滑 靜，何 欣，楊佐君，張淑萍，顧 東

（1.北京農(nóng)學(xué)院，北京 102206；2.北京中棉紫光生物科技有限公司，北京 100044）

出于環(huán)保和食品安全考慮，抗生素已被一些國家禁止作為添加劑使用，因此，安全的生理性調(diào)節(jié)劑成為研究熱點。功能性寡糖作為一種新型生理活性物質(zhì)，受到了世界各國學(xué)術(shù)界和企業(yè)界的重視。大量試驗顯示，低聚糖促進有益菌群的繁殖，通過發(fā)酵產(chǎn)生醋酸和乳酸，使腸道內(nèi)pH下降，抑制大腸桿菌和沙門氏菌等有害菌的生長和繁殖。寡糖和病原菌在腸壁上的受體具有類似結(jié)構(gòu)，可競爭性地與病原菌結(jié)合，使病原菌饑餓死亡，失去致病能力。目前在寡糖研究和生產(chǎn)的積極倡導(dǎo)國日本，食品和飼料中使用寡糖已成為常規(guī)，歐美國家用量也不斷上升[1]。棉籽低聚糖是一類功能性聚合糖，主要成分為棉籽糖、水蘇糖、二糖、多糖及少量蛋白質(zhì)，其中含量最多的為棉籽糖[2]。本試驗主要研究日糧中添加不同劑量的棉籽低聚糖對肉仔雞生產(chǎn)性能、血液生理生化指標(biāo)及腸道主要菌群的影響，為推廣棉籽低聚糖在畜禽飼料中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選擇健康的1日齡艾維茵商品肉仔雞360只，隨機分為6個處理，每個處理6個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞。設(shè)對照組和試驗組，試驗組在基礎(chǔ)日糧中分別添加棉籽低聚糖0.05%、0.1%、0.2%、0.3%和氟哌酸0.01%，各組之間初始體重?zé)o顯著差異（P＞0.05）。試驗期為1～42 d。試驗用雞和飼料均購自北京華都肉雞有限責(zé)任公司。

1.2 試驗材料

棉籽低聚糖（棉籽糖含量＞35%）由北京中棉紫光生物科技有限公司生產(chǎn)并提供。

1.3 試驗日糧及飼養(yǎng)管理

試驗在北京農(nóng)學(xué)院試驗?zāi)翀鲞M行，飼養(yǎng)管理按常規(guī)進行，自由飲食和飲水?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 試驗方法

1.4.1 盲腸內(nèi)容物大腸桿菌和沙門氏菌的測定

于試驗23 d，每組隨機抽取12只雞（每個重復(fù)2只），稱重后頸部放血，立即取出左側(cè)盲腸，在超凈工作臺中取1 g內(nèi)容物，溶解于無菌生理鹽水99mL中，1 000 rpm離心10min，取上清液連續(xù)進行 10 倍稀釋。取 10－3、10－4、10－5稀釋度的菌液各0.3mL接種于大腸桿菌和沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基中，分別進行培養(yǎng)和計數(shù)。于試驗42 d，每組隨機抽取5只雞，用大腸桿菌C83868，O78進行攻毒試驗（大腸桿菌購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所），于試驗46 d取盲腸內(nèi)容物進行測定，操作同上。

表1 基礎(chǔ)日糧及營養(yǎng)水平

1.4.2 血液生化指標(biāo)測定

于試驗23、42 d，每組隨機抽取12只雞（每個重復(fù)2只），稱重后頸部放血，制備血清樣品，測定血清中總蛋白含量、堿性磷酸酶活性和甲狀腺激素T4的含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel軟件進行處理，并進行T檢驗，結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 試驗結(jié)果

2.1 棉籽低聚糖對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響

棉籽低聚糖對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響見表2。

表2 棉籽低聚糖對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響g

由表2可見，日糧中添加棉籽低聚糖和抗生素0.1%可極顯著提高肉仔雞42日齡增重（P＜0.01），添加棉籽低聚糖0.3%可極顯著提高肉仔雞21、42日齡增重（P＜0.01）。棉籽低聚糖可降低肉仔雞的料肉比，但是差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 棉籽低聚糖對肉仔雞血液生化指標(biāo)的影響

