楊春壯，李明秋，王 瑩，夏珊珊，劉靜男

(牡丹江醫(yī)學院，黑龍江牡丹江157011)

血管性癡呆(Vascular Dementia，VD)屬于中醫(yī)“呆病”、“文癡”、“健忘”、“郁證”等的范疇。VD 在亞洲國家占老年期癡呆的68．5%，在我國也占據(jù)了老年期癡呆的首位。由于VD患者的生活能力下降，嚴重威脅著老年人的健康和生存質(zhì)量。大量的臨床實驗表明，針灸治療VD具有眾多優(yōu)點，針灸作為一種行之有效的治療手段也逐漸被人們接受。本研究通過動物實驗，探討針刺百會、大椎、人中穴的獲效機制。

1 材料與方法

1．1 材料和設備 健康Wistar大鼠80只，雌雄各一半，體重200～350 g，由黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，實驗動物合格證號:SCXK(黑)2008004，室內(nèi)常溫下配料飼養(yǎng)，自由飲食水。對比西藥采用都可喜(法國施維雅藥廠生產(chǎn))，配成濃度為0.2 mg·mL－1的藥液。ZH－200型大鼠光電刺激跳臺(安徽省淮北正華生物儀器設備有限公司)，Multiskan MK3酶標儀(Thermo熱電上海儀器有限公司)，大鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)酶聯(lián)免疫試劑盒(上海勁馬生物科技有限公司)，電動玻璃勻漿儀(廣州市海輝實驗儀器有限公司)，G6805－2A型電針治療儀(廣州市穗鑫醫(yī)療器械有限公司)。

1．2 動物模型的制備方法 大鼠造模前禁食水12 h，以10%水合氯醛按400 mg/kg腹腔注射麻醉，仰臥位固定于手術臺，頸部皮膚剪毛備皮，75%酒精消毒頸部皮膚后，頸正中切口，鈍性分離暴露雙側頸總動脈，適時給以創(chuàng)口止血，穿線備用。硝普鈉按3.5 mg/kg腹腔注射造成低血壓。立即關閉雙側頸總動脈10 min，再通10 min，如此反復3次，撤線，縫合。放回籠中飼養(yǎng)。注意:盡量采用鈍性分離，可減少手術對實驗結果的影響。術中動作要輕柔，避免鉗夾和過分牽拉迷走神經(jīng)。注意試驗中的無菌保護和術后的創(chuàng)口消毒。常規(guī)飼養(yǎng)、觀察。于造模后第5天測試學習成績，24 h重復測試，作為判斷動物記憶成績的指標，檢驗造模是否成功。

1．3 跳臺實驗方法 實驗時，將大鼠放入跳臺裝置中適應3 min，然后通以40 V交流電，動物受電擊后，其正常反應是跳到安全臺躲避電擊，記錄通電后其跳到安全臺上的時間，作為反應期，以反應期作為其學習成績。

1．4 實驗步驟

1．4．1 動物分組 將造模后的大鼠隨機分為正常組、模型組、西藥組和針灸組，每組各15只。

1．4．2 治療方法 針灸組用28號1寸不銹鋼毫針，頭部“百會”、“人中”分別斜刺0.5寸，“大椎”直刺0.5 寸［1］，連接電針儀，施以連續(xù)波，頻率 120 次/s，強度以大鼠安靜耐受為度(約為2.0 mA)，每天針刺1次，留針20 min，連續(xù)30 d。西藥組采用都可喜溶液灌胃，2 mg·kg－1·d－1。模型組在同等條件下飼養(yǎng)，不給予任何治療。

1．4．3 實驗方法 治療30 d后，隔日測試學習成績，24 h重復測試，作為判斷動物記憶成績的指標。測試完畢后大鼠禁食水過夜。次日尾靜脈取血樣。2 000 r·min－1離心 20 min，分離血清;取大腦海馬組織，制成組織勻漿，酶免法測AchE。

2 結果

2．1 治療后各組大鼠學習成績

表1 治療后各組大鼠學習成績的比較(±s，單位:s)

注:與模型組比較，△P＜0.05;與正常組比較，▲P＜0.05。

組別 例數(shù) 反應期正常組15 4．65 ±9．71模型組 15 11．68 ±12．96▲西藥組 15 6．76 ±11．65針灸組 15 5．91 ±10．21△

