秦杰，陳瑾，黃守國

·生物診斷技術(shù)·

實時熒光定量PCR檢測WISP-1/NGX6基因體系與子宮頸癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的關(guān)系

秦杰，陳瑾，黃守國

目的探討原癌基因 WISP-1 和抑癌基因 NGX6 與子宮頸癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

宮頸腫瘤； 原癌基因； 基因表達

www.cmbp.net.cn 中國醫(yī)藥生物技術(shù), 2011, 6(6):410-414

子宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，是女性患者的主要死亡原因之一。近年來子宮頸癌的防治已取得較大的進展，子宮頸癌的發(fā)病率亦明顯下降，但年輕婦女子宮頸癌的發(fā)病率則呈明顯上升趨勢，并由此引起國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，而尋找子宮頸癌早期診斷的基因指標(biāo)及有效治療子宮頸癌的方法，進一步明確子宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的分子生物學(xué)以及基因表達機制也已成為當(dāng)前的研究熱點。雖然目前已有常規(guī)實驗方法如免疫組化等從組織學(xué)角度對子宮頸癌在蛋白質(zhì)分子水平進行了分析研究，但有關(guān)基因水平的研究報道甚少，尤其是原癌基因 WISP-1/抑癌基因 NGX6 體系在子宮頸癌組織中的表達，國內(nèi)外至今尚未見報道。

鑒于此，為了研究 WISP-1/NGX6 基因體系與子宮頸癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的關(guān)系，了解其在子宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中的表達規(guī)律，本研究利用實時熒光定量 PCR技術(shù)對子宮頸癌轉(zhuǎn)移組、未轉(zhuǎn)移組及正常子宮頸組織標(biāo)本中該基因體系的表達情況進行了檢測，并對比分析了 3 組標(biāo)本中該基因體系的表達量，以期為進一步有效預(yù)防和治療子宮頸癌提供有利依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1標(biāo)本來源 90 例標(biāo)本均取自中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院婦科手術(shù)切除標(biāo)本，患者年齡 25 ～ 65（47.38 ± 12.35）歲。入選標(biāo)本均以病理診斷為標(biāo)準(zhǔn)，其中正常子宮頸組織標(biāo)本（病理診斷為慢性宮頸炎或非癌變組織）30 例，子宮頸浸潤癌（子宮頸鱗狀細(xì)胞癌）60 例，而子宮頸浸潤癌又分為轉(zhuǎn)移組和未轉(zhuǎn)移組各 30 例。所有病例術(shù)前均未經(jīng)化療、放療、生物治療等其他治療，并排除其他系統(tǒng)合并癥及其他系統(tǒng)腫瘤等疾病。標(biāo)本離體后立即取材，–80 ℃ 冰箱保存。

1.1.2儀器與試劑 MJ Opticon2 熒光定量 PCR儀為美國 BIO-RAD 公司產(chǎn)品；Taq 酶（貨號DR001A）購自日本 TaKaRa 公司；Rever Tra Ace-α-反轉(zhuǎn)錄試劑盒（FSK-100）購自日本 Toyobo 公司；其余常規(guī)化學(xué)試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1引物與探針的設(shè)計與合成 參考人WISP-1、NGX6 基因 mRNA 序列（GenBank：NM-080838、NM-001042590），利用 Primer express2.0 軟件分別設(shè)計針對WISP-1、NGX6 及內(nèi)參照β-肌動蛋白（β-actin）的引物（P1 ～ P6）與探針，并分別在探針的 5′ 端引入 FAM 羧基熒光素，3′ 端引入熒光淬滅基團，其序列見表 1。引物和探針均由上海英駿生物技術(shù)有限公司合成。

