王純凈，韓秀宇，趙秀宇，賈曉健，孫斌

（1.黑龍江省綏化市北林區(qū)畜牧局，綏化152000；2.黑龍江省訥河市畜牧局；3.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院）

蜂膠（porpolsi）是蜜蜂從植物的樹(shù)芽、樹(shù)皮等部位采集的樹(shù)脂、揮發(fā)性物質(zhì)并混入其上頜腺、舌腺、蠟腺等腺體分泌物和少量花粉經(jīng)蜜蜂加工轉(zhuǎn)化而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物[1-3]。蜂膠是蜜蜂用來(lái)防護(hù)、抵御病蟲(chóng)害和病原微生物的物質(zhì)，也是修補(bǔ)巢房和內(nèi)環(huán)境消毒殺菌的一種特殊物質(zhì)。是大自然恩賜給人類的天然、無(wú)毒、無(wú)副作用的神奇物品。

蜂膠是一種固體粘性物質(zhì)，是蜜蜂用于筑巢用的一種填充和粘合材料。外觀呈褐色、灰褐色或青綠色。帶有芳香氣味，味苦。在低溫下變硬、變脆，15℃以下時(shí)則變得硬而脆，失去粘性，25℃以上時(shí)變軟，35～45℃時(shí)粘性很大，熔點(diǎn)65℃，比重為1.127左右。蜂膠的成分極為復(fù)雜，運(yùn)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)機(jī)等現(xiàn)代分析技術(shù)，從蜂膠中分析鑒定出100多種化學(xué)成分[4]。蜂膠中約含50%～55%的樹(shù)脂、芳香油，30%～40%的蜂蠟，5%～10%的花粉。目前，科技人員從蜂膠中分離鑒定的成分有黃酮類、萜烯類、醌類、酯類、醇類、醛類、酚類、醚類、有機(jī)酸類和大量的氨基酸、酶類、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素E1、維生素A和多糖，尤其是蜂膠含有大量的黃酮類（20多種）和萜烯類化合物（15種多），它的許多功能均來(lái)自源于此。蜂膠是黃酮類化合物的寶庫(kù)，而黃酮類化合物具有多方面的生理和藥理活性，從而使蜂膠具有多方面的天然藥物特性[5]。蜂膠不溶于水，可溶于乙醇、乙醚和氯仿等有機(jī)物。蜂膠的品質(zhì)好壞與蜜源植物種類、多少關(guān)系密切。在夏季盛花時(shí)期，蜜源植物較多，從蜂箱中取出的蜂膠純度高、雜質(zhì)少。

蜂膠復(fù)雜多樣的生物活性物質(zhì)，使其具有獨(dú)特的生理藥理功能，也使得備受廣研究者關(guān)注和廣泛應(yīng)用。目前已經(jīng)證明蜂膠具有很強(qiáng)的抗菌、抗氧化、抗腫瘤、降血糖和降血脂等多種功能。蜂膠除了對(duì)人體有著廣泛的醫(yī)療保健作用外，還在食品工業(yè)、日化及畜牧獸醫(yī)等領(lǐng)域有著廣泛的用途。

在獸醫(yī)臨床上，用蜂膠軟膏治療口蹄疫、傳染性壞死菌病，創(chuàng)傷愈合快，而無(wú)化膿或疤痕形成。蜂膠用于動(dòng)物燒傷和創(chuàng)傷的治療，能促進(jìn)組織再生、加快創(chuàng)傷愈合；用0.5 g蜂膠，喹嘧胺硫鹽適量、可可油5 g，制成栓劑，治療因滴蟲(chóng)而引起牛流產(chǎn)導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜炎，7～8 d后，恢復(fù)正常，滴蟲(chóng)消失，治愈率100%；蜂膠乳劑用于仔豬地方性支氣管肺炎，用蜂膠液體石蠟浸液治療羔羊糞石癥、小牛中毒性消化不良等均收到很好的效果。劉瑞田等[6]報(bào)道，以蜂膠佐劑所制的雞大腸桿菌多價(jià)蜂膠滅活苗，使用安全、免疫效果好，保護(hù)率100%，免疫期6個(gè)月，免疫后雞群增重加快，產(chǎn)蛋率上升，發(fā)病與死亡率降低。說(shuō)明具有獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)的蜂膠制作的禽畜藥劑，有極高的開(kāi)發(fā)價(jià)值。