2．2 治療后各組大鼠血和海馬AchE含量的原始值比較

表2 治療后各組大鼠血和海馬AchE含量的原始值比較(±s，n=15)

表2 治療后各組大鼠血和海馬AchE含量的原始值比較(±s，n=15)

注:與模型組比較，△P＜0.05;與正常組比較，▲P＜0.05。

組別 血清 海馬正常組0．674 ±0．204 0．830 ±0．036模型組 1．554±0．836▲ 1．024±0．130▲西藥組 1．030 ±0．193 0．875 ±0．066△針灸組 0．847±0．183△ 0．847±0．011△

3 討論

血管性癡呆(Vascular Dementia，VD)作為老年性癡呆這一家族的重要成員，已經(jīng)得到了人們的高度重視，流行病學研究表明，在中國65歲以上老年人癡呆發(fā)病率為39%，VD發(fā)病占68.5%，居首位［2］。而近年來的針灸療法，因其具有刺激經(jīng)氣、通經(jīng)活絡、醒腦開竅的獨特作用，已經(jīng)得到人們的認可。早期的針刺治療，對語言障礙、肢體功能的改善較為明顯，尤其是對肢體功能恢復期，針灸更能發(fā)揮其疏通經(jīng)絡、調(diào)和氣血的作用。近5年來，針灸治療血管性癡呆已經(jīng)得到廣大針灸工作者的廣泛應用［3～4］，各種針灸治療方法均取得了較好的療效。《難經(jīng)·二十八難》有云:“督脈者，……上致風府，入屬于腦。”百會和大椎均屬督脈穴位，百會為“三陽五會”，大椎為“諸陽之會”，為手足諸陽之會。督脈與腦密切相關，督脈通于腦。中醫(yī)認為VD的病機為氣血兩虧、肝腎不足或氣滯血瘀、痰阻脈絡而導致氣血不能上養(yǎng)腦竅，進而髓海失聰所致。故針刺百會、大椎可以統(tǒng)督醒腦，改善VD大鼠的學習記憶能力。從現(xiàn)代醫(yī)學的角度講，VD是指由于腦血管疾病和心血管病變的原因，因缺血性組織缺氧和出血性腦損傷所導致的認知喪失［5］?，F(xiàn)階段普遍認為，VD額葉皮質(zhì)及海馬膽堿能神經(jīng)元的損傷可能是認知功能受損的形態(tài)學基礎［6］，尤其腦海馬組織是學習、記憶的高級神經(jīng)活動中樞［7］，而腦內(nèi)海馬乙酰膽堿(acetyl－choline，Ach)的含量與記憶功能是密切相關的［8］。海馬組織的Ach存在于膽堿能神經(jīng)元囊泡中，Ach由膽堿在膽堿乙酰轉移酶(choline acetyltrans－ferase，ChAT)的催化下合成，一旦由囊泡中釋放便被膽堿脂酶(acetylcholinesterase，AchE)迅速水解為膽堿和醋酸。ChAT和AchE共同維持著Ach的動態(tài)平衡，也是維持哺乳動物正常進行學習記憶的必要條件。由于大鼠海馬組織是對缺血最為敏感的腦組織之一，所以反復的短暫腦缺血就會對海馬組織產(chǎn)生累計損傷效應［9］，從而使膽堿能神經(jīng)元損壞，Ach被釋放并被AchE分解，腦內(nèi)Ach含量減少，大鼠的學習記憶能力隨之下降。Tayebai等［10］的研究表明，抑制海馬組織Ach的分解，即增加海馬組織Ach的含量，有助于VD大鼠海馬組織神經(jīng)元遞質(zhì)的傳遞，從而改善大鼠的學習能力。本實驗結果表明，針灸組大鼠海馬及血內(nèi)AchE活性低于模型組，說明經(jīng)過針灸治療后可以降低VD大鼠腦和血內(nèi)AchE活性，改善膽堿能系統(tǒng)的功能，調(diào)節(jié)Ach生理代謝。所以針灸治療可以改善認知功能，治療VD。而從模型組大鼠海馬及血內(nèi)AchE活性明顯高于正常組，腦缺血時膽堿能神經(jīng)元蛻變，使Ach釋出，組織中AchE活性升高，導致了Ach水平進一步降低，可以看出腦缺血是加重學習記憶功能的缺損、引起 VD 的重要原因之一［11～12］。

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