1.2.2人子宮頸（癌）組織總 RNA 的提取 自超低溫冰箱中取出人子宮頸（癌）組織標(biāo)本，迅速用剪刀剪下約 0.25 g 樣品，置于預(yù)先加入 200 μl RNAiso? Plus 的 1.5 ml EP 管中。在 RNAiso?Plus 溶液中破碎人子宮頸（癌）組織，補充 800 μl RNAiso? Plus 后混勻。冰上靜置 5 min，再加入200 μl 氯仿，旋緊后劇烈振蕩 15 s（氯仿沸點低、易揮發(fā)，振蕩時應(yīng)小心離心管蓋突然彈開）。待溶液充分乳化后，在冰上靜置 5 min。4 ℃、13800 ×g高速離心 15 min 后，將上層水相移至新管中，然后加入等體積的異丙醇，冰上放置 10 min，4 ℃、13800 ×g離心 10 min。棄上清，以 1 ml 75％ 乙醇[焦碳酸二乙酯（DEPC）水配制]洗滌沉淀，反復(fù)顛倒數(shù)次，4 ℃、13800 ×g離心 5 min。棄上清，空氣干燥 RNA 10 min，加入 20 μl DEPC 水溶解，立即取 2 μl RNA 溶液進行反轉(zhuǎn)錄，剩余 18 μl RNA 溶液 –80 ℃ 凍存。

1.2.3反轉(zhuǎn)錄反應(yīng) RNA熱變性：反應(yīng)體系總體積為 12 μl，其中包括 25 pmol/μl 隨機引物1 μl、DEPC 水 9 μl、RNA 2 μl；65 ℃ 水浴5 min 后迅速在冰上冷卻 2 min，離心收集反應(yīng)液。配制總體積為 20 μl 的反應(yīng)體系，其中包括第一步變性后的 RNA 溶液 12 μl、5 × RT Buffer 4 μl、dNTP 混合物（各 10 mmol/L）2 μl，RNase抑制劑（10 U/μl）1 μl，Rever Tra Ace 1 μl；RT反應(yīng)條件為：30 ℃ 10 min，42 ℃ 20 min，99 ℃ 5 min，4 ℃ 5 min。

1.2.4RT-PCR 反應(yīng) 配制總體積為 25 μl 的反應(yīng)體系，其中包括 10 × PCR Buffer 2.5 μl、2.5 mmol/L dNTP 2 μl、dH2O 16 μl、15 pmol/μl 引物 2 μl、15 pmol/μl 探針 0.3 μl、5 U/μlTaq酶0.2 μl、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)物 cDNA 2 μl。PCR Buffer成分：100 mmol/L Tris-HCl（pH 8.3）、500 mmol/L KCl、15 mmol/L MgCl2。加樣至 96孔定量 PCR 反應(yīng)孔中，每個樣品同時設(shè) 3 孔，用于檢測同一個指標(biāo)基因的樣本統(tǒng)一上機。在 MJ Opticon2 熒光定量PCR 儀上擴增，反應(yīng)條件為：94 ℃ 2 min；94 ℃5 s，55 ℃ 30 s，共 40 個循環(huán)，讀取 FAM 熒光數(shù)值；30 ℃ 5 s。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用 SPSS 19.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。計量資料基因表達量均采取隨機獨立樣本的t檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 WISP-1 基因表達量的比較

采用實時熒光定量 PCR方法分別檢測子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組與未轉(zhuǎn)移組、正常子宮頸組織中WISP-1 基因的表達量，結(jié)果表明原癌基因WISP-1在子宮頸癌組織未轉(zhuǎn)移組中表達量明顯高于正常子宮頸組織（P= 0.000、P＜ 0.001）；在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中表達量明顯高于未轉(zhuǎn)移組（P= 0.000、P＜ 0.001）；在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中表達量明顯高于正常子宮頸組織（F= 44.770，t= –5.638，P= 0.000、P＜ 0.001）（表 2）。

表1 實時熒光定量 PCR引物與探針序列Table 1 Sequences of primers and probes for real-time fluorescence quantitative PCR

表2 WISP-1 基因在子宮頸（癌）組織中的表達Table 2 The expression of WISP-1 gene in thecervical (cancer) tissues

