黃 菊，王沂峰，蘇向輝，林瓊燕，陳高文，吳秋華

（廣州醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院，廣州 510150）

非人靈長類動物在解剖結(jié)構(gòu)，生殖生理，代謝功能等方面與人類極其相似，是研究人類健康和疾病的理想動物模型，被廣泛的應(yīng)用于傳染病、遺傳性疾病、心血管疾病、內(nèi)分泌疾病、藥理學和毒理學等研究領(lǐng)域［1］，應(yīng)用此類實驗動物進行實驗研究，容易掌握人類相似疾病的發(fā)病機制并找出治療疾病的方法。特別是在生殖生理方面，它們擁有與人類相似的單子宮，盤狀血絨毛型胎盤的動物［2］。在全世界范圍內(nèi)應(yīng)用較多的靈長類動物為獼猴，但獼猴繁殖的季節(jié)性以及馴養(yǎng)困難，應(yīng)用受到一定的限制，而食蟹猴在實驗動物學的應(yīng)用則逐漸增多，約占9％左右。食蟹猴為獼猴屬的一種，體型比獼猴稍小，性情溫順，月經(jīng)周期約為29d左右，其繁殖季節(jié)性不明顯，全年都可以交配繁殖，華南靈長類研究所的陳乾生早在80年代對其研究所內(nèi)1066頭繁殖母猴正常的分娩月份進行了記錄，其分娩月份分布在全年各個月份，六七月和十，十一月份相對分娩率較高，因此認為幾乎與人相似，每個月經(jīng)周期均會排卵［3］。故其在生殖生理方面跟人更為相似，在進行此方面的研究時更能模擬人的相關(guān)疾病。本實驗對懷孕晚期食蟹猴的血液生理等指標進行了檢測，為今后實驗研究提供了理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

食蟹猴由華南靈長類動物研究所提供［SCXK（粵）2009-0010］，3～7歲懷孕晚期食蟹猴15只，體重4.3～6.2kg，4～6歲非懷孕食蟹猴10只，體重2.5～4.6kg。

1.2 測定方法

1.2.1 血液生理學指標的測定：上述動物，禁食12h后，于上午8：00～11：00點后肢股靜脈采血4mL分別置于EDTA抗凝管及檸檬酸鈉抗凝管中，用Sysmex XE-2100血液分析儀、Sysmex CA-7000凝血分析儀對以下指標進行測定：白細胞總數(shù)（WBC）、白細胞分類、紅細胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（Hb）、紅細胞壓積（HCT）、紅細胞平均容積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板總數(shù)（PLT）、凝血酶原時間（PT）、部分凝血酶時間（APTT），纖維蛋白原含量（Fbg）。

1.2.2 血生化測定：上述動物禁食12～14h后，上午8：00～11：00采靜脈血2mL于無抗凝管中，離心取血清，通過OL YMPUS AU600型全自動生化分析儀對血液進行生化分析。具體指標如下：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、總膽紅素（T.Bili）、尿素氮（BUN）、肌酐（CreA）、血糖（Glu）、膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）、鈣（Ca）、鐵（Fe）、磷（P）、肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）、羥丁酸脫氫酶（HBDH）。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 基本數(shù)據(jù)比較

15只孕晚期食蟹猴平均年齡為4.60±1.35年，而10只非孕同齡食蟹猴平均年齡為4.7±0.82年，兩組比較無顯著性差異（P＞0.05）；而孕晚期食蟹猴平均體重為5.03±0.55kg，非孕同齡食蟹猴平均體重為2.98±0.48kg，兩組比較差異顯著（P＜0.01）。

2.2 血液生理結(jié)果

懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴WBC、NEU％、LYM％相比，有顯著性差異（P＜0.01），其他指標差異不顯著（表1）。

表1 懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴血液生理指標測定結(jié)果Tab.1 The comparison of blood physiological index between two groups

