湖南農(nóng)業(yè)大學動物科技學院 楊永生 鄧惠中 羅佳捷 賀建華＊

銀耳多糖（TPs）是銀耳的主要功能成分，其種類較多，大多數(shù)是以α-（l→3）-D-甘露糖為主鏈的雜多糖，主要分為以下幾類：酸性雜多糖、中性雜多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖、胞外多糖（馬素云等，2010；楊世海等，1993）。銀耳多糖主要是由甘露糖、木糖、葡萄糖醛酸、核酸糖、半乳糖和葡萄糖組成，還有少量的果糖和巖藻糖，其分子中有典型的乙酞基結(jié)構(gòu)，所不同的只是各種銀耳多糖所含這些糖基的比例不同 （洪閣等，2010；姜瑞芝等，2006；Khondkar等，2002）。

1 銀耳多糖的提取

銀耳多糖是從銀耳子實體、孢子、發(fā)酵液中分離純化的帶有分支的雜多糖。銀耳多糖的主要提取方法有水提取法、堿提法、酶提法等。崔蕊靜等（2004）通過對銀耳多糖的提取工藝的研究表明，酶法浸提效果最佳，堿浸提法其次，兩者均優(yōu)于熱水浸提法。并認為酶法提取銀耳多糖溶液的最適條件為：料水比1∶50，加入1%的果膠酶，置于45℃水浴鍋中恒溫酶解45 min，然后迅速升溫至98℃滅酶，并保溫浸提60 min。黃秀錦（2008）試驗表明，酶法提取銀耳多糖溶液的最適條件為：料水比1∶60，加入0.7%的果膠酶，酶解50 min，浸提時間 60 min，通過 DEAE-Sepharose Fast Flow和SephadexG-200柱層析后可得到純度較高的TPP2多糖。

王玢（2009）用堿法提取銀耳多糖液的研究表明，在提取過程中，各因素對銀耳多糖液提取的影響依次為：溫度＞pH值＞時間＞料液比，得出的最優(yōu)的提取工藝條件為：溫度90℃，pH值9，時間4 h，料液比1∶100；此條件下，銀耳多糖得率為27.4%。

何偉珍和吳麗仙（2008）對銀耳采用水煮提取法，得到的粗產(chǎn)品采用季銨鹽（CTAB）沉淀法純化，純化后精品中銀耳多糖的含量大幅提高。

銀耳多糖的各項提取、分離工藝到還不是十分的純熟，還有待進一步優(yōu)化，以使其更利于工業(yè)化生產(chǎn)。

2 銀耳多糖的免疫作用

銀耳多糖能維持機體免疫系統(tǒng)的動態(tài)平衡，當機體免疫系統(tǒng)受損或功能低下時，能夠刺激各種免疫細胞成熟、分化和繁殖，使機體的免疫系統(tǒng)恢復平衡。銀耳多糖主要是通過調(diào)節(jié)體液免疫、細胞免疫和免疫因子來影響機體免疫的。

林志彬（1985）研究報道，腹腔注射200 mg/kg銀耳多糖可使正常小鼠脾臟重量明顯增加。徐文清（2006）通過小鼠碳粒廓清實驗、溶血素實驗，表明銀耳孢子多糖對由化療藥環(huán)磷酰胺造成的免疫功能低下小鼠的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能具有明顯的激活、增強作用，銀耳孢子多糖能明顯增加小鼠溶血素的含量，并能拮抗環(huán)磷酰胺引起的免疫功能抑制，說明銀耳孢子多糖可提高免疫功能低下小鼠的體液免疫能力。

銀耳多糖可通過對IL-2、IL-6和TNF-αm-RNA的表達來促進這些細胞因子的生成（崔金鶯和林志彬，1996；馬莉和林志彬，1992）。胡庭俊等（2005）應用反向離子對高效液相色譜法測定小鼠脾臟淋巴細胞蛋白激酶C（PKC）活性，銀耳多糖能夠提高PKC的活性。而PKC可激活淋巴細胞中的cAMP反應元件結(jié)合蛋白，并使其與IL-2的啟動子結(jié)合，進而促進IL-2表達 （Solomou等，2001）。IL-2具有廣譜免疫增強活性，能促進細胞毒性T前體細胞分化為細胞毒性T細胞，激活B細胞增殖分化分泌抗體，并促進自然殺傷細胞功能及干擾素釋放，所以血清IL-2水平的提高也直接促進了淋巴細胞轉(zhuǎn)化率（LTR）的升高（Granelli-Piperno等，1984）。銀耳多糖較抗生素能夠提高生長肥育豬各階段LTR、IL-2和IgG水平，對免疫功能有改善作用（文敏等，2010）。崔金鶯和林志彬（1996）研究表明，100 mg/L銀耳多糖可促進ConA誘導的脾細胞培養(yǎng)上清IL-2的活性、增強LPS活化的小鼠腹腔巨噬細胞產(chǎn)生IL-6的能力，25 mg/L和100 mg/L明顯增強小鼠腹腔巨噬細胞TNF-α活性。銀耳孢子發(fā)酵物（TSF）同樣具有提高豬LTR、IL-2、Et和豬瘟抗體滴度的功能（傅祖良等，2009）。

