彭曉蓉

(公安縣人民醫(yī)院病理科,湖北公安434300)

在醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展的今天,血液分析儀的靈敏度和準(zhǔn)確度也有了空前提高,血液分析儀的簡(jiǎn)便、快捷、高效、高重復(fù)性的特點(diǎn)使得血常規(guī)檢查在臨床診斷中起來越發(fā)揮出極其重要的作用,但是在實(shí)際操作中,血小板檢測(cè)結(jié)果的不穩(wěn)定也是比較突出的一個(gè)問題,現(xiàn)將多年臨床檢驗(yàn)工作中所了解的關(guān)于影響血小板檢測(cè)的因素進(jìn)行如下探討。

1 方法學(xué)的缺陷

目前血液分析血小板大多數(shù)采用電阻抗法進(jìn)行計(jì)數(shù),也有光散射法或其他方法,其原理大都是根據(jù)細(xì)胞的大小、形態(tài)進(jìn)行區(qū)分和計(jì)數(shù)。這種檢測(cè)原理決定了對(duì)于血小板數(shù)量和形態(tài)正常的標(biāo)本,結(jié)果比較可靠,但是對(duì)于血小板明顯減少或形態(tài)異常者,結(jié)果誤差就比較大。正常人的血小板體積平均分布是2～30fl,體積分布直方圖明顯地向右延伸,不對(duì)稱,即都存在一定數(shù)量的大血小板。在病理情況下,大血小板會(huì)更多增加,由于大部分血液分析儀不能將大血小板與小紅細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分,致使許多大血小板被當(dāng)成小紅細(xì)胞計(jì)數(shù)導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。

2 儀器、試劑的因素

血液分析儀是精密電子儀器,由于測(cè)量的脈沖訊號(hào)非常小,容易受到各種因素的干擾,所以儀器應(yīng)安置在一個(gè)不受振蕩、不受磁場(chǎng)、電場(chǎng)、噪聲干擾、防潮、防塵,始終保持室溫的環(huán)境中。儀器液路的定期維護(hù)清洗也至關(guān)重要,計(jì)數(shù)管路的不清潔會(huì)造成血小板數(shù)量明顯升高。試劑的質(zhì)量對(duì)血小板結(jié)果也有著直接的影響,必須使用與儀器相配套的試劑[1],進(jìn)口試劑價(jià)格較貴,因此使用合格的國(guó)產(chǎn)試劑是避免試劑因素影響血小板計(jì)數(shù)的關(guān)鍵。

3 抗凝劑因素

ICSH推薦使用EDTA鹽抗凝,含量規(guī)定為1.5～2.0mg/ml,即1.5～2.0mg的EDTA-2K抗凝1ml的全血可以抑制血小板聚集,從而達(dá)到抗凝的目的。工作中常用的是EDTA-2K的能抗凝2ml全血真空采血管,這就要求采血時(shí)盡量準(zhǔn)確到2ml,采血量過多或過少都會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。如血液比例過高則抗凝劑相對(duì)不足,標(biāo)本會(huì)出現(xiàn)微凝塊阻塞儀器檢測(cè)孔;抗凝劑比例偏高血液相對(duì)不足,血小板會(huì)腫脹崩解,產(chǎn)生正常血小板大小的碎片而無法得出正確的結(jié)果[2]。還有極少數(shù)人的血小板在用EDTA抗凝時(shí)出現(xiàn)血小板聚集,這種情況可能與血漿中存在的某些自身抗體有關(guān),多發(fā)生在腫瘤患者自身。

4 標(biāo)本采集、儲(chǔ)存的因素

采血過程也是保證血小板準(zhǔn)確計(jì)數(shù)的關(guān)鍵。末梢采血時(shí)應(yīng)提前充分按摩采血部位后再行采血。尤其是嬰幼兒,若方法不當(dāng),如采血速度慢、出血不暢、擠壓采血部位等,就會(huì)造成血小板假性減少。靜脈經(jīng)多次穿刺而引起的水腫及皮下出血時(shí),因組織損傷,組織凝血因子混入血液標(biāo)本中產(chǎn)生肉眼看不見的小凝快,也可以引起血小板假性減少,此時(shí)必須重新采血測(cè)定。血液標(biāo)本采集后,最好放置15～30min,因?yàn)檠“咫x體后,其形態(tài)立即發(fā)生變化,其外膜形成的微小管游離端向外伸展形成絲狀偽足,數(shù)個(gè)偽足相互纏繞,形成血小板可逆聚集體,其體積一般和淋巴細(xì)胞大小相似,造成血小板假性減少,隨著時(shí)間廷長(zhǎng),這種假生聚集就會(huì)發(fā)生解聚。