棉籽低聚糖對肉仔雞血液生化指標(biāo)的影響見表3、4。

表3 棉籽低聚糖對23日齡肉仔雞血液生化指標(biāo)的影響

表4 棉籽低聚糖對42日齡肉仔雞血液生化指標(biāo)的影響

由表3、4可見，添加不同水平的棉籽低聚糖均可顯著提高肉仔雞23日齡甲狀腺激素水平（P＜0.05）。添加棉籽多聚糖0.3%可顯著提高42日齡肉仔雞血清堿性磷酸酶活性和甲狀腺激素水平（P＜0.05）。添加棉籽低聚糖0.1%、0.2%、0.3%可顯著提高肉仔雞42日齡血清總蛋白含量（P＜0.05）。

2.3 棉籽低聚糖對肉仔雞盲腸內(nèi)容物大腸桿菌、沙門氏菌濃度的影響

棉籽低聚糖對肉仔雞盲腸內(nèi)容物大腸桿菌、沙門氏菌濃度的影響見表5、6。

表5 棉籽低聚糖對肉仔雞盲腸內(nèi)容物大腸桿菌的影響log10 cfu·g-1

表6 棉籽低聚糖對肉仔雞盲腸內(nèi)容物沙門氏菌的影響log10 cfu·g-1

由表5可見，不同添加劑量的棉籽低聚糖均可顯著抑制23 d肉仔雞盲腸內(nèi)大腸桿菌的繁殖（P＜0.05）。用大腸桿菌攻毒后（46 d），添加棉籽低聚糖0.3%可顯著抑制盲腸內(nèi)大腸桿菌的繁殖（P＜0.05）。而添加抗生素的處理組盲腸內(nèi)大腸桿菌的繁殖與對照組相比沒有顯著變化（P＞0.05）。

由表6可見，日糧中添加棉籽低聚糖0.3%可顯著抑制23日齡肉仔雞盲腸內(nèi)沙門氏菌的繁殖（P＜0.05）。

3 討論

低聚糖是一類非消化性寡糖，不能被動物體內(nèi)分泌的消化酶分解，只能以未降解形式進入后段腸道被有益菌如乳酸桿菌、雙歧桿菌等分解利用，使腸道有益菌得到大量繁殖，成為腸道優(yōu)勢菌群，其能分泌一種糖蛋白與低聚糖結(jié)合，而大腸桿菌、沙門氏菌等不能利用低聚糖[3－4]。低聚木糖的糖苷鍵很難被動物的消化酶所分解，可直接到達小腸后段發(fā)揮作用，且具有獨特的酸和熱穩(wěn)定性。許多研究表明，低聚木糖具有促進有益菌增殖、改善腸道菌群和提高免疫力等生理功能，從而改善動物的健康水平[5－6]。另外，低聚糖在腸道內(nèi)占據(jù)腸黏膜表面的定植位點，形成生物學(xué)屏障，阻止病原菌的定植和侵入。殼聚糖能改善動物品質(zhì)，在腸內(nèi)被雙歧桿菌利用，改善內(nèi)環(huán)境，起到整腸的作用[7]。劉梅等對多組肉仔雞進行了梯度殼聚糖的添加喂養(yǎng)，經(jīng)42 d飼養(yǎng)，研究其對肉仔雞生長性能及免疫器官指數(shù)的影響，結(jié)果表明，100mg·kg－1殼聚糖處理組與對照組比，顯著提高肉仔雞平均日增重并降低了料肉比（P＜0.05），殼聚糖對肉雞的免疫功能有所提高[8]。王秀武等報道，日糧中添加殼聚糖0.1%對肉仔雞盲腸大腸桿菌有抑制作用[9]。本試驗結(jié)果也顯示，棉籽低聚糖可顯著抑制肉仔雞盲腸內(nèi)大腸桿菌和沙門氏菌的繁殖。

