丁 晟，諶樂禮，夏芝璐，吳 爭，張維民，蔡 宏，肖 崗，鄧奇濤

(江西省疾病預(yù)防控制中心，江西 南昌 330029)

葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮膚清洗消毒液主要有效成分為葡萄糖酸氯己定，為粉紅色透明略為黏稠的液體，為皮膚黏膜消毒藥劑。某些葡萄球菌、變異鏈球菌、唾液鏈球菌、白假絲酵母菌、大腸埃希菌和厭氧丙酸菌對本品高度敏感。低濃度有抑菌作用，高濃度則有殺菌作用。為了解其毒性、和致突變、亞急性毒性作用，按照《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版[1]的要求，對樣品進(jìn)行小鼠經(jīng)口急性毒性試驗，致突變作用和亞急性毒性的實驗研究，為葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮膚清洗消毒液的應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品及處理 樣品葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮膚清洗消毒液主要有效成分為葡萄糖酸氯己定 (由上海利康消毒高科技有限公司提供)，根據(jù)各項試驗要求進(jìn)行相應(yīng)的配制。

1.2 實驗動物 SPF級ICR小鼠體重 18～22g 20只，體重25～30g50只，雌雄各半，體重60g左右SPF離乳SD大鼠80只，由上海西普爾-必凱實驗動物有限公司提供(許可證號：SCXK(滬)2003-0002)。 實驗動物飼養(yǎng)在已取得使用許可證的屏障環(huán)境 (使用許可證：SYXK(贛)2007-0001)中進(jìn)行，全價顆粒飼料飼養(yǎng)。

1.3 方法 按照衛(wèi)生部 《消毒技術(shù)規(guī)范 》2002年版施行。

1.3 .1小鼠經(jīng)口急性毒性試驗小鼠按體重隨機(jī)分為2組，每組10只，雌雄各半。小鼠禁食過夜，采用一次最大限度法。稱取5g樣品，用蒸餾水溶解至20ml作為受試物。取受試物直接灌胃，連續(xù)觀察14d，并記錄小鼠中毒癥狀和死亡情況，觀察期結(jié)束后動物稱重，處死后進(jìn)行尸檢。

1.3 .2小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗 小鼠按體重隨機(jī)分為5組，高、中、低劑量組、陽性對照、陰性對照，每組10只，雌雄各半。以40mg/kg·BW劑量的環(huán)磷酰胺為陽性對照(CP)，蒸餾水為陰性對照。雌、雄性劑量組均為 5000、2500、1250mg/kg·BW/天，采用經(jīng)口灌胃30h染毒法進(jìn)行試驗，灌胃容量為0.4mL/20g.BW。末次灌胃后6h，頸椎脫臼處死動物，取股骨骨髓用小牛血清稀釋涂片，甲醇固定，吉姆莎染液(Giemsa)染色。在光學(xué)顯微鏡下，每只動物計數(shù)1000個嗜多染紅細(xì)胞(PCE)，觀察含微核的嗜多染紅細(xì)胞數(shù) ，同時觀察200個嗜多染紅細(xì)胞視野內(nèi)的成熟紅細(xì)胞數(shù)(NCE)，計算 PCE/NCE值和微核率。

1.3 .3亞急性毒性試驗 用體重60g左右SPF離乳SD大鼠80只，按體重隨機(jī)分為4組，每組20只，雌雄各半。受試物設(shè)置3個劑量為1000、500、250mg/KgBW，蒸餾水為對照組。連續(xù)灌胃30d，1次/天。單籠喂養(yǎng)，自由飲食，記錄大鼠進(jìn)食量、體重，連續(xù)觀察30d。觀察指標(biāo)：動物的一般表現(xiàn)、體重、食物利用率；血常規(guī)及生化指標(biāo)：白細(xì)胞計數(shù)及其分類、紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三酯、血糖、總蛋白、白蛋白；主要臟器重量及臟體比。放血處死動物后進(jìn)行解剖，大體觀察，對主要臟器肝、脾、腎、睪丸(或卵巢)稱重；病理組織學(xué)檢查：在對各劑量組動物做大體檢查未發(fā)現(xiàn)明顯病變和生化指標(biāo)未見異常改變時，僅對高劑量和對照組動物進(jìn)行肝、脾、腎、胃、十二指腸、睪丸(或卵巢)病理組織學(xué)觀察。統(tǒng)計處理：計量資料用t檢驗。計數(shù)資料用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 小鼠經(jīng)口急性毒性試驗

