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        宮頸癌患者人乳頭瘤病毒基因檢測分型研究

        2011-04-26 08:38:40邱小華
        中國全科醫(yī)學(xué) 2011年21期
        關(guān)鍵詞:危型乳頭感染率

        邱小華,劉 偉

        人乳頭瘤病毒 (human papillomavirus,HPV)是一種嗜上皮性病毒,在人和動物中分布廣泛,有高度的特異性。HPV感染與宮頸癌的關(guān)系最初在19世紀(jì) 70年代提出,此后許多流行病學(xué)和分子生物學(xué)研究均毫無疑問地證實(shí)了 HPV與宮頸癌的病因?qū)W聯(lián)系。但宮頸癌與 HPV基因型分布的地區(qū)差異性的關(guān)系尚待進(jìn)一步探討。本研究應(yīng)用基因芯片方法對 125例宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行了 23種 HPV基因分型檢測,并探討HPV基因型與宮頸癌類型的關(guān)系,以進(jìn)一步了解宮頸癌患者中 HPV感染的基因分布情況與地區(qū)關(guān)系,為宮頸癌的預(yù)防、高危人群的篩查和特異性疫苗的研制提供一定的試驗(yàn)依據(jù)。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 標(biāo)本取自 2006年 1月—2008年 6月來我院婦科住院就診的 125例宮頸癌病例。其中經(jīng)病理診斷鱗癌患者93例,腺癌患者 28例,鱗腺癌患者2例。

        1.2 試劑與儀器 HPV基因分型檢測試劑盒由深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供;采用 Line-geme-fqd-33A PCR擴(kuò)增儀。

        1.3 采樣 以專用的宮頸脫落細(xì)胞采集器進(jìn)行采樣,樣本收集后立即送檢待檢測。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS 10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析,計數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn),以p<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 宮頸癌患者 HPV感染率及主要基因型分布 125例宮頸癌患者標(biāo)本中檢測出 116例 HPV感染,陽性率為 92.8%。93例宮頸鱗癌中,HPV陽性 89例,陽性率為 95.7%。28例腺癌中,HPV陽性 22例,陽性率為 78.6%。在 2例鱗腺癌中分別檢出 HPV6、18。

        2.2 宮頸癌標(biāo)本中不同 HPV基因型的感染率 125例宮頸癌患者標(biāo)本中分別檢測出 9種 HPV基因型,分別為 HPV6、11、16、 18、31、 33、 45、 58、59型。在所有 116例感染 HPV的標(biāo)本中,單一感染較為常見,共計 85例占 73.3%,主要為HPV16、18感染;單一低危型 (HPV6、11)3例,占 2.6%;雙重感染 22例,占 17.6%,其中包括 HPV16/18型 6例,HPV16/33型 5例,HPV11/16型 5例,HPV10/59型 1例;多重感染 9例,占 7.8%,主要表現(xiàn)為高低危型混合感染 (見表1)。

        表 1 125例宮頸癌 HPV基因型的檢出率Table 1 The detected ratios of HPV genotypes in 125 cervical cancer patients

        3 討論

        宮頸癌是威脅婦女健康的主要惡性腫瘤之一,全世界每年約有 50萬宮頸癌新發(fā)病例,其中亞洲約占 38萬,全世界每年約有 23萬女性死于宮頸癌。我國每年約有 15萬宮頸癌新發(fā)病例,每年約有 8萬人死于宮頸癌[1-3]。在我國,由于篩選制度尚不完善,普及面不廣泛,加之很多婦女對宮頸疾病的危害認(rèn)識不夠,宮頸癌的發(fā)病率明顯高于發(fā)達(dá)國家?,F(xiàn)有的流行病學(xué)和生物學(xué)資料已經(jīng)證明,高危型 HPV持續(xù)感染是宮頸癌及其癌前病變的主要病因[4]。統(tǒng)計結(jié)果表明,90%以上的宮頸癌均可檢測到 HPV DNA[5]。我國宮頸癌高發(fā)區(qū)的篩選資料也顯示,幾乎所有的宮頸癌 HPV均陽性[6]。本研究中宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本中 HPV感染率為 92.8%,其中鱗癌 95.7%、腺癌 78.6%,說明 HPV感染的基因型與宮頸癌的類型密切相關(guān)。宮頸癌中 HPV檢出率因地區(qū)標(biāo)本類型和檢測方法不同而有差異,國際腫瘤研究所 (IARC)曾報道,宮頸癌組織中總的HPV感染率高達(dá) 99.7%[7]。日本學(xué)者應(yīng)用特異性 PCR的方法檢測 383例宮頸癌的 HPV,檢出率為 86.3%[8]。本研究應(yīng)用基因芯片技術(shù)對 125例宮頸癌脫落細(xì)胞進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示HPV感染率達(dá) 92.8%,與目前普遍認(rèn)為的 90.0%宮頸癌組織攜帶有 HPV DNA的觀點(diǎn)相符。HPV基因型分布有地區(qū)差異,2003年 Clifford等[9]對全球各大洲 10 058例宮頸癌進(jìn)行了分析,發(fā)現(xiàn) HPV16為全球最主要的基因型,而其他基因型在各地區(qū)的分布有所差異,如 HPV45在非洲相對較多,HPV33在歐洲相對較多,而 HPV52、58在亞洲較多。Lo等[10]對北京、上海、廣州、四川和香港5個地區(qū) 809例宮頸癌患者進(jìn)行HPV檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn) HPV16所占比例為 79.6%,并顯示宮頸癌中主要 HPV基因型是 HPV16、18、58、52,其構(gòu)成比分別為79.6%、7.50%、3.80%和 2.36%。而 Clifford等研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌中常見基因型及其感染率從高到低依次為 HPV16、18、33、45、31、58、52。本研究通過對 125例宮頸癌患者中 HPV基因型的檢測發(fā)現(xiàn),各基因型檢出率由高至低依次為 HPV16、18、59、33、58,結(jié)果與 Lo等報道結(jié)果一致,表明 HPV16為最主要的基因型,HPV18位居第二,其他各基因型所占比例較少。本研究中 HPV18的感染率為 19.8%,比 Lo等報道的7.50%和洪蝶等[11]報道的 3.5%更高,而與 Clifford等報道的結(jié)果相近。本研究在 125例宮頸癌 HPV檢測中發(fā)現(xiàn) 6例(4.25%)HPV59感染與文獻(xiàn)報道不一致,提示各地區(qū)宮頸癌中感染的 HPV基因型存在差異。此外還發(fā)現(xiàn)少數(shù)標(biāo)本中存在HPV31、33、45高危型,但感染率較低,表明該地區(qū)宮頸癌患者感染 HPV基因型的多樣化,并以高危型為主。

