栗志民,劉志剛,韓偉賢
(廣東海洋大學 水產(chǎn)學院,廣東 湛江 524025)
織錦巴非蛤(Paphia textzleGmelin)隸屬軟體動物門(Mollusca),瓣鰓綱(Lamellibranchia),簾蛤目(Veneroida)簾蛤科(Veneridae),巴非蛤?qū)?Paphia),主要分布于中國廣東、廣西、福建沿海、臺灣、馬來西亞也有分布。該種與波紋巴非蛤(Paphia undulata)外表相似,但前者殼較厚,貝殼內(nèi)面中央潔白,生活于沙質(zhì)底;后者殼較薄,貝殼內(nèi)面中央紫紅色,生活于泥質(zhì)底。近些年來,國內(nèi)對巴非蛤?qū)俚呢愵愌芯恐饕性诓y巴非蛤的表型性狀分析[1]、人工育苗[2]、性腺組織學[3-4]和攝食[5]等,以及溝紋巴非蛤的生殖細胞觀察[6]和攝食[7]等。然而對織錦巴非蛤的研究非常缺乏。因該貝類適應性強、養(yǎng)殖周期短、產(chǎn)量高、肉質(zhì)鮮美,深得消費者的喜歡,目前,該貝在我國南方海域已開始小規(guī)模養(yǎng)殖,廣東海洋大學已成功突破該貝規(guī)?;斯び缂夹g。因貝類育苗場和養(yǎng)殖場常設在沿岸或海灣,這些地區(qū)易受氣候的影響而引起鹽度的大幅度變動,尤其是在春、夏季.雨水偏多,沿岸及河口地區(qū)受大陸徑流影響,常在短時間內(nèi)發(fā)生鹽度的劇烈變化,極易造成幼蟲和稚貝的大批死亡[8],所以,對該貝類進行環(huán)境因子適應性方面的研究顯得十分必要,作者對織錦巴非蛤稚貝進行鹽度適應性的研究,旨在探索該貝類稚貝期生長發(fā)育的適宜鹽度,為織錦巴非蛤的南方海域養(yǎng)殖生產(chǎn)提供理論依據(jù)。
實驗用稚貝取自遂溪縣草潭鎮(zhèn)湛江銀浪海洋生物技術有限公司水產(chǎn)種苗場同一生產(chǎn)池中的種苗。對收集的稚貝充分混合均勻后從中隨機抽取60個個體測量實驗初始值,規(guī)格為殼長4.46 mm±0.28 mm、殼高3.10 mm±0.12 mm、殼寬1.70 mm±0.15 mm,鮮質(zhì)量16.5 mg±0.34 mg。該批稚貝原生境鹽度26.0,溫度21.2℃,埋棲于底質(zhì)厚度1.5 cm的細沙層中。
根據(jù)預實驗結果,設置實驗鹽度范圍為 16.9、18.2、19.5、20.8、22.1、23.4、24.7、26.0、27.3、28.6、29.9、31.2、32.5、33.8、35.1、36.4、37.7。其中鹽度組 26.0為當時當?shù)刈匀缓K}度,作為對照。各鹽度梯度是通過向過濾海水中加經(jīng)曝氣的淡水或加人工海水精配制而成的??楀\巴非蛤在進入各鹽度梯度組之前,均經(jīng)過±1/h的鹽度漸變過程,直到達到設定的鹽度梯度后,開始實驗計時。每個鹽度梯度設 3個重復,每組放稚貝 30個,實驗在 60 cm×40 cm×50 cm的塑料箱中進行。實驗期間,持續(xù)微充氣,以湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis)和亞心型扁藻(Platymonas subcordiformis)體積比按2 : 3混合投喂,保持水體藻細胞密度在104個/mL以上,保證水中餌料充足。投餌前,需先消除餌料的鹽度差,以免影響各組鹽度。各組每天等鹽換水 1/2。實驗在室內(nèi)完成,自然光照,海水溫度 21.2℃,pH 8.0~8.2,水中溶氧(DO)>5 mg/L,氨氮(NH4+-N)<0.05 mg/L。每天統(tǒng)計稚貝存活情況,實驗結束時測量所有稚貝殼長、殼高、殼寬和鮮質(zhì)量,實驗進行17 d。
存活率(Rs)=(存活數(shù)/個體總數(shù))×100%; 相對存活率(P)=(實際組存活率/對照組存活率)×100%。死亡的界定以貝殼張開、外套膜收縮為標準。
在144 h后即實驗第7天至第17天期間各組個體都不再出現(xiàn)死亡,因此采用144 h作為該貝類50%出現(xiàn)死亡的考察時間。以144 h時該貝類50%死亡的鹽度 (記為 144hLS50)作為生存臨界鹽度,高低兩端生存臨界鹽度之間的鹽度范圍則為該貝類的生存適宜鹽度范圍。臨界鹽度采用二點法計算,公式為144hLS50=S1+[(P1-50%)/(P1-P2)]×(S2-S1),其中S1、S2分別為存活率接近50%的高低端鹽度,P1、P2為相應的相對存活率。把經(jīng)過多重比較無明顯差異的存活率最高的幾個實驗組對應的鹽度作為生存最適鹽度。
