瞬時(shí)受體電位陽離子通道6（TRPC6）是足細(xì)胞實(shí)現(xiàn)濾過屏障功能的關(guān)鍵分子之一。在一些獲得性和遺傳性的腎臟疾病中常發(fā)現(xiàn)其足細(xì)胞上TRPC6呈過度表達(dá)，在動(dòng)物模型中TRPC6的過表達(dá)能導(dǎo)致蛋白尿。本文探討了TRPC6的過表達(dá)對(duì)足細(xì)胞功能的影響及其在腎病中與蛋白尿的關(guān)系。

研究通過在大鼠足細(xì)胞上瞬時(shí)轉(zhuǎn)染TRPC6互補(bǔ)DNA（cDNA）質(zhì)粒使TRPC6過表達(dá)，制成TRPC6過表達(dá)的足細(xì)胞模型。結(jié)果如下：（1）與野生型足細(xì)胞相比，轉(zhuǎn)染TRPC6質(zhì)粒的足細(xì)胞收縮，足突數(shù)量明顯減少，并且nephrin蛋白表達(dá)量降低。（2）TRPC6通道的激動(dòng)劑OAG能夠較大程度地增加TRPC6過表達(dá)的足細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，這一作用能被磷脂酶C（PLC）的抑制劑U73122所抑制。（3）在全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中，OAG能夠明顯地增加TRPC6過表達(dá)足細(xì)胞的膜電流，同時(shí)使用U73122后作用消失。（4）免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)表明在TRPC6過表達(dá)足細(xì)胞中，F(xiàn)-actin的分布紊亂并伴隨張力纖維的消失。synaptopodin的表達(dá)降低，但α-actinin-4的表達(dá)不變。當(dāng)使用U73122來抑制TRPC6通道或BAPTA-AM來清除胞內(nèi)Ca2+時(shí)，這2種蛋白表達(dá)的下調(diào)被緩解。（5）本研究進(jìn)一步證明，在TRPC6過表達(dá)的足細(xì)胞上，足突的收縮、F-actin分布的紊亂以及nephrin和synaptopodin表達(dá)的下調(diào)與細(xì)胞因子RhoA的激活有關(guān)。使用RhoA抑制劑Y-27632后，上述現(xiàn)象逐漸恢復(fù)正常。（6）由于U73122和BAPTA-AM能夠抑制RhoA的激活，因此TRPC6過表達(dá)足細(xì)胞上RhoA的激活是Ca2+依賴的，即Ca2+的增加激活了RhoA并產(chǎn)生了一系列異常反應(yīng)。

綜上所述，足細(xì)胞上TRPC6的過度表達(dá)導(dǎo)致這種非選擇性陽離子通道激活，使得Ca2+內(nèi)流增加，激活了Ca2+依賴的RhoA信號(hào)通路。這種異常的RhoA通路的激活進(jìn)一步引起細(xì)胞骨架蛋白分布的紊亂和足突的消失，并下調(diào)2種重要分子的表達(dá)。這2種分子蛋白分別是裂孔隔膜上的nephrin和細(xì)胞骨架上的synaptopodin。因此，足細(xì)胞TRPC6的過度表達(dá)與裂孔隔膜的功能異常和蛋白尿的產(chǎn)生密切相關(guān)。

（楊佳佳摘 楊卓審校 譯自Exp Biol Med,2011,236:184-193）