3 銀耳多糖的抗氧化作用

體內(nèi)代謝產(chǎn)生和外源性因素產(chǎn)生的自由基均可誘導細胞衰老和凋亡，而銀耳多糖能清除自由基，具有較好的抗氧化作用（Chen，2010；吳瓊等，2009；Inoue 等，2004）。 劉培勛等（2005）對從銀耳孢子發(fā)酵物中用堿液提取得到的4個多糖組分的抗氧化活性進行研究，用清除羥自由基實驗、清除超氧陰離子自由基實驗、抗H2O2誘導的紅細胞氧化溶血實驗考察4個多糖組分的抗氧化活性，證明4個多糖組分均具有一定的清除羥自由基、氧自由基和抑制紅細胞溶血的活性的作用。銀耳多糖對D-半乳糖致衰老模型小鼠心肌細胞具有抗凋亡和抗氧化作用，且這種作用具有劑量相關(guān)性（曲丹等，2009）。

銀耳多糖能夠提高機體超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活力，從而促進機體內(nèi)自由基的清除，減輕脂質(zhì)過氧化發(fā)生，保護生物膜，起到一定的抗氧化、抗衰老的作用（蔡東聯(lián)等，2008）。顏軍等（2006）通過體外化學模擬系統(tǒng)測定銀耳多糖消除羥自由基、超氧陰離子自由基以及防止油脂質(zhì)氧化的性能，試驗結(jié)果表明，銀耳多糖清除羥自由基的作用明顯，50%清除量為0.112 mg/mL，對超氧自由基的清除能力隨著多糖濃度而升高，50%清除量為0.264 mg/mL，油脂抗氧化性能介于維生素E和維生素C之間。

4 銀耳多糖對腸道微生物群落結(jié)構(gòu)的影響

正常微生物是動物胃腸道中不可缺少的組成部分，通常又分為有益微生物（如雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬等）和有害微生物群 （如產(chǎn)氣莢膜梭菌屬、葡萄球菌屬等），而腸道菌群與動物的健康和正常生長有著密切關(guān)系。有益微生物菌群通常覆蓋在胃腸道黏膜上皮表面，并能阻止病原微生物在腸道黏膜組織上的定殖。據(jù)目前的研究結(jié)果來看，銀耳多糖具有與果寡糖、甘露寡糖、木糖的類似作用，能直接到達后腸作為雙歧桿菌和乳酸桿菌特異性的營養(yǎng)物質(zhì)，促進腸道理想微生物菌群的形成，增強動物對外源性病原菌的抵抗能力，從而改善腸道的健康狀況。

吳子健等（2008）研究表明，銀耳多糖添加為3～7 g/L時可促進嗜酸乳桿菌L101的增殖，其中5 g/L為最適添加量，在發(fā)酵16 h后，活菌數(shù)可達8.13×108cfu/mL，而當劑量大于9 g/L添加量會抑制菌體的增殖。鄒?。?006）、傅祖良等（2009）對斷奶仔豬的研究發(fā)現(xiàn)，銀耳多糖能夠促進腸道內(nèi)乳酸桿菌和雙歧桿菌的增殖，抑制大腸桿菌生長，減少仔豬腹瀉，并能增加腸絨毛高度，降低隱窩深度，有利于動物的健康和促進養(yǎng)分的吸收，從而提高生產(chǎn)性能。

5 銀耳多糖在畜牧生產(chǎn)中的應用

目前，甘露寡糖、果寡糖等在畜牧生產(chǎn)中的應用已經(jīng)取得了較好的效果。銀耳多糖在豬生產(chǎn)中研究應用有少量報道，而在家禽和反芻動物生產(chǎn)中的應用鮮見報道。

文敏等（2010）試驗表明，銀耳多糖可以提高生長肥育豬各階段的生產(chǎn)性能，其促生長效果優(yōu)于抗生素，并且還具有提高免疫功能和改善肉質(zhì)的作用。吳玉玲（2007）試驗表明，0.4%銀耳多糖對斷奶仔豬的促生長效果與喹烯酮加高銅組相當，并且與哇烯酮加高銅組相比，銀耳多糖可以增強細胞免疫與體液免疫功能，認為銀耳多糖促進斷奶仔豬的生長可能與增強細胞免疫功能和促進IGF-1的分泌有關(guān)。鄒鍵（2006）研究結(jié)果表明，銀耳多糖能改善斷奶仔豬生產(chǎn)性能，但當添加到一定量時出現(xiàn)負效應（0.5%）；銀耳多糖最適添加量為0.4%，可減少斷奶應激，降低腹瀉率，促進結(jié)腸和盲腸中雙歧桿菌與乳酸桿菌的增殖而抑制大腸桿菌的繁殖，促進腸黏膜的生長，提高斷奶仔豬機體抗氧化能力。

對生長育肥豬而言，銀耳多糖對體重低于20 kg的促生長的效果略低于抗生素 （文敏等，2010；傅祖良等，2009）。這說明銀耳多糖在改善腸道菌群和免疫力方面存在一個適應過程，不如抗生素效果直接快速。然而當體重高于20 kg時，銀耳多糖的促生長效果超過抗生素。

上述研究結(jié)果都表明，銀耳多糖能改善動物的生產(chǎn)性能、腸道黏膜形態(tài)、腸道菌群和機體免疫，并存在劑量相關(guān)效應，當添加量為0.4%時效果最佳。

6 小結(jié)

植物多糖因其獨特的生物學功能，具有廣泛的應用前景。目前雖然對銀耳多糖有了些相關(guān)的研究，但主要是在鼠、兔等動物上的機體免疫方面的研究。銀耳多糖能改善畜禽生產(chǎn)性能，增強畜禽免疫力，添加到飼料中可以在一定程度上取代飼用抗生素而不影響動物生產(chǎn)性能，隨著銀耳多糖的提取工藝的改進，其在畜牧生產(chǎn)中的應用潛力將進一步體現(xiàn)。

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