2.2 NGX6 基因表達量的比較

采用實時熒光定量 PCR方法分別檢測子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組與未轉(zhuǎn)移組、正常子宮頸組織中NGX6 基因的表達量，結(jié)果表明抑癌基因NGX6在子宮頸癌組織未轉(zhuǎn)移組中表達量明顯低于正常子宮頸組織（P= 0.000、P＜ 0.001）；在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中表達量明顯低于未轉(zhuǎn)移組（P= 0.001、P＜ 0.05）；在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中表達量明顯低于正常子宮頸組織（F= 20.760，t= 6.024，P= 0.000、P＜ 0.001）（表 3）。

表3 NGX6 基因在子宮頸（癌）組織中的表達Table 3 The expression of NGX6 gene in the cervical (cancer) tissues

3 討論

腫瘤的惡變過程包括細(xì)胞增殖、DNA 過度復(fù)制、細(xì)胞周期功能紊亂、細(xì)胞永生化、逃逸凋亡、血管增生及轉(zhuǎn)移浸潤等一系列過程，相應(yīng)的分子機制主要有原癌基因的激活、抑制癌基因失活等[1]。原癌基因是指一大類可促進細(xì)胞分裂并有潛在致癌或促癌作用的基因群；抑癌基因或抗癌基因則是一大類可抑制細(xì)胞生長并有潛在抑制癌變作用的基因群。原癌基因的激活與抑癌基因的失活，使細(xì)胞生長與分化的調(diào)節(jié)失控，導(dǎo)致細(xì)胞持續(xù)分裂和癌變。當(dāng)抑癌基因失活后，可能使原癌基因充分發(fā)揮它的作用而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，但某一種原癌基因與抑癌基因?qū)?xì)胞分裂的正負(fù)調(diào)控作用，僅僅局限在某一種特定細(xì)胞的范疇內(nèi)有效[2]。正是基于這一認(rèn)識，目前關(guān)于腫瘤細(xì)胞增殖的研究正迅速開展，以期在基因水平揭示腫瘤增殖轉(zhuǎn)移的本質(zhì)，為改進腫瘤的診斷方法和治療手段提供依據(jù)。因此，本研究選用實時熒光定量PCR技術(shù)對子宮頸癌及正常子宮頸組織標(biāo)本中WISP-1/NGX6 基因體系的表達量進行了對比分析，以探討WISP-1/NGX6 基因體系對子宮頸癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的影響。

WISP-1 基因是在對大鼠高轉(zhuǎn)移性和低轉(zhuǎn)移性黑色素細(xì)胞突變體進行 RNA 差異篩選時被發(fā)現(xiàn)存在于低轉(zhuǎn)移性黑色素細(xì)胞中[3]。同時研究發(fā)現(xiàn)，WISP-1 基因定位于人染色體 8q24.1 ～ 8q24.3[4]，其轉(zhuǎn)錄的原始 mRNA 有 5 個外顯子，經(jīng)剪切加工成2 種轉(zhuǎn)錄變異體，是一種富含半胱氨酸且長度為367 個氨基酸的分泌性蛋白多肽。采用 PCR 測定人多種組織樣本中WISP-1 基因的表達，發(fā)現(xiàn)其存在于多種組織器官，如成人心臟、腎臟、肺、胰腺、胎盤、卵巢、小腸、脾，而在腦、肝臟、骨骼肌、結(jié)腸、外周血白細(xì)胞、前列腺、睪丸和胸腺中，WISP-1 基因低表達或不表達[5]。WISP-1 基因的生物學(xué)功能包括促進細(xì)胞增殖、介導(dǎo)細(xì)胞黏附、促進細(xì)胞外基質(zhì)增長、刺激細(xì)胞轉(zhuǎn)移等生物學(xué)功能，同時也可調(diào)節(jié)較復(fù)雜的生物學(xué)過程，參與血管形成和腫瘤形成[6]。WISP-1 是 Wnt-1-β-連環(huán)蛋白信號通路的下游靶基因，β-連環(huán)蛋白是 Wnt 信號通路的關(guān)鍵成分，可以與 Wnt 信號通路中的其他成分相結(jié)合，它在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中的水平改變還可影響某些基因的表達；在細(xì)胞質(zhì)中突變的 β-連環(huán)蛋白將與 DNA 結(jié)合因子相互作用，進而激活下游基因，引起一系列的改變，促進腫瘤形成；而WISP-1 作為該通路的下游靶基因，自然與腫瘤的形成緊密相關(guān)[7-10]。