在治療人畜乳腺炎方面，許多學(xué)者已做了不同嘗試，并取得良好的效果。權(quán)利[7]用蜂膠內(nèi)服和藥渣熱敷治療人急性乳腺炎297例，3劑治愈率達(dá)到97%。在波蘭，用蜂膠提取物治療146頭患有嚴(yán)重急性乳腺炎的奶牛，其中125頭痊愈，痊愈率達(dá)到85.6%，且對(duì)抗生素有耐藥性的微生物感染的乳腺炎效果明顯。孫道德[8]以蜂膠提取物精制成0.5%注射液，給42頭患有急性乳腺炎奶牛做乳基穴注射，1～2 d全部痊愈。李增舉等[9]利用蜂膠合劑治療奶牛隱性乳腺炎，效果顯著。

我國(guó)是一個(gè)蜂產(chǎn)品生產(chǎn)大國(guó)，蜂膠資源充裕，但與美國(guó)、日本等發(fā)達(dá)國(guó)家相比較，在研究開(kāi)發(fā)蜂膠方面起步較晚，應(yīng)用產(chǎn)品不多。我國(guó)可以發(fā)揮得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)，積極研究和宣傳蜂膠，讓更多的人認(rèn)識(shí)它、研究它、開(kāi)發(fā)它，讓蜂膠更好地造福人類。

1 方法與材料

1.1 材料

蜂膠粉（河南長(zhǎng)葛市海煜蜂產(chǎn)品有限公司），聚乙烯醇（PVA）17-88，PVA05-88（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），白及（云南白藥集團(tuán)天紫紅藥業(yè)有限公司），東蓑若堿（大同區(qū)醫(yī)藥總公司），吐溫80，聚乙二醇，氮酮，丙二醇。

1.2 方法

1.2.1 蜂膠浸膏的制備

稱取50 g蜂膠，用4倍量的95%藥用乙醇進(jìn)行浸漬提取，每2 d提取1次，一共進(jìn)行3次提取，每天進(jìn)行攪拌1次，放置12 h，然后進(jìn)行過(guò)濾，對(duì)過(guò)濾后的濾液合并，最后濃縮成50mL。

1.2.2 基質(zhì)膜制備參考熊良鐘[10]方法進(jìn)行。

（1）PVA的制備 稱取PVA17-88、PAV05-88各100 g，用適量85%的乙醇，浸泡，過(guò)濾，反復(fù)進(jìn)行3次，然后烘干。取烘干好的PVA17-88 20 g、PAV05-88 40 g，加適量蒸餾水溶脹，85℃水浴上攪拌至溶解，待其冷卻后，然后加60%的乙醇配備成11%濃度的膜材，密封備用。

（2）白及膠漿的制備 將白及加工成豆粒大小，加8倍量蒸餾水浸泡3 d，溫度控制在2～8℃，經(jīng)常攪拌使其充分浸透，用雙層紗布濾過(guò)，濾液加乙醇使其含醇量為70%，靜置過(guò)夜，用單層紗布過(guò)濾，得絮狀沉淀物，自然干燥，即得白及膠。然后稱取一定量的白及干膠加15倍量的蒸餾水，水浴加熱使其充分溶解，得白及膠漿備用。

（3）基質(zhì)膜制備及穩(wěn)定性考察 將處理好后的PVA，加適量的甘油、吐溫-80，充分?jǐn)嚢?，然后倒于白及膠漿中（50～60℃）攪拌，同時(shí)伴以超聲20 min，以便混合均勻，制成涂膜墓質(zhì)PVA。按此方配制3份樣品，pH值范圍為5.5～6.5，進(jìn)行為期室溫15 d的pH值、成膜時(shí)間和表征觀察。

1.2.3 成膜制備

將上述方法制備的基質(zhì)膜，并依次加入25%蜂膠浸膏溶液，甲浪酸東莨若堿溶解15 mg，再依次加入4%丙二醇、2%氮酮、4%聚乙二醇-400，充分?jǐn)嚢杈鶆?，用乳酸調(diào)整pH值至5.5～6.5。樣本靜置觀察。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

