull，2010，26(2):155-8.

［14］Cybulsky M I，Iiyama K，Li H，et al.A major role for VCAM-1，but not ICAM-1，in early atherosclerosis［J］.J Clin Invest，2001，107(10):1255-62.

［15］黃志東，周 勇，顧承志，等.氟伐他汀對(duì)兔頸動(dòng)脈粥樣斑塊CD68和 PCNA的影響［J］.中國微循環(huán)，2008，12(1):23-5.

［15］Huang Z D，Zhou Y，Gu C Z，et al.The effects of fluvastatin on CD68 and PCNA of carotid atherosclerotic plaques in rabbits［J］.J Chin Microcircul，2008，12(1):23-5.