實驗結束時,測定并計算各組所有剩余稚貝的平均鮮質(zhì)量(W1)、殼長(L1)、殼高(H1)和殼寬(B1),并與初始鮮質(zhì)量(W0)、殼長(L0)、殼高(H0)和殼寬(B0)相比較。平均鮮質(zhì)量日增長率RW(mg/d)=(W1-W0)/(t1-t0)、平均殼長日增長率RL(mm/d)=(L1-L0)/ (t1-t0),平均殼高日增長率RH(mm/d)=(H1-H0)/(t1-t0)、平均殼寬日增長率RB(mm/d)=(B1-B0)/(t1-t0)。式中t1和t0分別為實驗結束和開始時的時間。殼長、殼高、殼寬測量采用游標卡尺,鮮質(zhì)量測量時用濾紙吸干殼表水分,用 SHIMADZUAUY120電子天平(精確度0.1 mg)測量鮮質(zhì)量。死亡幼貝的鮮質(zhì)量、殼長和殼高視為與初始鮮質(zhì)量、殼長、殼高和殼寬相等,增長率視為零。
采用實驗期間鮮質(zhì)量、殼長、殼高和殼寬日增長率為最快一組日增長率的 30%所對應的鹽度作為鮮質(zhì)量、殼長、殼高和殼寬增長臨界鹽度(其求法同樣采用二點法),把高、低端增長臨界鹽度之間的范圍分別作為上述 3指標的增長適宜鹽度。而把經(jīng)過多重比較無顯著差異的生長最好的幾個實驗組所對應的鹽度范圍分別作為上述3指標的增長最適鹽度。增長最適鹽度是上述3指標增長鹽度的重疊部分[9]。
采用Duncan法多重比較結果顯示存活率與對照組有顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)差異的低鹽端最高鹽度或高鹽端最低鹽度作為低鹽或高鹽敏感起始點[9]。
實驗數(shù)據(jù)采用平均值(M)±標準差(SD)表示,使用 SPSS(13.0)分析軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(ANOVA),并結合Duncan法進行多重比較來檢驗處理間的差異顯著性(P<0.05)。
實驗結果表明,鹽度為 16.9和37.7兩個組,稚貝144 h內(nèi)全部死亡。在實驗周期中,織錦巴非蛤稚貝在 144 h后其余各鹽度組不再出現(xiàn)死亡,因此以144 h作為稚貝50%出現(xiàn)死亡的考察時間,以144 h稚貝50%死亡的鹽度作為生存臨界鹽度(表1)。以平均相對存活率為依據(jù),采用二點法,計算 144hLS50低端存活臨界鹽度為 22.3,高端為 35.86,因此得出織錦巴非蛤稚貝的生存適宜鹽度范圍為 22.3~35.86。在臨界鹽度范圍內(nèi),對各鹽度組的平均相對存活率進行單因素方差分析,結果表明,鹽度對織錦巴非蛤稚貝的存活率產(chǎn)生顯著的影響(P<0.05),多重比較結果顯示,稚貝低鹽和高鹽敏感起始點分別為24.7和28.6; 鹽度為26.0、27.3的2個鹽度組存活率均在 97%以上,彼此間差異不顯著(P>0.05),因此,可以認為稚貝的生存最適鹽度為26.0~27.3。
實驗結果表明,不同鹽度對織錦巴非蛤稚貝 鮮質(zhì)量日增長率產(chǎn)生顯著的影響(P<0.05)(表2)。當鹽度為26.0時,具最大鮮質(zhì)量日增長率2.21 mg/d。鮮質(zhì)量增長臨界鹽度的低端在 24.7~26.0,高端在32.5~33.8,采用二點法,求得稚貝鮮質(zhì)量增長的適宜鹽度為24.74~33.76。經(jīng)多重比較,織錦巴非蛤稚貝鮮質(zhì)量增長的最適鹽度為26。
表1 織錦巴非蛤稚貝在不同鹽度梯度下144h存活情況及存活率Tab.1 Survival of Paphia textzle spats at different salinities for 144 h
表2 不同鹽度下織錦巴非蛤鮮質(zhì)量日增長率Tab.2 Daily growth rates of fresh weight of Paphia textzle spats at different salinities
如表 3所示,不同鹽度對織錦巴非蛤稚貝殼長日增長率影響顯著(P<0.05)。當鹽度為26.0時殼長生長最快,達到了143.14 μm/d。殼長日增長臨界鹽度的低端在 23.4~24.7,高端在 33.8~35.1,采用二點法,求得稚貝殼長增長的適宜鹽度為 24.32~34.98。經(jīng)多重比較,織錦巴非蛤稚貝殼長增長的最適鹽度為26。
如表 4所示,不同鹽度對織錦巴非蛤稚貝殼高日增長率影響顯著(P<0.05)。當鹽度為26.0時殼高生長最快,達到了90 μm/d。殼高日增長臨界鹽度的低端在23.4~24.7,高端在35.1~36.4,采用二點法,求得稚貝殼高增長的適宜鹽度為 24.04~35.49。經(jīng)多重比較,織錦巴非蛤稚貝殼高增長的最適鹽度為26。
