黃 娉 劉育英 胡白和 常 昕 趙新榮 胡 琴 王 芳

衛(wèi)小紅1 徐想順1 李 泉1 王傳社1，3 周長滿2 韓晶巖1，3

1北京大學醫(yī)學部天士力微循環(huán)研究中心，北京 100191；2北京大學醫(yī)學部基礎醫(yī)學院解剖教研室；3北京大學醫(yī)學部基礎醫(yī)學院中西醫(yī)結(jié)合教研室

養(yǎng)血清腦顆粒后給藥對大腦中動脈缺血再灌注引起的大鼠血腦屏障損傷的改善作用

黃 娉1劉育英1胡白和1常 昕1趙新榮1胡 琴2王 芳1

衛(wèi)小紅1徐想順1李 泉1王傳社1，3周長滿2韓晶巖1，3

1北京大學醫(yī)學部天士力微循環(huán)研究中心，北京 100191；2北京大學醫(yī)學部基礎醫(yī)學院解剖教研室；3北京大學醫(yī)學部基礎醫(yī)學院中西醫(yī)結(jié)合教研室

目的：探討?zhàn)B血清腦顆粒后給藥對大鼠大腦中動脈缺血再灌注引起的血腦屏障損傷的改善作用。方法：SD雄性大鼠（270～300g）隨機分成假手術(shù)組、缺血再灌注3h組、缺血再灌注6天組、缺血再灌注6天＋0.4g／kg養(yǎng)血清腦顆粒后給藥組和缺血再灌注6天＋0.8g／kg養(yǎng)血清腦顆粒后給藥組。假手術(shù)組不栓塞右側(cè)大腦中動脈，其余各組用線栓法栓塞右側(cè)大腦中動脈1h后進行再灌注。在再灌注3h后，第1次灌胃給藥，以后每隔24h給藥一次，連續(xù)給藥6次。第6次給藥90min后進行麻醉，在大鼠右側(cè)頂骨上開一顱窗（4mm×6mm），用連接于高速攝影機和熒光攝像機的正立顯微鏡觀察軟腦膜細靜脈中的紅細胞流速、白細胞黏附數(shù)和FITC標記的血漿白蛋白漏出情況，用激光多普勒血流儀測定腦表面血流量。另取大鼠，第6次給藥90min后用磁共振成像和TTC染色法觀察腦梗死面積，用TUNEL染色觀察腦皮層TUNEL陽性細胞，用電鏡觀察腦微血管的超微結(jié)構(gòu)，檢測腦內(nèi)Evan's Blue含量及腦組織干、濕重比值來反應血腦屏障損傷情況，用Western Blotting半定量分析血管內(nèi)皮緊密連接蛋白Claudin-5、Occludin、JAM、ZO-1及質(zhì)膜微囊標志性蛋白Caveolin-1的表達情況。結(jié)果：與假手術(shù)組相比，缺血再灌注3h組腦內(nèi)Evan's Blue含量及腦組織干、濕重比值增加，軟腦膜細靜脈中血漿白蛋白滲出增多，腦血流量降低。大腦中動脈灌流區(qū)出現(xiàn)梗死，TUNEL陽性細胞增多，血管外周水腫，血管內(nèi)皮間連接縫隙增大。在未行藥物干預的情況下，再灌注第6天，以上情況沒有明顯改善。0.4g／kg和0.8g／kg養(yǎng)血清腦顆粒后給藥可以改善缺血再灌注引起的血腦屏障和腦微循環(huán)的損傷，縮小腦梗死面積，降低TUNEL陽性細胞數(shù)，抑制血管內(nèi)皮間緊密連接蛋白Claudin-5和Occludin的降解。結(jié)論：養(yǎng)血清腦顆粒后給藥對大鼠大腦中動脈缺血再灌注引起的大鼠血腦屏障的損傷有改善作用，該作用與其抑制血管內(nèi)皮間緊密連接蛋白Claudin-5和Occludin的降解相關。