按照以上方法配制的基質(zhì)膜分3個(gè)樣本進(jìn)行驗(yàn)證，其驗(yàn)證記過(guò)如下：

基質(zhì)膜觀察表明：pH值均在5.5～6.5范圍內(nèi)，成膜時(shí)間在5～6min，性狀良好，可塑性較強(qiáng)，所以該基質(zhì)膜的具有良好的穩(wěn)定性，成膜效果較理想。

表1 不同pH值成膜比較Table 1 Film formation comparison with different pH value

成膜樣本觀察結(jié)果：混勻后形成的成膜液態(tài)呈棕褐色，涂膜已展開(kāi)，可塑性強(qiáng)。但在樣本靜置觀察可見(jiàn)樣本4 h左右出現(xiàn)分層現(xiàn)象，可能由于膜體的緩慢釋放藥物作用有關(guān)，建議本樣品在使用前應(yīng)混合均勻后使用。

3 討論

蜂膠是一種天然的廣譜抗菌物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)蜂膠中的類黃酮物質(zhì)對(duì)革蘭陽(yáng)性菌（葡萄球菌和鏈球菌等）、革蘭陰性菌（大腸桿菌、肺炎球菌等）、真菌（白色念珠菌等）、病毒（艾滋病毒、疤疹病毒、口腔咽病毒、流感病毒等）、原生動(dòng)物等具有抗病原微生物活性[11，12]，這些天然的生物活性是其在疾病的治療應(yīng)用上得以利用，并且具有巨大的潛在的藥用價(jià)值。

試驗(yàn)利用蜂膠的化學(xué)特性并與成膜載體一起制備蜂膠貼膜，使其應(yīng)用于對(duì)奶牛疾病的治療。通過(guò)試驗(yàn)得到較為理想的性狀穩(wěn)定的基質(zhì)膜，再通過(guò)蜂膠浸膏等配方組合，制備能對(duì)疾病起緩釋治療的蜂膠藥物膜。選取聚乙烯醇（PVA）作為成膜材料是由于其水溶性高，并且具有良好的成膜性、柔軟性、吸濕性。學(xué)者通過(guò)研究乳劑型涂膜基質(zhì)的流變學(xué)[13]，證明用聚乙烯醇作為基質(zhì)膜涂展性好，膜對(duì)皮膚的浸潤(rùn)性好，有一定的機(jī)械張度，并可剝離。而且涂布成膜后使藥物均勻分布并緩慢釋放，藥效持久，對(duì)患處還有保護(hù)作用

[14]。當(dāng)聚乙烯醇與具有吸收功能的皮膚時(shí)，能與皮膚緊密接觸并可使藥物易于釋放，促進(jìn)藥物經(jīng)皮滲透，提高療效。白及膠與聚乙烯醇一樣，都是良好的天然生物高分子材料，而且對(duì)人體有無(wú)毒性，安全性，能與其他生物材料有很好的相容性，利用他們制備藥物載體能延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間，同時(shí)也增強(qiáng)了療效。白及有較強(qiáng)的粘附性，對(duì)癰疽潰瘍的治療有著非常好的效果，還具有收斂止血、消腫生肌等藥理作用，并且與涂膜中的主藥也能發(fā)揮協(xié)同作用[15]。白及能與聚乙烯醇任意融合，在短時(shí)間內(nèi)就能成膜，膜質(zhì)呈透明狀態(tài)，質(zhì)地柔軟，適合外用。氮酮與丙二醇可以促進(jìn)藥物滲透，并且與東蓑若堿、吐溫-80組合可以加強(qiáng)透皮效果。甲澳酸東蓑若堿具有強(qiáng)心、抗休克、抗粘膜損傷等作用，吐溫-80可作為溶液表面活性劑、乳化劑和分散劑，聚乙二醇-400與其他分子材料也具有廣泛相容性，也是很好的溶劑和增溶劑，吐溫-80和聚乙二醇-400的使用增強(qiáng)了膜物質(zhì)的溶解性和藥物相容性，使膜透皮效果更好的同時(shí)，加強(qiáng)了成膜的穩(wěn)定性。

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