本研究發(fā)現(xiàn)，子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組與未轉(zhuǎn)移組中WISP-1 基因的表達量均高于正常子宮頸組織，且子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中該基因的表達量明顯高于未轉(zhuǎn)移組，由此說明WISP-1 基因與子宮頸癌細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移成正相關(guān)，即該基因可促進子宮頸癌的形成，對癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移亦有促進作用，但具體作用機制還有待進一步研究。

NGX6 基因是中南大學(xué)腫瘤研究所分子遺傳室采用定位候選克隆策略克隆而成的一個鼻咽癌候選抑瘤基因（基因登陸號：AFl88239），其定位于染色體 9P21 ～ 22 區(qū)。而 9P21 ～ 22 區(qū)域的等位基因雜合性丟失現(xiàn)象是人類多種腫瘤組織中的共同事件，這提示NGX6 基因可能為腫瘤相關(guān)基因[11]。生物信息學(xué)分析表明該基因 cDNA 全長2.1 kb，編碼 1 個含 338 個氨基酸的跨膜蛋白，其具有 2 個跨膜結(jié)構(gòu)（234 ～ 256、269 ～ 291），胞外區(qū)含有 1 個 EGF-like domain（185 ～ 221）、3 個N-糖基化位點（92 ～ 95、100 ～ 103、172 ～ 175）；胞內(nèi)區(qū)較短，含有 1 個酪氨酸激酶磷酸化位點（257 ～ 268），提示 NGX6 基因可能編碼 1 種跨膜蛋白，并通過其酪氨酸激酶磷酸化位點、N-糖基化位點等功能域調(diào)控細(xì)胞的增殖、黏附和運動等生物學(xué)過程[12]。同時，有研究已經(jīng)證實 NGX6 基因在結(jié)腸癌，尤其在伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌組織中表達明顯下降甚至缺失[13]。另外，有實驗已初步證實NGX6 基因可對 Wnt-1-β-連環(huán)蛋白信號通路進行負(fù)調(diào)控，并推測 β-連環(huán)蛋白可能即為 NGX6 的作用靶點[14]。

本研究發(fā)現(xiàn)，NGX6 基因在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組及未轉(zhuǎn)移組中表達量均低于正常子宮頸組織，且子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中該基因表達量明顯低于未轉(zhuǎn)移組，由此說明 NGX6 基因表達量的降低與子宮頸癌的發(fā)生相關(guān)，亦與子宮頸癌的轉(zhuǎn)移相關(guān)。

綜上，本研究結(jié)果表明，原癌基因 WISP-1 在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組及未轉(zhuǎn)移組中的表達量均明顯高于正常子宮頸組織，在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中的表達量明顯高于未轉(zhuǎn)移組；抑癌基因 NGX6 在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組及未轉(zhuǎn)移組中表達量均低于正常子宮頸組織，在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中的表達量明顯低于未轉(zhuǎn)移組，即提示 WISP-1/NGX6 基因體系表達異常與子宮頸癌的發(fā)生有關(guān)，并且其作用均與 Wnt 信號通路有關(guān)。但本實驗標(biāo)本局限于新鮮組織，要求術(shù)后 30 min 內(nèi)立即取材保存，子宮頸癌患者取材對病理報告結(jié)果具有一定不良影響，因此實驗標(biāo)本數(shù)量偏少。此外，本實驗僅對 WISP-1 和 NGX6 基因的表達情況進行了檢測及詳細(xì)分析，而對于其基因功能未進行具體研究，因此關(guān)于WISP-1/NGX6 基因體系可否作為子宮頸癌早期診斷與監(jiān)測的基因指標(biāo)，其是否參與子宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展等問題尚有待進一步實驗研究。

[1] Theillet C. Towards an inventory of oncogenic mutations in cancer. Bull Cancer, 2010, 97(11):1223-1229.