        文獻(xiàn)報道宮頸癌患者 HPV雙重感染并不少見,但各家報道的感染率不一致。本研究發(fā)現(xiàn)汕頭地區(qū)宮頸癌 HPV雙重感染達(dá) 17.6%,與Kay等[12]報道的 16.0%相近,高于洪蝶等[11]報道的 9.5%。有學(xué)者報道,HPV16是雙重感染中最常見的基因型,HPV16、18、33常有雙重感染,故認(rèn)為 HPV的多重感染與 HPV基因型有關(guān)[13]。本研究 HPV雙重感染的 22例均含有 HPV16。不同地區(qū)不同種族人群對不同的 HPV基因型的易感性不同,而且不同的 HPV基因型對不同種族人群致癌性的強(qiáng)弱也存在差異[14]。本研究應(yīng)用基因芯片對宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示汕頭地區(qū)宮頸癌患者中 HPV的基因型多樣,且均為高危型感染,早期對廣大女性進(jìn)行 HPV檢測,能及時發(fā)現(xiàn)和確定宮頸癌高危人群,預(yù)防和早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌及癌前病變都具有重要的意義。

        1 王金行,吳廣平.沈陽地區(qū)人乳頭瘤病毒感染與宮頸疾病關(guān)系的研究 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2010,13(10):3242.

        2 張東紅,林美珊.人乳頭瘤病毒在國人宮頸病變中感染及型別分布特征的 Meta分析 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2010,13(4):1287.

        3 涂權(quán)梅,邱海凡,劉奕,等 .人乳頭瘤病毒檢測篩查早期宮頸癌的意義——婦科門診 3 700例人乳頭瘤病毒篩查分析 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2010,13(5):1611.

        4 Frei E.Clinical cancer research:an embattled species[J].Cancer,1982,50(10):1979-1992.

        5 Kuhn L,Denny L,Pollack A,et al.Human papillonmavirus DNA testing for cervical cancer screening in low resurce settings[J].J Natl Cancer Inst,2000,92(10):818-823.

        6 趙方輝,李楠,馬俊飛,等 .山西省襄恒縣婦女人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌關(guān)系的研究 [J].中華流行病雜志,2001,22(5):375-379.

        7 Haverkos H,Rohrer M,Pickworth W.The cause of invasive cervical cancer could be multifactorial[J].Biomed Pharmacother,2000,54(1):54-59.

        8 Maehama T.Epidemiological study of human paplomavirus infection of the uterine cervix in Okinawa,Japan[J].Infect Dis Obstet Gynecol,2005,13(2):77-80.

        9 Clifford GM,Smith JS,Plummer M,et al.Human papillo mavirus typesin invasive cervical cancer worldwide:a meta-analysis[J].Br JCancer,2003,88(1):63-73.

        10 Lo KW,Wong YF,Chan MK,et al.Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer:a multi-center study in China[J].Int Cancer,2002,100(3):327-331.

        11 洪蝶,呂衛(wèi)國,葉楓,等.宮頸癌及上皮內(nèi)瘤變?nèi)巳轭^瘤病毒基因型的檢測 [J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科檢測,2006,15(1):36-38.12 Kay P,Soelers R,Nevin J,et al.High prevalence of HPV16 in South African women with cancer of cervix and cervical intraepithelial heoplasia[J].J Med Virol,2003,71(2):265-273.

        13 陳仲波,羊正炎,俞華,等.宮頸癌患者人乳頭瘤病毒基因分型的研究 [J].中國全科醫(yī)學(xué),2010,13(6):1871.

        14 Levi JE,Keler B,Quint WG,et al.High prevalence of HPV infections and high frequency of multiple HPV genotypes in human immunodeficiency virus infected women in Brazil[J].JClin Microbiol,2002,40(9):3341-3345.

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