楊曉紅 溫柏平 莊 宇 代宏劍

云南省昆明市兒童醫(yī)院檢驗科，云南 昆明 650034

性傳播疾病 (STD)，是當(dāng)今世界上廣泛流行的傳染病之一，也是女性泌尿生殖道感染的常見病。近年小兒婦科門診就診人數(shù)逐年遞增，青少年婦科問題凸顯，為了解小兒及青少年泌尿道感染的病原微生物類型，本文對我院312例青少年婦科門診的患兒分泌物進(jìn)行檢測，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取來我院青少年婦科就診的3月－13歲的患兒312例，有不同程度的外陰紅腫，瘙癢。分泌物增多，尿急尿頻等癥狀，取患兒外陰及尿道分泌物，置于無菌生理鹽水管內(nèi)密閉送檢。

1.2 病毒DNA提取 取陰性質(zhì)控品，8000rpm離心數(shù)秒，吸50ul至0.5ml滅菌離心管，加入50ulDNA提取液充分混勻，100℃恒溫處理10±1分鐘;12000轉(zhuǎn)離心5分鐘，備用。樣本處理:吸取無菌生理鹽水樣本的全部液體轉(zhuǎn)至1.5ml離心管中，12000rpm離心5分鐘，去上清，沉淀加滅菌生理鹽水1ml混勻，12000rpm離心5分鐘;去上清，沉淀中加入50ulDNA提取液充分混勻，100℃恒溫處理10±1分鐘，12000rpm離心5分鐘備用。陽性質(zhì)控品處理同陰性質(zhì)控品;陽性定量參考品處理:8000rpm離心數(shù)秒，備用。

1.3 試劑及儀器 配套試劑及質(zhì)控品購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司。PCR擴增儀為美國DA－7600儀器，嚴(yán)格按說明書操作。

1.4 PCR擴增 取PCR管若干，加入處理后的樣品 (樣本、質(zhì)控品等)上清液2ul或陽性定量參考品2ul，8000rpm離心數(shù)秒，放入樣品槽。93℃預(yù)變性2min，55℃變性45s，接著60s延伸10個循環(huán)，其次93℃30s變性、55℃45s延伸30個循環(huán)病原體DNA擴增曲線見圖1。陽性結(jié)果為增長曲線呈S型曲線，Ct值小于27，且0.97≤r≤1;陰性結(jié)果為一條平滑的直線，Ct值=30。

2 結(jié)果

312 例患兒UU陽性39例占陽性病例的12.5%，CT陽性9例占2.89%，NG陽性4例占1.28%，UU、CT二者混合感染4例占1.28%。

表1 312例患兒UU、CT、NG的檢測結(jié)果

3 討論

青少年婦科常見疾病包括:幼女外陰陰道炎、尿道炎、陰唇粘連、青春期外陰陰道炎等。導(dǎo)致泌尿生殖道感染的病原體種類很多，如大腸桿菌、鏈球菌等支原體是介于病毒與細(xì)菌之間的一種沒有細(xì)胞壁的病原體，可通過細(xì)菌濾器。而解脲支原體也被認(rèn)為是非淋菌性尿道炎的重要病原體之一，是目前相關(guān)實驗室檢查的主要項目，治療前未做檢測易造成反復(fù)發(fā)作［1］，遷延不愈，給治療帶來較大難度。

本資料312例感染標(biāo)本UU陽性39例占12.5%，CT陽性9例占2.89%。NG陽性4例占1.28%，UU、CT二者混合感染4例占1.28%。其中以UU陽性率為高，雖與文獻(xiàn)報道［2－3］的成人檢出率低，但因其潛在危害性而引起臨床重視。UU感染主要寄居于人體泌尿生殖道，所引起的臨床癥狀及體征難以區(qū)分，當(dāng)泌尿生殖道粘膜受損，機體抵抗力降低時更利于UU的粘附而引起疾病。解脲支原體感染后，因女性感染者癥狀大多不明顯，易造成醫(yī)生漏診，如不能及時有效治療，將導(dǎo)致感染率增高并存在隱性傳染的可能。本文39例UU感染兒，8例患兒的母親追蹤檢測持續(xù)陽性，說明家庭內(nèi)部存在交叉感染，尤其是外地務(wù)工子女居住衛(wèi)生環(huán)境較差及衛(wèi)生觀念不強導(dǎo)致長期攜帶病原體，如不及時治療危害甚大。另有4例UU、CT二者混合感染，病情稍重，使治療復(fù)雜化。

解脲支原體可侵犯尿道、宮頸及前庭大腺，引起尿道炎、宮頸炎與前庭大腺炎;上行感染時，可引起子宮內(nèi)膜炎、盆腔炎、輸卵管炎，尤其輸卵管炎多見，因此與女性生殖健康關(guān)系最為密切，被認(rèn)為是非淋球菌性尿道炎中僅次于衣原體 (占50%)的重要病原體，故及時準(zhǔn)確的檢測結(jié)果顯得尤為重要。我科應(yīng)用PCR法檢測解脲支原體(UU)，沙眼衣原體 (CT)，淋球菌 (NG)，特異強，所需時間較短，與其他支原體無交叉反應(yīng)，且不受外陰其他菌污染的干擾，因而可爭取早日確診，以指導(dǎo)臨床合理用藥。

青少年婦科是建立于兒科和婦產(chǎn)科的交叉部分的新學(xué)科，以往認(rèn)為婦科病只有成年女性才會得，孩子離婦科病非常遙遠(yuǎn)，甚至有些家長錯誤地認(rèn)為女孩得了婦科病是“不光彩”的事情，羞于承認(rèn)女孩患婦科病，更不愿意帶孩子到小兒婦科去看病，以致耽誤病情使治療復(fù)雜化，希望通過我們共同努力讓家長和患兒能正確認(rèn)識小兒和青少年婦科疾病，警惕、防止小兒婦科疾病的發(fā)生。

［1］李華信，郭艷梅，呂朝輝，等1泌尿生殖系統(tǒng)支原體合并其它病原體感染情況調(diào)查〔J〕1人民軍醫(yī)，2006，49(11):630－6321.

［2］侯曉芳，范愛清1447例女性生殖道支原體和衣原體感染檢測結(jié)果分析〔J〕中國衛(wèi)生檢驗雜志，2009，19(5):1093－10941.

［3］董振偉，張加敏，董善民，等1非淋菌性尿道炎的病原檢查研究〔J〕中國皮膚性病學(xué)雜志，2001，15(2):106，1221.