楊向方 李燕廣 譚麗麗 陳建賓 丁雪梅 姬宏宇

妊娠期高血壓疾病是妊娠期特有的疾病，其病理生理變化是全身小動(dòng)脈痙攣和水鈉潴留，以高血壓、蛋白尿?yàn)橹饕R床表現(xiàn)的疾病，可造成多臟器功能損傷。嚴(yán)重影響母嬰健康［1－3］。本研究采用原位雜交法檢測Bax/Bcl-2 mRNA表達(dá)，探討甲狀腺功能減退癥(甲減)合并子癇前期胎盤Bax/Bcl-2 mRNA比值的表達(dá)趨勢。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取正常產(chǎn)婦6例(正常妊娠組)、子癇前期產(chǎn)婦6例(子癇前期組)、甲減合并子癇前期產(chǎn)婦6例(甲減合并子癇前期組)，3組選取年齡(27.5±2.1)歲，孕周(38±4)周;甲減的診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)按照文獻(xiàn)［4］的分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確定;妊娠期高血壓疾病的診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)按照文獻(xiàn)［5］的分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確定。甲減合并子癇前期產(chǎn)婦系孕期內(nèi)檢測甲狀腺激素水平測定時(shí)查出患甲減，內(nèi)分泌科給予優(yōu)甲樂治療。

1.2 取材及方法 胎盤娩出后，直視下迅速取母面中央(避開鈣化灶、機(jī)化灶、出血灶)約1.0 cm ×1.0 cm×1.0 cm 小塊胎盤組織，4%多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm厚度連續(xù)切片，每例切取相鄰2個(gè)切片，原位雜交法分別檢測Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表達(dá)，原位雜交試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。

1.3 結(jié)果判定 10×40倍光鏡觀察，Bax mRNA、Bcl-2 mRNA陽性表達(dá)呈棕黃色顆粒，主要位于胞漿內(nèi)，各隨機(jī)選取10個(gè)視野計(jì)數(shù)并取平均數(shù)，計(jì)算二者平均陽性細(xì)胞數(shù)的比值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 16.0軟件統(tǒng)計(jì)，采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

3組Bax/Bcl-2mRNA表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表 1。

表1 Bax/Bcl-2 mRNA表達(dá)水平比較n=6，

注:與正常妊娠組比較，*P＜0.01;與子癇前期組比較，#P＜0.01

Bax/Bcl-2 mRNA正常妊娠組組別1.227±0.049子癇前期組 1.505±0.023*甲減合并子癇前期組 1.957±0.415*#

3 討論

據(jù)報(bào)道，妊娠期高血壓疾病病變核心是胎盤局部缺血缺氧，導(dǎo)致胎盤循環(huán)障礙，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，最終導(dǎo)致妊娠期高血壓疾病［6，7］。子癇前期導(dǎo)致孕產(chǎn)婦出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥的同時(shí)，對(duì)圍產(chǎn)兒也有嚴(yán)重的影響。因營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)減少，使羊水生成減少，新生兒早產(chǎn)率增高［8］。有研究顯示，妊娠期高血壓疾病胎盤組織與正常妊娠者胎盤組織凋亡基因表達(dá)表達(dá)存在差異［9］。調(diào)控細(xì)胞凋亡的相關(guān)基因分為兩類:分別促進(jìn)和抑制細(xì)胞凋亡。這兩類基因相互作用的結(jié)果決定了細(xì)胞的生存［10，11］?；加屑诇p的孕婦，其胎兒的生長、發(fā)育存在一定的影響。

Bcl-2基因家族在調(diào)控缺血缺氧誘導(dǎo)的胎盤細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮重要作用。細(xì)胞受刺激后Bax/Bcl-2 mRNA的比值越高，促使Bax-Bcl-2同源二聚體形成，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。在抗凋亡機(jī)制中，Bax/Bcl-2 mRNA比值決定著細(xì)胞在受到凋亡刺激信號(hào)后是凋亡還是生存［12］。

本研究采用原位雜交檢測方法對(duì)胎盤組織中Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表達(dá)進(jìn)行了觀察。結(jié)果顯示，甲減合并子癇前期組胎盤組織中Bax/Bcl-2 mRNA表達(dá)增高，高于子癇前期組及正常孕婦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。妊娠期高血壓疾病的發(fā)生可能涉及了細(xì)胞凋亡基因分子機(jī)制，妊娠期高血壓疾病胎盤組織中Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表達(dá)水平處于失衡狀態(tài)，表明Bax/Bcl-2 mRNA比值與甲減合并妊娠期高血壓期有密切關(guān)聯(lián)。

1 Redman CW，Sargent IL.Latest advances in understanding preeclampsia.Science，2005，308:1592-1594.

2 Maynard SE，Min JY，Merchan J，et al.Excess placental soluble fms-like tyrosine kinase 1(sFlt1)may contribute to endothelial dysfunction，hypertension，and proteinuria in preeclampsia.J Clin Invest，2003，111:649-658.

3 Sartori MT，Serena A，Saqqiorato G，et al.Variations in fibrinolytic parameters and inhibin-A in pregnancy:related hypertensive disorders.Thromb Haemost，2008，6:352-358.

4 鐘南山，陳再英主編.內(nèi)科學(xué).第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008.537.

5 樂杰主編.婦產(chǎn)科學(xué).第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008.110-112.

6 Difeder I，Genbal VO，F(xiàn)isher SJ.Pre-eclampsia is associated with wide spread apoptosis of placenta lcytotrophoblasts within the uterine wall.Pathol，1999，155:293-301.

7 張曦，侯磊.MMP與妊高征胎盤血管重鑄.國外醫(yī)學(xué)婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè)，2003，3:352.

8 趙麗娜，駱?biāo)脒h(yuǎn)，吳璇，等，妊娠高血壓疾病患者胎盤組織中細(xì)胞凋亡調(diào)控基因bax和bcl-2蛋白的表達(dá)及意義.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2007，16:1887-1905.

9 Zhang H，Li Q，Li Z，et al.The protection of Bcl-2 overexpression on rat cortical neuronal injury caused by analogous ischemia/reperfusion in vitro.Neurosci Res，2008，62:140-146.

10 Hetz C，Vitte PA，Bombrun A，et al.Bax channel inhibitors prevent mi-tochondrion-mediated apoptosis and protect neurons in a model of global brain ischemia.J Biol Chem，2005，280:42960-42970.

11 Smith CS，Baker Npmsymond ME.Increased placental apoptosis in intrauterine growth restriction.Am J Obster Gynecol，1997，177:1395-1401.

12 莫娥清，劉穗玲.94例妊高征及其并發(fā)癥分析.中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，1996，12:215-216.