[2] Bayley JP, Devilee P. Warburg tumours and the mechanisms of mitochondrial tumour suppressor genes. Barking up the right tree. Curr Opin Genet Dev, 2010, 20(3):324-329.

[3] Hashimoto Y, Shindo-Okada N, Tani M, et al. Identification of genes differentially expressed in association with metastatic potential of K-1735 murine melanoma by messenger RNA differential display. Cancer Res, 1996, 56(22):5266-5271.

[4] Su F, Overholtzer M, Besser D, et al. WISP-1 attenuates p53-mediated apoptosis in response to DNA damage through aetivation of the Akt kinase. Genes Dev, 2002, 16(1):46-57.

[5] Li N, Wang Q, Chen PP, et al. Study on expression of CTGF and WISP-1 genes in human lung cancers. J Hyg Res, 2008, 37(5): 555-557. (in Chinese)李寧, 王旗, 陳萍萍, 等. 肺癌組織中CTGF和WISP-1基因表達的研究. 衛(wèi)生研究, 2008, 37(5):555-557.

[6] Tang Q, Jing X, Li H, et al. Expression and prognostic value of WISP-1 in patients with endometrial endometrioid adenocarcinoma. J Obstet Gynaecol Res, 2011, 37(6):606-612.

[7] Tian C, Zhou ZG. Colon cancer pathogenesis of new research site WISP-1. West China medical, 2007, 22(1):181-182. (in Chinese)田超, 周總光. 結(jié)腸癌發(fā)病機制研究的新位點-WISP-1. 華西醫(yī)學(xué), 2007, 22(1):181-182.

[8] Kim NG, Kim JJ, Ahn JY, et a1. Putative chromosomal deletions on 9P, 9Q and 22 Q occur preferentially in malignant gastrointestinal stromal tumors. Int J CanCer, 2000, 85(5):633-638.

[9] Nagai Y, Watanabe M, Ishikawa S, et a1. Clinical significance of Wnt-induced secreted protein-1 (WISP-1/CCN4) in esophageal squamous carcinoma. Anticancer Res, 2011, 31(3):991-997.

[10] Hu R, Tian C, Meng WJ, et a1. The expression and clinical significance of Wnt-1 induced secreted protein-1 in breast carcinoma. J Sichuan Univ (Med Sci Ed), 2010, 41(2):231-234. (in Chinese)胡銳, 田超, 孟文建, 等. Wnt-1誘導(dǎo)分泌蛋白-1在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達及其臨床意義. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版), 2010, 41(2): 231-234.

[11] Martignetti JA, Gelb BD, Pierce H, et a1. Malignant fibrous histiocytoma: inherited and sporadic forms have loss of heterozygosity at chromosome bands 9p21-22-evidence for a common genetic defect. Genes Chromosomes Cancer, 2000, 27(2):191-195.

[12] Guo Q, Shen S, Liao M, et a1. NGX6 inhibits cell invasion and adhesion through suppression of Wnt/beta-catenin signal pathway in colon cancer. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai), 2010, 42(7): 450-456.

[13] Zhang XM, Shen SR, Wang XY, et a1. Expression of tumor related gene NGX6 in gastric cancer and colorectal cancer. World Chine J Digestol, 2002, 10(8):873-876. (in Chinese)張曉梅, 沈守榮, 王曉艷, 等. 胃癌和大腸癌中腫瘤相關(guān)基因NGX6的表達. 世界華人消化雜志, 2002, 10(8):873-876.

