張麗莙 權(quán) 偉 張利軍 葉 靜 王蓓蓓 張騰騰

天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室，天津 300070

黃連素對肺炎衣原體感染誘導(dǎo)的血管新生的影響及其分子機制

張麗莙 權(quán) 偉 張利軍 葉 靜 王蓓蓓 張騰騰

天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室，天津 300070

目的：觀察黃連素對肺炎衣原體（C.pn）感染誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞（VEC）形成新生血管能力的影響，探討其相關(guān)分子機制。方法：C.pn增殖培養(yǎng)后感染VEC（PCR和透射電鏡確認感染成功）；感染VEC經(jīng)不同濃度黃連素（0、100、150、200μmol／L）或磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）特異性抑制劑LY294002預(yù)處理，觀察各組VEC形成新生血管的能力。用RT-PCR檢測PI3K mRNA水平，用ELISA檢測PI3K酶活性及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-1、MMP-9）水平。結(jié)果：感染的VEC內(nèi)檢測出C.pn特異性DNA片段，電鏡下可見典型的C.pn。與對照組比較，C.pn感染組VEC形成微管腔結(jié)構(gòu)的能力明顯增強（P＜0.01），LY294002預(yù)處理組明顯減弱（P＜0.01），低、中、高劑量黃連素預(yù)處理對C.pn感染誘導(dǎo)的VEC微管腔形成能力有明顯抑制作用（P均＜0.01），且隨著濃度升高抑制作用增強；C.pn感染組PI3K mRNA表達水平顯著升高（P＜0.01），PI3K酶活性亦明顯增強（P＜0.01），LY294002預(yù)處理可使其mRNA表達水平降低（P＜0.01），酶活性減弱（P＜0.01）；中、高劑量黃連素可使C.pn感染后PI3K mRNA表達水平與酶活性明顯降低（P＜0.01）；VEC微管腔形成的程度與PI3K mRNA表達水平和酶活性均呈正相關(guān)（相關(guān)系數(shù)分別為0.656和0.813，均P＜0.01）；與對照組比較，C.pn感染組 MMP-1、MMP-9水平均無顯著性差異（P＞0.05），LY294002及各劑量黃連素均未使兩者水平明顯改變（P＞0.05）。結(jié)論：C.pn感染可促進血管新生，黃連素可能拮抗C.pn感染誘導(dǎo)的血管新生，其機制可能與激活或抑制PI3K有關(guān)，而并非通過MMP-1和MMP-9途徑降解細胞外基質(zhì)。