鄭 彥，王海龍，杜偉平

（1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科，陜西延安716000；2.赤峰市第二人民醫(yī)院檢驗科，內(nèi)蒙古赤峰024000）

溶血葡萄球菌臨床分布特點及藥敏分析

鄭 彥1，王海龍2，杜偉平1

（1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科，陜西延安716000；2.赤峰市第二人民醫(yī)院檢驗科，內(nèi)蒙古赤峰024000）

目的目的為臨床合理用藥提供實驗室依據(jù)。方法對臨床所送的合格標(biāo)本按照《全國檢驗技術(shù)操作規(guī)程》的要求接種、分離、培養(yǎng)，用MicroScan Walkaway40型全自動細菌分析系統(tǒng)、手工生化和K－B紙片法進行鑒定和藥敏試驗。藥敏結(jié)果依據(jù)NCCIS標(biāo)準(zhǔn)判定，將藥敏結(jié)果進行統(tǒng)計分析。結(jié)果共獲得221例葡萄球菌陽性病例，溶血葡萄球菌33株（14.93%）；兒科21例（63. 64%），骨科3例（9.09%），ICU病房2例（6.06%）；33株SHA中血標(biāo)本21例（63.64%）；SHA中產(chǎn)β－內(nèi)酰胺酶30株（90.91%），對苯唑青霉素耐藥30株；對萬古霉素完全敏感100%；SHA株中對β－內(nèi)酰胺類、頭孢菌素類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類和四環(huán)素類抗生素均耐藥有7株（23.33%）。結(jié)論SHA感染主要分布在兒科，容易引起兒科患者血液感染；SHA產(chǎn)酶率高，有效藥物仍以萬古霉素為主；SHA存在多重耐藥性，需加強溶血葡萄球菌的臨床監(jiān)測，避免交叉感染和耐藥率的升高，根據(jù)藥敏結(jié)果合理選擇抗生素，均應(yīng)引起臨床醫(yī)護人員的重視。

溶血葡萄球菌；院內(nèi)感染；藥敏試驗

葡萄球菌屬廣泛分布于自然界，長期以來關(guān)注較多的是凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌，但是近年來由于抗生素的不合理應(yīng)用及葡萄球菌本身耐藥性和致病性的變遷，凝固酶陰性的葡萄球菌所致的感染呈上升趨勢，特別是免疫力低下患者［1］，兒科、ICU病房、老年病科和一些侵入性操作［2］。溶血葡萄球菌（SHA）是凝固酶陰性的葡萄球菌中的重要一種，分析SHA耐藥性對控制凝固酶陰性葡萄球菌感染具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源延安大學(xué)附屬醫(yī)院2009－01～2009－12住院病人標(biāo)本，1個病人多次分離的重復(fù)菌株選取耐藥最強的1株。

1.1.2 質(zhì)控菌株ATCC25923，ATCC29213由衛(wèi)生部臨檢中心提供。

1.1.3 試劑微量生化反應(yīng)管（杭州天和微生物試劑有限公司）、3%過氧化氫溶液（自制）、藥敏紙片（杭州天和微生物試劑有限公司）、哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基（上海锃嘉微生物工程有限公司）、營養(yǎng)瓊脂（上海锃嘉微生物工程有限公司）。1.1.4儀器德靈MicroScanWalkaway40型全自動細菌鑒定儀（西門子公司）、BACT／ALERT 3D血培養(yǎng)儀（法國梅里埃）、Heraeus BB16／BB5060 CO2培養(yǎng)箱（海爾）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本接種、菌株分離培養(yǎng)將送檢標(biāo)本按四分區(qū)法接種于血、營養(yǎng)及巧克力等瓊脂培養(yǎng)基，37℃，18h。

1.2.2 菌株鑒定采用鏡檢，全自動細菌鑒定儀Walkaway40，并結(jié)合微量生化反應(yīng)對所分離的菌株進行鑒定。①菌落特征：光滑奶酪狀，不透明，無色素或奶油色、黃色。②革蘭染色鏡檢：革蘭陽性球菌，成葡萄串狀排列，疑似葡萄球菌。③觸酶反應(yīng)：陽性；凝固酶反應(yīng)：陰性。④配制0.5麥?zhǔn)蠞舛鹊木鷳乙?，使用全自動細菌鑒定儀Walkaway40進行菌株鑒定。⑤微量生化反應(yīng)：吡咯烷酮芳基酰胺酶：陽性；鳥氨酸脫羧酶：陰性；尿酶：陰性；β－半乳糖苷酶：陰性。

1.2.3 藥敏試驗采用全自動細菌鑒定儀Walkaway40和KB法進行藥敏驗。判斷按照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會規(guī)則判定。