低聚糖可通過調(diào)整腸道微生態(tài)平衡，大量增殖雙歧桿菌、乳酸菌等有益菌。雙歧桿菌可提供B族維生素、氨基酸等被動物小腸吸收利用，能增強動物體內(nèi)消化酶的活力，提高動物對蛋白質(zhì)的消化吸收能力，促進腸道運動，增強消化機能，提高血液的激素水平，促進機體的合成代謝，提高動物的生長性能[10]。劉進國等報道，在日糧中添加低聚異麥芽糖1 g·kg－1能顯著提高肉鴨的日增重（P＜0.05）[11]。高英等發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)日糧中添加大豆寡糖0.3%可提高肉仔雞的生產(chǎn)性能，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率，改善肉仔雞幼齡時的腸道微生態(tài)環(huán)境[12]。本試驗結(jié)果也顯示，添加棉籽低聚糖0.3%可極顯著提高肉仔雞21、42日齡增重（P＜0.01），添加棉籽低聚糖0.1%和抗生素可極顯著提高肉仔雞42日齡增重（P＜0.01）。

甲狀腺激素是調(diào)節(jié)機體生長發(fā)育和成熟的重要激素，可促進細胞分化和組織器官發(fā)育，使軟骨骨化，促進骨骼生長，促進蛋白質(zhì)的合成代謝。堿性磷酸酶廣泛存在于動物體內(nèi)，尤以骨骼肌、肝臟、腸黏膜含量最高，血清中的堿性磷酸酶即來源于上述組織。在骨骼中的堿性磷酸酶主要存在于成骨細胞中，催化磷酸酯的水解，產(chǎn)生無機磷，最終和鈣結(jié)合，沉積在骨化部位。有研究報道，日糧中添加低聚異麥芽糖可促進雞采食，還可提高黃羽肉雞的生產(chǎn)性能和成活率。本試驗結(jié)果顯示添加棉籽低聚糖可通過提高血清甲狀腺激素水平，進而提高動物的蛋白代謝水平，使血清總蛋白含量升高，刺激軟骨骨化，使血清堿性磷酸酶活性升高。

4 結(jié)論

目前，功能性寡糖無論在食品、醫(yī)藥還是飼料添加劑方面，都得到了較為廣泛的應(yīng)用。但是，要真正闡明功能性寡糖的作用機制，還有待進一步研究。本試驗結(jié)果表明，日糧中添加棉籽低聚糖0.1%～0.3%可通過改善腸道菌群數(shù)量，顯著提高肉仔雞的生產(chǎn)性能，促進蛋白質(zhì)代謝和骨骼生長，且以0.3%的添加劑量為最佳。

[1]王新衛(wèi),王艷,肖傳斌.功能性低聚糖對家禽免疫的影響[J].畜牧與獸醫(yī),2008,40（12）:90－92.

[2]楊壽清.天然功能活性因子——棉籽糖[J].冷飲與速凍食品工業(yè),2002,8（3）:42－44.

[3]羅佳捷.大豆低聚糖對櫻桃谷鴨腸道微生物群落結(jié)構(gòu)影響的動態(tài)性研究[D].長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.

[4]肖宇,林英庭.低聚木糖在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].飼料博覽,2010（11）:8－10.

[5]王繼成,潘靈輝,李淑云,等.低聚木糖對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道菌群及免疫水平影響的研究[J].中國畜牧獸醫(yī),2006,33（5）:3－7.

[6]楊海英,楊在賓,楊維仁,等.益生素和低聚木糖對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和腸道形態(tài)學(xué)影響研究[J].中國糧油學(xué)報,2008,23（1）:116－120.

[7]逯慎杰,劉秀河.殼聚糖作為綠色飼料添加劑的應(yīng)用[J].飼料博覽,2010（7）:21－22.

[8]劉梅.殼聚糖對肉仔雞生長性能和免疫器官指數(shù)的影響[J].棗莊學(xué)院學(xué)報,2010,27（2）:118－120.

[9]王秀武,杜昱光,白雪芳,等.殼寡糖對肉仔雞腸道主要菌群、小腸微絨毛密度、免疫功能及生產(chǎn)性能的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2003,15（4）:32－35.

[10]劉寶德,沙萬里,胡先林,等.大豆黃酮與低聚木糖對蛋用雛雞生長性能及免疫器官指數(shù)的影響[J].當(dāng)代畜牧,2009（1）:22－25.

[11]劉進國,孫亞麗.抗生素替代品——低聚異麥芽糖在肉鴨日齡中的應(yīng)用[J].飼料廣角,2004（9）:38－40.

[12]高英,單安山.大豆低聚糖及其在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].飼料工業(yè),2003,24（5）:24－26.