王玉祥,譚錫國(guó),金德平,楊開(kāi)梅

(永勝縣畜牧局畜牧站,云南 永勝 674200)

為了更好地推廣、普及豬人工授精工作,延長(zhǎng)稀釋精液的保存時(shí)間,2010年 5～9月,筆者選擇了 3種稀釋液配方和2種保存溫度進(jìn)行豬精液稀釋、保存的試驗(yàn),以供當(dāng)?shù)厣a(chǎn)使用,現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下:

1 材料和方法

1.1 材料

(1)供試精液:取自永勝縣生豬標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)核心群種豬場(chǎng)、三川鎮(zhèn)希望生態(tài)養(yǎng)殖場(chǎng)、三川鎮(zhèn)興旺養(yǎng)殖場(chǎng)、永勝縣豬統(tǒng)一供精站(南片)的長(zhǎng)白、大約克、杜洛克種公豬。供精豬年齡為 1.5～4.0歲,體質(zhì)健壯而健康,飼養(yǎng)管理相近,供試鮮精液的活力≥0.8。

(2)稀釋液配方:見(jiàn)表 1。

表 1 豬精液稀釋液配方

1.2 方法

(1)稀釋液配制:稀釋液使用前 1 h,用電子秤按500mL蒸餾水劑量分別稱量Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ配方中的藥品(青、鏈霉素除外)進(jìn)行配制。配制好的稀釋液分別貼上Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標(biāo)簽后置于高壓滅菌器中進(jìn)行15 Ib 30min消毒,消毒結(jié)束后取出,冷卻后加入定量的青、鏈霉素備用(Ⅲ配方除外)。

(2)精液的采樣:從上述豬場(chǎng)(供精站點(diǎn))中隨機(jī)抽取種公豬進(jìn)行采精。

(3)精液的稀釋:將采集后的同一公豬精液均勻分成 3份,分別用 3種配方稀釋液按 1∶1比例及時(shí)進(jìn)行稀釋(一般不超過(guò) 30m in),稀釋前后精子活力與原精液無(wú)顯著差異者作保存試驗(yàn)。

采精和精液稀釋嚴(yán)格按豬人工授精相關(guān)操作技術(shù)規(guī)程進(jìn)行。

(4)稀釋精液保存:將按各個(gè)配方稀釋后的精液用一次性精液分裝瓶分裝,靜置 2 h后,分別同時(shí)置于常溫(15～28℃)和 17℃恒溫箱中保存。保存中的稀釋精液每間隔12 h輕輕搖動(dòng)并倒置1次。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目

(1)精子活力:在 100～200倍鏡下觀察精液中呈直線運(yùn)動(dòng)精子所占的百分比,按 0.1～1.0的十級(jí)評(píng)分法測(cè)定?；盍γ块g隔 12 h測(cè)定 1次,測(cè)定時(shí)需將精液樣片置于 37℃的恒溫板上。

(2)精子的存活時(shí)間:包括精子達(dá) 0.5級(jí)活力的存活時(shí)間和最大存活時(shí)間(直至無(wú)活動(dòng)精子為止)。每間隔 12 h觀察 1次。

(3)稀釋液 pH值:用 pH比色試紙進(jìn)行測(cè)定。

(4)每天作好鏡檢活力、存活時(shí)間、室溫等詳細(xì)記錄。

1.4 試驗(yàn)處理

本試驗(yàn)按如下處理進(jìn)行 8次重復(fù)稀釋、保存試驗(yàn)。

表 2 各處理保存溫度

2 結(jié)果與分析

2.1 稀釋液 pH值 見(jiàn)表 3。

表 3 稀釋液pH值

2.2 存活時(shí)間

將 8次重復(fù)稀釋、保存試驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)整理后,去掉數(shù)值最大和最小 2次試驗(yàn)數(shù)據(jù),將其余試驗(yàn)數(shù)據(jù)整理后進(jìn)行方差分析,并用SSR(新復(fù)極差)法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。經(jīng)檢驗(yàn),T2與 T1間差異極顯著,B2與 B1間差異極顯著,B2與B3間差異顯著,B1與 B3間差異不顯著(見(jiàn)表 4)。

(1)稀釋保存效果:見(jiàn)表 4、4-1～4-4。

表 4 稀釋保存效果 h

(2)0.5級(jí)活力存活時(shí)間平均數(shù)比較:見(jiàn)表 4-1、4-2。

表 4-1 保存溫度(T)間平均數(shù)比較 h

表 4-2 配方(B)間平均數(shù)比較 h

(3)最大存活時(shí)間平均數(shù)比較:見(jiàn)表 4-3、4-4。

表 4-3 保存溫度(T)間平均數(shù)比較 h

表 4-4 配方(B)間平均數(shù)比較 h

3 結(jié)論

(1)在所選的3種稀釋液配方中,Ⅱ(B2)配方的稀釋液效果最好;保存溫度以 17℃保存的效果顯著優(yōu)于常溫保存。

(2)Ⅲ(B3)配方系市場(chǎng)上出售的稀釋粉成品,雖然取用方便,但成本較高(一般售價(jià)在 10元以上),而且每袋開(kāi)啟后需一次性用完,不適于一般的小規(guī)模供精站(點(diǎn))。

(3)試驗(yàn)結(jié)果表明:在整個(gè)試驗(yàn)處理組中,T2B2的效果最好,即采用Ⅱ(B2)配方稀釋后置于 17℃中保存的稀釋精液精子存活時(shí)間最長(zhǎng),保存 3～4 d仍然可以用于輸精,而且費(fèi)用低廉,比較適合于一般規(guī)模的人工供精站(點(diǎn))使用。