2.3 凝血指標測定結(jié)果

懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴與同齡非孕食蟹猴凝血指標相比，均顯著升高（P＜0.05）（表2）。

2.4 血液生化測定結(jié)果

懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴與同齡非孕食蟹猴相比，TP，Alb，BUN，CreA，膽固醇，血糖，Ca、Fe等在食蟹猴孕晚期顯著降低（P＜0.05）。而LDH、HBDH等心肌酶在食蟹猴孕晚期則呈顯著性升高（P＜0.05）（表3）。

表2 懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴血液凝血指標測定結(jié)果Tab.2 The comparison of thromboxane index between two groups

表3 懷孕晚期食蟹猴與同齡非懷孕食蟹猴血液生化指標測定結(jié)果Tab.3 The comparison of blood biochemical indicator between two groups

3 討論

3.1 血液常規(guī)

在人類，妊娠中晚期婦女，由于胎兒生長及孕婦各器官生理變化的需要，血容量及紅細胞會逐漸增加，但血漿增加大于紅細胞增加，出現(xiàn)血液稀釋現(xiàn)象［4］。本研究中，與同齡未孕食蟹猴相比，孕晚期食蟹猴的紅細胞、血紅蛋白、血小板雖有下降的趨勢，但無顯著性差異（P＞0.05），其他，如HCT、MCV、MCH、MCHC等指標相比也無明顯差異。說明在食蟹猴孕期血液同樣有稀釋現(xiàn)象，但不明顯。孕晚期食蟹猴白細胞下降有顯著性差異（P＜0.05），而且中性粒細胞比例與淋巴細胞比例也發(fā)生變化，孕晚期中性粒細胞比例顯著增多（P＜0.05），而淋巴細胞比例顯著減少（P＜0.05）。在人類妊娠中晚期雖然中性粒細胞比例也會顯著增加，但是白細胞也會生理性的增加，而非下降，這有可能與孕猴血容量增加，導(dǎo)致血液稀釋有一定的關(guān)系。

3.2 凝血三項

在人類，妊娠期凝血因子會不同程度增高，纖維蛋白原增加（Fbg），凝血酶原時間（PT）、部分凝血酶原時間（APTT）顯著下降，血液處于高凝狀態(tài)，以利于預(yù)防分娩過程中的失血［5］。而本研究中，食蟹猴孕晚期PT、PTINR、APTT及Fbg均顯著升高（P＜0.05），這說明食蟹猴孕晚期處于相對易出血狀態(tài)或者機體凝血功能處于一種相對平衡狀態(tài)，但未見猴產(chǎn)后出血死亡的報道［6］。所以可能孕晚期食蟹猴的凝血功能處于相對平衡穩(wěn)定狀態(tài)。

3.3 肝功能

在妊娠期，體內(nèi)激素水平發(fā)生變化，血清中的雌激素、孕激素水平逐漸升高，并于妊娠晚期達到最高峰，這些類固醇激素影響肝臟的代謝、合成、分泌功能［7］。本結(jié)果顯示：孕晚期丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）與同齡未孕食蟹猴數(shù)值相比有輕度下降的趨勢，但無顯著性差異（P＞0.05）。與人妊娠晚期變化報道相似。而堿性磷酸酶（ALP）相比則無顯著性差異（P＞0.05），此結(jié)果與人類由于胎盤ALP增加而致血清中ALP增加不同。另外，總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）下降有顯著性差異（P＜0.05），與人類妊娠期間因血容量增加而導(dǎo)致血液稀釋，TP及Alb顯著下降一致。

3.4 腎功能

由于孕婦及胎兒代謝產(chǎn)物的增多，腎臟負擔增加，腎血漿流量及腎小球濾過率于孕早期增加，以后在整個孕期維持高水平，代謝產(chǎn)物BUN、CRE排泄增多，使血液BUN、CRE下降。本實驗結(jié)果顯示食蟹猴與人類相似，孕晚期BUN及CRE與同齡未孕組相比顯著下降（P＜0.05）。