5 小紅細(xì)胞增多或巨大血小板增多的因素

當(dāng)患者紅細(xì)胞大小不均、尤其是以體積＜70fl的小紅細(xì)胞居多時(shí),部分極小紅細(xì)胞會(huì)計(jì)入血小板數(shù),引起血小板假性增高。這種現(xiàn)象在使用電阻抗法原理計(jì)數(shù)的儀器中易出現(xiàn),因?yàn)檠“搴图t細(xì)胞是在同一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)中通過體積大小來識(shí)別,小紅細(xì)胞的脈沖信號(hào)可能被視為血小板信號(hào)而導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)假性增高,同理,當(dāng)血液中巨大血小板增多時(shí),也會(huì)使血小板計(jì)數(shù)減少。還有所謂的衛(wèi)星現(xiàn)象,是因EDTA抗凝中血小板黏附于分葉核粒細(xì)胞表面,出現(xiàn)巨大血小板,所以計(jì)數(shù)時(shí)沒有包括在內(nèi),此時(shí)都應(yīng)用顯微鏡重新計(jì)數(shù)血小板以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

6 樣品溶血不完全

溶血不完全對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類影響較大,會(huì)使白細(xì)胞假性升高,但在實(shí)際中作中發(fā)現(xiàn)不但影響白細(xì)胞的計(jì)數(shù)和分類,還會(huì)影響下一例樣品和血小板計(jì)數(shù),可能由于紅細(xì)胞碎片沖洗不徹底造成血小板假性增高,這種情況在半自動(dòng)血液分析儀需手工滴加溶血?jiǎng)r(shí)較易出現(xiàn)。

7 高鎂血癥及脂類與蛋白聚集的影響

臨床上常用MgSO4來預(yù)防控制妊高癥子癇的發(fā)作及用于治療先兆子癇。高濃度的Mg2+鎂離子有類似Ca2+的生理作用,通過改變血小板胞內(nèi)cAMP水平而引起血小板聚集,造成血小板計(jì)數(shù)假性降低。脂類與蛋白的聚集體,是因?yàn)榈兔芏戎鞍缀洼d脂蛋白可促進(jìn)血液高凝狀態(tài),使凝血因子活性增強(qiáng),血小板聚集性增高,纖溶性降低,引起假性血小板減少。

8 疾病因素

菌血癥患者血液中的大量細(xì)菌可導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)結(jié)果增高,在多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統(tǒng)增殖性疾病、轉(zhuǎn)移癌、自體免疫性疾病、重度感染及某些不明疾病血漿中冷球蛋白增加或白血病、妊娠、血栓性疾病、糖尿病等血槳中冷纖維蛋白增加,可使血中非晶體物質(zhì)聚集,引起血小板計(jì)數(shù)值假性增高[3],此時(shí)可將標(biāo)本放置37℃水浴后計(jì)數(shù)。

以上關(guān)于血小板檢測(cè)的影響因素是在臨床工作中比較常遇到的,了解了這些因素后,在操作中就可以做到心中有數(shù)、有的放矢。遇到有問題的標(biāo)本、有問題的結(jié)果,就要認(rèn)真分析仔細(xì)研究,一定要讓最后發(fā)出的報(bào)告最真實(shí)的反映客觀實(shí)際,這需要在實(shí)際工作中不斷學(xué)習(xí)、探索和總結(jié)。

[1]朱蕓.不同血液分析儀試劑使用的比較[J].河北醫(yī)藥,2000,22(11):854-855.

[2]劉健.抗凝劑對(duì)血小板及其參數(shù)檢測(cè)結(jié)果的影響分析[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2004,10(8):64-65.

[3]嚴(yán)麗華,邱方城,鄭衛(wèi)東.血液細(xì)胞分析的影響因素探討 [J].國(guó)外醫(yī)學(xué):臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè),2005,26(9):660-661.