1.2.4 β－內(nèi)酰胺酶試驗頭孢硝基噻吩：由黃色變?yōu)榧t色為陽性。

1.2.5 統(tǒng)計方法結(jié)果采用構(gòu)成比和率進行分析。

2 結(jié)果

從臨床標(biāo)本中共分離出221株葡萄球菌，其中，溶血性葡萄球菌33株，占葡萄球感染病例的14.93%。具體分布見表1～表5。

表1 33株溶血葡萄球菌科室分布情況

表2 33株溶血葡萄球菌標(biāo)本類型構(gòu)成比

表3 溶血葡萄球菌標(biāo)本耐藥狀況

表4 溶血葡萄球菌多重耐藥性分布

3 討論

人類凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）感染中以表皮葡萄球菌最為多見，溶血葡萄球菌（SHA）為第二種常見者［3］。近年來，隨著廣譜抗生素，激素、免疫抑制劑、各種創(chuàng)傷檢查及介入性診療技術(shù)的廣泛應(yīng)用，SHA引起的感染日趨增多，已成為具有重要臨床意義的醫(yī)院感染病原菌，可引起血液、泌尿生殖道和創(chuàng)傷等多部位感染。

本實驗33株SHA主要分布在兒科占63.64%，因為新生兒免疫力低下，自身的免疫功能不完善，因此應(yīng)對產(chǎn)房進行嚴格消毒，嚴格規(guī)范醫(yī)護人員的操作以減少新生兒的感染率。我院所分離的SHA主要為血標(biāo)本占63.64%，與有關(guān)文獻報道的泌尿生殖系統(tǒng)標(biāo)本中分離率高［4］不相符，這可能與我院送檢的成人標(biāo)本量少有關(guān)。SHA感染的有效治療藥物為萬古霉素，呋喃妥因、辛內(nèi)吉、利福平。

同時產(chǎn)β－內(nèi)酰胺酶的細菌多重耐藥現(xiàn)象。應(yīng)引起醫(yī)護人員的重視。當(dāng)發(fā)現(xiàn)SHA菌感染患者時，宜采取適當(dāng)措施進行防治，及時做病原學(xué)及藥敏檢測，合理使用抗生素。

近年來由于抗生素的不合理應(yīng)用導(dǎo)致細菌的耐藥率上升，不規(guī)范的用藥和治療途徑既能造成細菌耐藥，又能使細菌乘機而入，導(dǎo)致嚴重的院內(nèi)感染。本實驗藥敏結(jié)果顯示，33株SHA對常用抗菌藥物呈多重耐藥性，尤其是對β－內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類、氨基糖苷類、碳青霉烯類和林可霉素類抗菌藥物呈高度耐藥，均大于75%。與有關(guān)文獻［6］研究的耐藥性相比，存在一定差異。這可能與SHA攜帶多種耐藥基因，可同時對多種抗菌藥物耐藥。并可滅活氨基糖苷類藥物造成多重耐藥。我們建議對兒科病區(qū)的醫(yī)護人員，做好防護措施，病人要及時隔離，病人所在環(huán)境要預(yù)防性的消毒，防止細菌播散造成大范圍院內(nèi)感染，臨床實驗室需加大力度進行SHA的藥敏檢測，為臨床治療提供可靠的理論依據(jù)。

［1］李琳，錢小毛.新生兒溶血葡萄球菌敗血癥臨床表現(xiàn)及其耐藥性分析［J］.兒科藥學(xué)雜志，2005，11（6）：27－32.

［2］鄧健康，郭曉蘭，蘇忠龍，等.耐甲氧西林溶血葡萄球菌耐藥性檢測［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2007，28（9）：793－794.

［3］倪語星.臨床微生物學(xué)與檢驗［M］.第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社.2007：77－80.

［4］李希濤，趙霞，張靜.耐甲氧西林溶血葡萄球菌臨床分布及耐藥性分析［J］.中國實驗診斷學(xué)，2009，13（6）：837－838.

［5］呂火祥，沈蓓瓊，潘立勇，等.1997—2001年耐甲氧西林葡萄球菌臨床分離率及耐藥性分析［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2O04，19（3）：220.

［6］俞關(guān)紅，陳亞崗，俞云松，等.溶血葡萄球菌對抗菌藥物的敏感性和mecA基因的檢測［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2004，19（2）：115－118.

［7］吳偉元，潘小梅，吳勁松，等.溶血葡萄球菌慶大霉素耐藥表型與基因型分析［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2008，23（4）：401.

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1672－2639（2011）02－0053－02

2011－04－26；責(zé)任編輯 徐文梅］