林艷青
(秦皇島市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心,河北秦皇島066000)
(一)發(fā)病情況2011年7月,秦皇島市昌黎縣城關(guān)某養(yǎng)殖戶(hù)飼養(yǎng)的800只貉暴發(fā)了一種以高燒、黃疸、呼吸困難、腹瀉為癥狀,陸續(xù)死亡的病例,3周內(nèi)死亡165只,不分大小,不分公母,通過(guò)臨床檢查和實(shí)驗(yàn)室診斷等手段,確診為黃曲霉毒素中毒和附紅細(xì)胞體混合感染。
因?yàn)楫?dāng)時(shí)是雨期,畜主以為是普通感冒、腸炎,便采用穿心蓮、阿米卡星、頭孢拉定、慶大霉素肌肉注射,硫酸粘桿菌素飲水,菌毒敵、84消毒液等消毒和治療手段,但都不能控制病情的發(fā)展,后又懷疑飼料,檢查發(fā)現(xiàn)飼料已過(guò)期,有結(jié)塊,但由于購(gòu)買(mǎi)的飼料較多且以前并沒(méi)有發(fā)病,所以一直未換料,根據(jù)畜主介紹檢測(cè)人員從料堆中上、中、下三層取料樣3份,新鮮死貉6只,帶回實(shí)驗(yàn)室診斷。
(二)臨床癥狀及病理變化發(fā)病貉病初多數(shù)精神沉郁、厭食,行動(dòng)遲緩,體溫升高,鼻鏡干燥,開(kāi)始呈水樣腹瀉;不久發(fā)展為血樣粘液,精神高度沉郁,成年貉有的后軀麻痹,仔貉多數(shù)后軀麻痹,頭歪向一側(cè),繼而出現(xiàn)呼吸困難,可視黏膜黃染,發(fā)現(xiàn)癥狀后1~3 d死亡,有的4~5 d死亡。對(duì)死亡4 h內(nèi)的貉進(jìn)行尸體剖檢,主要病變有:肝腫大3~4倍呈土黃色質(zhì)脆;肺充血、出血間質(zhì)增生,外觀呈大理石樣,肺門(mén)淋巴結(jié)腫大,氣管和支氣管黏膜充血;脾臟腫大發(fā)黑,有散在的出血;腎臟土黃色皮質(zhì)有出血點(diǎn)或出血斑;胃黏膜充血、出血有大小不等的潰瘍?cè)睿竷?nèi)空虛;十二指腸黏膜出血 ,有紫黑色潰瘍;大腸黏膜充血潮紅;心肌水腫增大2~3倍,冠狀溝有出血點(diǎn)。
(三)實(shí)驗(yàn)室診斷針對(duì)病貉死前臨床表現(xiàn)和死后剖檢癥狀做如下實(shí)驗(yàn)室檢查。
1.飼料霉菌總數(shù)測(cè)定。根據(jù)GB/T 13092-2006 飼料中霉菌總數(shù)的測(cè)定方法對(duì)采樣飼料3份進(jìn)行培養(yǎng)檢測(cè),結(jié)果分別為 5.2×105cfu/g、5.9×105cfu/g、6.3×105cfu/g。
2.飼料黃曲霉毒素B1的檢測(cè)。
根據(jù)對(duì)飼養(yǎng)情況的調(diào)查有針對(duì)性的檢測(cè)飼料中的黃曲霉毒素,根據(jù)GB/T17480-2008 飼料中黃曲霉毒素B1的檢測(cè),酶聯(lián)免疫吸附法3份飼料的檢出結(jié)果分別為1.5 mg/kg、1.8 mg/kg、2.1 mg/kg。
3.細(xì)小病毒、犬瘟熱病毒排查。
刮取2 g病死貉腸道內(nèi)容物用生理鹽水做5倍稀釋?zhuān)浞终袷? min,室溫3 000轉(zhuǎn)/min,離心5 min,取上清液,用細(xì)小病毒快速檢測(cè)卡和犬瘟熱快速檢測(cè)卡進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果全部陰性。
4.附紅細(xì)胞體檢測(cè)。分別在4片干凈的玻片上各滴加一滴滅菌生理鹽水,用白金耳分別取心臟血、腹股溝內(nèi)側(cè)靜脈血于玻片生理鹽水中以牙簽充分混勻,蓋玻片蓋好,每個(gè)部位做2片,低倍鏡下全視野檢測(cè),結(jié)果每個(gè)紅細(xì)胞表面均有數(shù)量不等的芒刺樣小體附著,紅細(xì)胞染蟲(chóng)率100%。
5.病料涂片鏡檢。無(wú)菌,分別取肝臟、脾臟、腎臟、肺臟、心血直接進(jìn)行涂片,革蘭氏染色、鏡檢,未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌。
6.組織細(xì)菌培養(yǎng)。無(wú)菌分別取肝臟、脾臟、腎臟、肺臟、心血等組織,接種于普通瓊脂平皿,24 h37℃培養(yǎng),觀察未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)。
根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢變化和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)可診斷本病例為飼料霉菌毒素中毒與附紅細(xì)胞體混合感染。
(四)防治措施
1.立即停止飼喂發(fā)霉飼料,改換新鮮富含蛋白質(zhì)的優(yōu)質(zhì)流體或半流體飼料。
2.徹底清掃貉舍,并用0.2%~0.5%硫酸銅溶液全面噴灑貉舍,飼槽等與貉接觸過(guò)的用具要徹底清洗,并用0.2%~0.5%硫酸銅溶液浸泡。
3.失去食欲的病貉用38℃~40℃ 的1:3 000硫酸銅溶液深部灌腸,每次100~200 ml,每天一次,連續(xù)5 d。
4.藍(lán)耳紅弓鏈(鹽酸多西環(huán)素)每千克體重肌注0.1 ml,每天一次,連用5 d。注射復(fù)合VB1~2 ml/只,VC注射液1~2 ml/只,每日2次,連用5 d。病貉每只10萬(wàn)單位的制霉菌素片口服,每天2次。對(duì)有食欲的病貉飼料中加入制霉菌素100萬(wàn)國(guó)際單位/kg飼料,氟苯尼考0.2 kg/噸飼料,強(qiáng)力霉素0.2 kg/噸飼料連用一周。每天供給充足的硫酸銅飲水1:3 000,連用5 d。
經(jīng)過(guò)采取以上綜合性的防治措施,貉群在7 d內(nèi)死亡現(xiàn)象明顯減少,15 d后未再出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。20 d后貉群基本恢復(fù)正常。