由表1可見，葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮膚清洗消毒液對雌、雄性小鼠急性經(jīng)口 LD50＞5000mg/kg·BW，屬實際無毒。

表1 急性經(jīng)口毒性試驗結(jié)果

2.2 小鼠骨髓微核實驗

由表2可見，各劑量組微核率與陰性對照組比較統(tǒng)計學(xué)上差異無顯著性且均在本實驗室正常值范圍內(nèi)，而環(huán)磷酰胺陽性對照組與陰性對照組比較統(tǒng)計學(xué)上差異有顯著性(P＜0.01)。表明樣品小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗在此試驗條件下結(jié)果為陰性。

表2 小鼠骨髓微核發(fā)生率及PCE/NCE值

2.3 亞急性毒性試驗

由表3～表9可見，該樣品各劑量組動物體重、食物利用率、主要臟體比與對照組比較差異無顯著性(P＞0.05)。對照組和各劑量組的白細(xì)胞計數(shù)及其分類、紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白及各項生化指標(biāo)(谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三脂、血糖、總蛋白、白蛋白)均在本實驗室正常參考值范圍內(nèi)。各劑量組肝、腎、脾、睪丸(或卵巢)重量及其與體重的比值與對照組比較未見異常(P>0.05)。各組動物大體解剖與主要臟器病理組織檢查均未見有意義的病理變化。

表3 受試物對大鼠體重的影響

表4 受試物對大鼠食物利用率的影響

表5 受試物亞急性經(jīng)口毒性試驗血液學(xué)檢查結(jié)果

表6 受試物對大鼠WBC的影響

表7 亞急性經(jīng)口毒性試驗?zāi)┢谏瘷z驗結(jié)果

表8 受試物對大鼠臟體比的影響

表9 受試物對大鼠臟體比的影響

3 討論

葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮膚清洗消毒液急性經(jīng)口毒性試驗屬于實際無毒，小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗陰性，亞急性毒性試驗陰性。葡泰牌4%葡萄糖洗必泰皮膚清洗消毒液主要成分為葡萄糖酸氯己定和丙二醇，氯己定類消毒劑被稱為目前用于皮膚及粘膜消毒的一種優(yōu)良消毒劑，氯已定類消毒劑的水溶液或醇溶液能快速殺死一般病原菌，廣泛用于皮膚粘膜和創(chuàng)面的消毒[2]；而丙二醇具有一定殺菌作用[3]，同時作為溶劑，可增加生物膜通透性，起到增強(qiáng)殺菌作用。本研究結(jié)果說明，由葡萄糖酸氯已定與丙二醇組成的皮膚清洗消毒液毒理學(xué)評價未發(fā)現(xiàn)有陽性體征和異常病理學(xué)及檢驗指標(biāo)改變。據(jù)文獻(xiàn)報道氯已定類消毒劑在臨床使用過程中也有不良反應(yīng)發(fā)生，有報道用氯已定溶液口腔消毒引起舌頭褪色、口腔疼痛；也有老年女性使用陰道醋酸氯已定栓劑，出現(xiàn)燒灼感、疼痛、滲血和潰瘍，伴有發(fā)熱和腰痛的報道[4]。通過用藥，適宜的酸堿度可改變陰道內(nèi)的pH值，改善局部微環(huán)境，恢復(fù)陰道自凈作用，從而有效控制感染。但是經(jīng)常對陰道進(jìn)行較大濃度的給藥，也可造成不同程度的陰道和宮頸上皮的損傷，反而破壞了陰道所固有的自潔系統(tǒng)，使局部抵抗力下降[5]。因此，在使用此類消毒劑對人體消毒時，應(yīng)該嚴(yán)格控制使用濃度以及消毒作用時間。

[1]衛(wèi)生部衛(wèi)生法制與監(jiān)督司..消毒技術(shù)規(guī)范[S].2002:126-135.

[2]胡國慶,林軍明,潘協(xié)商,等.詩潔手消毒液消毒效果和毒性實驗研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2003,13(1):43-45.

[3]張桂香.丙二醇熏蒸對手術(shù)室空氣消毒效果的檢測[J].中國消毒雜志,1996,13(3):184.

[4]馬 鴿,倪根珊.洗必泰的臨床應(yīng)用[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,1994,13(3):119.

[5]肖 崗,丁 晟,諶樂禮,等.婦科(抗抑菌)凝膠I型對家兔陰道黏膜刺激試驗[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2011,29(1):80.