鄧永強(qiáng),陳 斌,秦學(xué)遠(yuǎn),裴超信,邢 坤,張 東
(四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,四川 成都 610041)
豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS,又稱豬藍(lán)耳?。┦怯韶i繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的一種豬高度接觸性傳染病。目前防治該病的主要措施是疫苗接種預(yù)防。在我國(guó)大部分地區(qū),主要用高致病性豬藍(lán)耳病滅活疫苗進(jìn)行接種預(yù)防。為了更好地防控高致病性豬藍(lán)耳病,國(guó)家已批準(zhǔn)生產(chǎn)高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗,為了解該疫苗的臨床應(yīng)用效果,我們開(kāi)展了疫苗安全性試驗(yàn)和免疫效力試驗(yàn)。
1.1 材料
1.1.1 試驗(yàn)豬 選定規(guī)模豬場(chǎng)同批3~4周齡的豬只55頭。其中用作效力試驗(yàn)40頭,用作安全性試驗(yàn)15頭。試驗(yàn)前均用法國(guó)LSI-PRRS ELISA試劑盒檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體,結(jié)果都呈陰性。
1.1.2 試驗(yàn)疫苗 高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(JXA1-R 株),批號(hào):0907006。
1.1.3 檢測(cè)試劑盒 法國(guó)LSI-PRRS ELISA試劑盒,批號(hào):201001。
1.2 方法
1.2.1 安全性試驗(yàn) 選擇15頭豬,隨機(jī)分為3組,每組5頭,3組分別注射1頭份劑量、10頭份劑量和20頭份劑量。免疫后觀察并記錄副反應(yīng)(包括體溫、采食情況、腹瀉、異常死亡等情況)。體溫以肛溫超過(guò)40℃為發(fā)燒。
1.2.2 效力試驗(yàn) 隨機(jī)選擇40頭豬,按疫苗使用說(shuō)明書(shū)1頭份用量,在耳根后部肌肉注射。
1.2.3 血樣采集 免疫前 0d,免疫后 14、28、56d采集血樣。采集的血樣及時(shí)分離出血清,冷凍保存,4次采血完成后統(tǒng)一測(cè)抗體。
1.2.4 檢測(cè)方法 用法國(guó)LSI-PRRS ELISA試劑盒,按使用說(shuō)明檢測(cè)繁殖與呼吸綜合征病毒抗體。
2.1 安全性臨床觀察結(jié)果 詳見(jiàn)表1。免疫劑量為1頭份的豬群,1頭試驗(yàn)豬在免疫后48h死亡,其余未出現(xiàn)豬只死亡。免疫1頭份注射劑量有1頭發(fā)燒;免疫10頭份劑量有3頭發(fā)燒,1頭腹瀉,1頭食欲減退;免疫20頭份劑量有3頭發(fā)燒,2頭減食,1頭腹瀉。經(jīng)常規(guī)藥物治療后,都恢復(fù)正常。
表1 高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗免疫后的副反應(yīng)情況 頭
2.2 免疫效力試驗(yàn)結(jié)果 免疫后14d,抗體陽(yáng)性30頭,陽(yáng)性率75%;免疫后28d,抗體陽(yáng)性37頭,陽(yáng)性率93%;免疫后42 d,抗體陽(yáng)性40頭,陽(yáng)性率100%;免疫后56 d,抗體陽(yáng)性40頭,陽(yáng)性率100%。具體結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗免疫后不同時(shí)間的抗體水平
安全性試驗(yàn)免疫劑量為1頭份的組,有1頭試驗(yàn)豬在免疫后48h死亡,通過(guò)我們對(duì)病死豬的診斷,死亡原因是由于體弱并感染沙門(mén)氏菌引起的,與疫苗副反應(yīng)關(guān)系不大。從免疫接種后的臨床副反應(yīng)來(lái)看,主要是加倍劑量注射的部分豬只出現(xiàn)發(fā)燒、腹瀉、減食、精神欠佳等情況,經(jīng)常規(guī)藥物治療,基本恢復(fù)正常,說(shuō)明該疫苗的免疫副反應(yīng)在可控制范圍之內(nèi)。而在常規(guī)使用劑量之下,該疫苗的免疫副反應(yīng)較小。疫苗免疫后14d,抗體陽(yáng)性率達(dá)到75%;28d后,抗體陽(yáng)性率達(dá)到93%;42d抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%,說(shuō)明該苗免疫產(chǎn)生的抗體效果確實(shí),抗體陽(yáng)性率較高。
由于該疫苗是活疫苗,還需要進(jìn)一步研究病毒在體內(nèi)的存活及排毒情況,可以考慮在高致病性豬藍(lán)耳病陽(yáng)性場(chǎng)采用熒光定量PCR進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。該疫苗產(chǎn)生抗體較快,并能在一定時(shí)間內(nèi)維持較高水平的抗體,建議可在疑似發(fā)生高致病性豬藍(lán)耳病的豬場(chǎng),采取緊急免疫該苗的方法,控制疫情擴(kuò)散。
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