李 麗 羅君琴 徐建國(guó) 孫建華 柯甫志 聶振朋
(浙江省柑橘研究所 臺(tái)州黃巖 318020)
紅肉葡萄柚、黃肉葡萄柚。
莖尖微芽嫁接采用沙田柚和枳為砧木,挑選果皮完好無霉?fàn)€的果實(shí),先用自然水沖洗去果皮表面的雜質(zhì),在無菌條件下,用75%酒精擦洗作表面消毒,反復(fù)2~3次。切去果皮,取出飽滿的種子,用無菌的1mol/L的氫氧化鈉溶液浸泡10min,軟化種子表面的果膠,用清水沖洗直到果膠去除干凈。在無菌慮紙上剝除種子的內(nèi)外種皮,胚根朝下置于固體的MS培養(yǎng)基中,每試管接5~6顆種子。標(biāo)好品種和日期,置于25±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)14~20d,獲得黃化苗供嫁接用。
晴朗的上午10:00左右,于健壯無病的葡萄柚樹株上,剪取3~5cm的未自剪的春梢,置于有清水的三角瓶中封口保濕。拿回實(shí)驗(yàn)室用洗潔精清洗干凈嫩芽表面的雜質(zhì),在無菌條件下,用5%(v/v)的次氯酸鈉溶液對(duì)嫩芽作表面消毒8min。切去砧木頂端和部分根端,留莖長(zhǎng)2cm左右,然后用刀片在離砧木上切口0.5cm處切出三角形創(chuàng)口,在體視顯微鏡下用嫁接刀尖剝?nèi)”A羯L(zhǎng)錐及2~3個(gè)葉原基的莖尖,快速將其放到砧木的三角形切口中,用刀背按壓使莖尖與砧木的橫切口完全接合。嫁接好的試管苗置入濾紙橋支撐的MT液體培養(yǎng)基中進(jìn)行光培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為25±1℃,光照為1500~2000Lx,培養(yǎng)時(shí)間為12h/d。
嫁接后7~10d,砧木陸續(xù)萌蘗,生長(zhǎng)迅速與接穗競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng),如不及時(shí)除萌,會(huì)嚴(yán)重影響接穗正常生長(zhǎng),當(dāng)萌蘗長(zhǎng)到2cm以上時(shí),接穗因得不到足夠的營(yíng)養(yǎng)而褐化死亡現(xiàn)象明顯增多。一般經(jīng)過2~3次除萌,莖尖與砧木接口愈合充分的接穗開始生長(zhǎng),此時(shí)萌蘗不再發(fā)生。
莖尖嫁接萌動(dòng)開始后約21d左右,待接穗長(zhǎng)出4~5片葉后,便移栽到網(wǎng)室大棚中。首先將待移栽的嫁接苗在實(shí)驗(yàn)室的自然散射光下煉苗3~5d。在此間準(zhǔn)備好培養(yǎng)土,成分為2/3珍珠巖+1/3東北泥炭,經(jīng)高壓滅菌后備用。移栽時(shí)將嫁接苗從試管中取出,洗凈根部的培養(yǎng)液,移入無菌的培養(yǎng)土中。用1/2MT營(yíng)養(yǎng)液+800倍多菌靈混合液澆透定根。再將培養(yǎng)缽移入裝有霧噴設(shè)施的防蟲網(wǎng)室中進(jìn)行隔離養(yǎng)護(hù),保持網(wǎng)室80%~90%的濕度。移栽后每隔7d澆一次1/2MT營(yíng)養(yǎng)液+800倍多菌靈混合液,14d左右待嫁接苗新根長(zhǎng)出,移栽成活,便開始新葉生長(zhǎng),看護(hù)培養(yǎng)得當(dāng),嫁接苗生長(zhǎng)迅速,21d左右接穗即可長(zhǎng)到5cm以上。
葡萄柚不同品系與砧木組合嫁接成活率差異較大。紅肉葡萄柚和黃肉葡萄柚莖尖微芽嫁接成活率品系間的無明顯差異,不同砧木間則表現(xiàn)出明顯的差異性。采用沙田柚為砧木,兩品系的葡萄柚嫁接成活率最高,都達(dá)70.0%左右,黃肉系相對(duì)較高達(dá)70.6%;而枳為砧木,紅肉葡萄柚和黃肉葡萄柚的嫁接成活率明顯較低,前者為15.0%,后者為11.8%(見表1)。其原因可能是葡萄柚與柚類嫁接親和性較好。
表1 不同砧木對(duì)葡萄柚莖尖微芽嫁接成活率的影響
研究表明,在田間常規(guī)條件下,枳是中國(guó)目前應(yīng)用最多、最廣的柑橘砧木,對(duì)多數(shù)柑橘品種親和力強(qiáng),成活率高。枳是溫州蜜柑、椪柑、金柑、甌柑等常規(guī)半矮化砧;枳砧梁平柚、五步柚、晚白柚等,表現(xiàn)親和性好,矮化,生長(zhǎng)正常,早結(jié)豐產(chǎn);但它對(duì)本地早、柳橙、蕉柑、萊姆、湯姆森臍橙、麻豆文旦、八朔蜜柑、尤力克檸檬、馬敘無核葡萄柚、鄧肯葡萄柚等則不親和。
利用組織培養(yǎng),試管微環(huán)境條件下,進(jìn)行兩種葡萄柚與砧木組合的莖尖嫁接試驗(yàn),結(jié)果表明,試管微環(huán)境下,枳對(duì)葡萄柚也表現(xiàn)出親和性差,這與田間條件下的表現(xiàn)一致。而以沙田柚為砧木的嫁接親和性較佳。