[14] Liu F, Shen SR, Li HT, et a1. Effects of NGX6 on the transcriptional activation of beta-catenin/TCF/LEF in Wnt/beta-catenin signal pathway. J Cent South Unive (Med Sci), 2007, 32(6):985-991. (in Chinese)劉芬, 沈守榮, 李宏韜, 等. NGX6對Wnt/beta-catenin通路beta-catenin/TCF/LEF轉(zhuǎn)錄活化的影響. 中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版), 2007, 32(6):985-991.

Correlation betw een WISP-1/NGX6 gene expr ession and cervical cancer cell pr oliferation and/or metastasis analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR

QIN Jie, CHEN Jin, HUANG Shou-guo

ObjectiveTo explore the correlation between oncogene WISP-1 and tumor-suppressor gene NGX6 expression and cervical cancer cell proliferation and/or metastasis.MethodsPrimers and probes were designed and synthesizes based on the mRNA sequence of human WISP-1 and NGX6 gene, respectively. Total RNA were extracted from human normal cervixtissues (30 cases) as well as non-metastasis and metastasis group (30 cases for each group) of cervix invasive cancer (cervical squamous cell carcinoma) tissues, and the expressions of WISP-1 and NGX6 gene were detected and compared by real-time quantitative fluorescence PCR.ResultsThe expression of the oncogene WISP-1 in both metastasis and non-metastasis group of cervical cancer tissues were significantly higher than normal cervical tissues (with P ＜ 0.001 for both). Moreover, WISP-1 gene expression in the metastasis group was significantly higher when compared to the non-metastasis group of cervical cancer tissues (P ＜ 0.001). The expression of tumor-suppressor gene NGX6 in both metastasis group and non-metastasis group of cervical cancer tissues were lower than normal cervical tissues (with P ＜ 0.001 for both). Similarly, NGX6 gene expression in the metastasis group was significantly lower when compared to the non-metastasis group of cervical cancer tissues (P ＜ 0.05).ConclusionWISP-1/NGX6 gene expression has correlation with cervical cancer cells proliferation and metastasis.

Uterina cervical neoplasms; Proto-oncogenes; Gene expression

HUANG Shou-guo, Email: shouguohuang@126.com

10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2011.06.003

海南省自然科學(xué)基金（2011-SZR-01-093）

570208 ?？?，中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院婦產(chǎn)科

黃守國，Email：shouguohuang@126.com

2011-10-14

方法參考人 WISP-1、NGX6 基因 mRNA 序列分別設(shè)計引物與探針。提取人正常子宮頸組織（30 例）、子宮頸浸潤癌（均為子宮頸鱗狀細(xì)胞癌）組織未轉(zhuǎn)移組及轉(zhuǎn)移組（各30 例）總 RNA，采用實時熒光定量 PCR 技術(shù)分別檢測各組標(biāo)本組織中 WISP-1、NGX6 基因的表達量并進行對比分析。

結(jié)果原癌基因 WISP-1 在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組及未轉(zhuǎn)移組中的表達量均明顯高于正常子宮頸組織（均 P ＜ 0.001），在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中的表達量明顯高于未轉(zhuǎn)移組（P ＜0.001）。抑癌基因 NGX6 在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組及未轉(zhuǎn)移組中的表達量均低于正常子宮頸組織（均 P ＜ 0.001），在子宮頸癌組織轉(zhuǎn)移組中的表達量明顯低于未轉(zhuǎn)移組（P ＜0.05）。

結(jié)論WISP-1/NGX6 基因體系與子宮頸癌的細(xì)胞增殖有關(guān)，并且與子宮頸癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移亦有相關(guān)性。

Author Affiliation:Department of Gynecology and Obstetrics, Affiliated Haikou Hospital, Xiangya Medical College of Central South University, Haikou 570208, China

www.cmbp.net.cn Chin Med Biotechnol, 2011, 6(6):410-414