表3 不同鹽度下織錦巴非蛤殼長日增長率Tab.3 Daily growth rates of shell length of Paphia textzle spats at different salinities
表4 不同鹽度下織錦巴非蛤殼高日增長率Tab.4 Daily growth rates of shell height of Paphia textzle spats at different salinities
如表 5所示,不同鹽度對織錦巴非蛤稚貝殼寬日增長率影響顯著(P<0.05)。當鹽度為26.0時殼寬生長最快,達到了65.29 μm/d。殼寬日增長臨界鹽度的低端在 23.4~24.7,高端在 35.1~36.4,采用二點法,求得稚貝殼寬增長的適宜鹽度為23.76~35.77。經(jīng)多重比較,織錦巴非蛤稚貝殼寬增長的最適鹽度為26。
表5 不同鹽度下織錦巴非蛤殼寬日增長率Tab.5 Daily growth rates of shell width of Paphia textzle spats at different salinities
根據(jù)生長適宜鹽度和生長最適鹽度的界定標準,將 鮮質(zhì)量增長適宜鹽度(24.74~33.76)、殼長增長適宜鹽度(24.32~34.98)、殼高增長適宜鹽度(24.04~35.49)和殼寬增長適宜鹽度(23.76~35.77)的重疊部分作為稚貝的生長適宜鹽度,即織錦巴非蛤稚貝生長適宜鹽度為 24.74~33.76。 鮮質(zhì)量、殼長、殼高和殼寬增長最適鹽度均為 26,即織錦巴非蛤稚貝生長最適鹽度為26。
海水鹽度是影響海洋生物存活和生長的重要環(huán)境因子之一,鹽度不適將導致貝類幼蟲及稚貝死亡,其主要原因是海水滲透壓的改變超出了自身調(diào)節(jié)能力,一旦海水鹽度變化過大,便會導致其心臟周圍腔液壓力猛增,表現(xiàn)出內(nèi)臟團微微顫動,面盤和鰓的纖毛擺動速度下降,心跳減慢,足部伸縮緩慢,對外界刺激反應遲鈍等現(xiàn)象[10]。作者采用單因素實驗設計研究鹽度對織錦巴非蛤稚貝存活和生長的影響,也證實了這個結論,同時支持了劉志剛[9]、尤仲杰[10]和章啟忠[11]的研究結果。貝類對鹽度的適應能力與種類的遺傳性和個體的生理狀態(tài)有關,而與其個體大小關系不明顯,同種類的所有大小的個體都以相同方式對溫度和鹽度作出反應[12-13]。本研究以織錦巴非蛤為實驗材料,研究鹽度與稚貝存活和生長的關系可大體反映出該種類對鹽度的適應能力,同時為該品種稚貝的養(yǎng)殖學理論提供基礎,為該品種的中間培育奠定實踐依據(jù)。
實驗結果表明,織錦巴非蛤稚貝生存適宜的鹽度范圍 22.3~35.86,表明該貝類屬典型廣鹽性的灘涂貝類,這與該貝生活在潮間帶的灘涂上,受突變鹽度影響的機會多,從而在漫長的進化過程中形成適應大范圍的變化特性相適應[8]。該貝類的生存最適鹽度范圍 26.0~27.3,比青蛤(20~25)[14]、縊蟶(12.4~16.3)[15]和毛蚶(23~33)[16]最適生存鹽度范圍更為狹窄,表明該貝類養(yǎng)殖區(qū)宜選擇在中低潮區(qū),避免選擇在河口海水鹽度較低的海區(qū)。該貝類 鮮質(zhì)量增長適宜鹽度(24.74~33.76)、殼長增長適宜鹽度(24.32~34.98)、殼高增長適宜鹽度(24.04~35.49)和殼寬增長適宜鹽度(23.76~35.77),依重疊部分,織錦巴非蛤稚貝生長適宜鹽度為 24.74~33.76,此外,鮮質(zhì)量、殼長、殼高和殼寬增長最適鹽度均為26,暗示其生長適宜鹽度、生長最適鹽度與生存適宜鹽度和生存最適鹽度均較接近,這與栗志民[17]、章啟忠[11]的研究規(guī)律相類似。
織錦巴非蛤?qū)Φ投撕透叨他}度具有一定的耐受力。在實驗鹽度范圍內(nèi),除了16.9和37.7鹽度組,144 h全部死亡,其他鹽度均保持不同程度存活,可見,稚貝對低鹽和高鹽均呈現(xiàn)出較強的耐受能力。從表 1還可以看出,在鹽度范圍 26.0~27.3,該貝類具有最高的存活率,隨著鹽度的降低或升高,存活率呈下降趨勢,在低鹽端下降更為明顯,而高鹽端下降較緩慢,表明該貝類對低鹽更為敏感,在春、夏多雨季節(jié),應加強管理,預防強降雨導致鹽度驟降對該貝帶來的損失。
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