3.5 妊娠期血脂

本結(jié)果顯示膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）顯著性下降（P＜0.05），與人妊娠期雌激素升高，使脂肪沉積增多，加上腸道對脂肪吸收能力增強，血脂增加的結(jié)果相反。此結(jié)果的差異可能與猴的喂養(yǎng)有一定關(guān)系。在人類因孕期的營養(yǎng)需要，會增加營養(yǎng)物質(zhì)的攝入，而對猴這種等級制度森嚴的動物而言，營養(yǎng)的攝入不會得到較大改善，故血脂情況與人有一定的差異。

3.6 血糖

妊娠期孕猴能量消耗增加，而食物供給不一定增加，導(dǎo)致食蟹猴孕晚期血糖顯著下降。與人妊娠期血糖下降相符。

3.7 礦物質(zhì)

由于胎兒生長發(fā)育需要大量的Ca、P、Fe，會使孕婦血中Ca、Fe下降，而P因激素的作用會略有升高。本結(jié)果中孕晚期食蟹猴除Ca、Fe與同齡非孕食蟹猴相比下降顯著（P＜0.05），但P沒有因激素的作用升高（P＞0.05），可能與攝入不足有一定關(guān)系?？傮w上其礦物質(zhì)的情況與人類妊娠情況基本一致，與獼猴妊娠晚期情況相似［8］。

3.8 心肌酶

本結(jié)果顯示除肌酸激酶（CK）外，乳酸脫氫酶（LDH）、羥丁酸脫氫酶（HBDH）均呈上升趨勢（P＜0.05）?？赡芘c妊娠期膈肌升高，心博量增加，心臟負荷加大有關(guān)，與人類妊娠晚期情況相似。

由上可見，妊娠晚期食蟹猴在WBC、NEU％、LYM％、PT、APTT、Fgb、TP、Alb、BUN、CR、CHOL、Glu、Fe、LDK、HDBH上，與同齡未孕食蟹猴相比差異顯著，其它指標雖在孕晚期有不同改變但無顯著性差異。食蟹猴孕晚期在血脂以及磷等指標的變化上與人類妊娠晚期變化比較有差異，可能與妊娠期孕猴能量消耗增加，而食物供給不一定增加有一定關(guān)系?？傮w的血液學生理指標變化與人類相比基本相似，為實驗用懷孕食蟹猴的應(yīng)用提供了一定的參考依據(jù)，特別為藥理學、藥物安全性評價等方面的實驗研究提供了參考指標。

［1］王冬平，隋麗華，洪寶慶，等.食蟹猴與獼猴血液生理和生化指標的比較［J］.中國比較醫(yī)學雜志，2007，17（7）：400-402，434.

［2］Davison BB，Cogswell FB，Baskin GB，et al.Plasmodium coatneyi in the rhesus monkey（Macaca mulatta）as a model of malaria in pregnancy［J］.Am J Trop Med Hyg，1998，59（2）：189-201.

［3］陳乾生，歐陽子焯.食蟹猴［J］.北京實驗動物科學與管理.1994，11（1）：63-68.

［4］樂杰，謝幸，豐有吉.婦產(chǎn)科學［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社.2004：1：39.

［5］李艮亮，張霞，王馥美.妊娠晚期孕婦血凝四項指標檢測及分析［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2007，45（11）：53.

［6］白壽昌，陳元霖，曾中興.獼猴［M］.北京：科學出版社，1985：11.

［7］曲榮美，董暉，胡亞莉，等.正常妊娠婦女不同孕期多項生化指標分析［J］.中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2000，16（5）：297-298.

［8］Spicer EJ，Oxnard CE.Some haematological changes during pregnancy in the rhesus monkey（Macaca mulatta）［J］.Folia Primatol（Basel），1967，6（3）：236-242.