劉 婕 吳珍紅 楊文超 繆曉青
(福建農(nóng)林大學(xué),福州 350002)
蜂膠是蜜蜂采自多種植物源的樹膠狀物質(zhì)的總稱,是蜜蜂收集、轉(zhuǎn)化而來的一種堅固且具有黏性的、含樹脂的物質(zhì),用于密封蜂巢的空隙,平滑內(nèi)壁以及保護入口、阻擋入侵者。蜜蜂從樹皮和嫩芽的裂口收集樹脂,其通過咀嚼樹脂后加入唾液酶,在添加部分消化物質(zhì)的同時與蜂蠟混合。
美國農(nóng)業(yè)部的“美國蜂蜜等級標(biāo)準(zhǔn)”(USDA,1985)對蜂膠的描述為:蜂膠表示由蜜蜂取自多種植物的膠狀物。蜂膠顏色可能由淺黃色到深棕色有多種變化。未加工蜂膠的成分會隨來源不同而有所變化。總體上說,蜂膠是由50%樹脂,30%蜂蠟,10%芳香油脂,5%花粉和5%其他物質(zhì),包括有機物等成分組成。
人類養(yǎng)蜂的悠久歷史使得對蜂產(chǎn)品的開發(fā)利用非常充分,同時蜂膠的多種特性引起人們的關(guān)注。由于具有防腐、抗菌、抑菌、止血、解痙、抗炎、麻醉以及抗氧化等特性,蜂膠的使用潛能幾乎是無窮的。包括做皮膚病的非處方藥,對于外傷康復(fù)、組織再生、神經(jīng)性皮炎、腿部潰爛、牛皮癬、單純皰疹、瘙癢非常有效,同時能有效對抗皮膚真菌。將蜂膠應(yīng)用于牙膏和漱口水可治療牙齦炎、唇炎和口腔炎。同時也發(fā)現(xiàn)其可用于藥物和化妝品,如面霜、藥膏、洗劑和溶劑中。此外,蜂膠還可作為松香用于修復(fù)弦樂器以及手風(fēng)琴。
蜂膠樹脂有3個來源:蜜蜂采集的植物分泌物,蜜蜂新陳代謝的物質(zhì)及蜂膠加工過程中被引進的物質(zhì)。歷史上曾經(jīng)認為植物分泌物是當(dāng)?shù)氐陌讞?,但是這并不能解釋為什么蜜蜂可以在沒有白楊的赤道上制造蜂膠。
蜂膠是蜂巢的副產(chǎn)品。通常在秋季,采集完蜂蜜之后養(yǎng)蜂人即用工具刮去蜂巢表層收集蜂膠。將蜂膠和蜂蠟混合物裝在盒子、桶、袋子或機器中進行處理。
蜂膠的主要成分為類黃酮,其在植物界普遍存在,并且蜂膠中類黃酮與蜜蜂收集蜂膠的植物中的類黃酮有一定的相關(guān)性。蜂膠也是食品和食品添加劑中常見的成分(GRAS)。
溫帶地區(qū)蜂膠的主要植物來源是白楊屬植物,尤其是歐洲黑楊葉芽的分泌物。因而歐洲的蜂膠含有典型的“白楊葉芽”多酚類物質(zhì):類黃酮苷(黃酮和黃烷酮)、酚酸及其酯。由于白楊屬植物只生長在溫帶,在熱帶和亞熱帶無法生長,所以生長在這些地方的蜜蜂只能尋找其他植物來代替白楊。因此,熱帶地區(qū)的蜂膠在化學(xué)組成上異于以白楊屬植物為來源的溫帶蜂膠。巴西蜂膠具有重大的商業(yè)及研究價值,其主要植物來源是酒神菊樹分泌的樹脂,化學(xué)成分為雙苯丙胺的衍生物:對羥基苯丙烯酸、二萜類、木脂素類及黃酮類等。近年來,古巴蜂膠引起了研究人員的關(guān)注,其主要化學(xué)成分為雙苯丙胺苯甲酮,也就是說古巴蜂膠的組成與歐洲地區(qū)蜂膠及巴西蜂膠都不同。毫無疑問在其他生態(tài)系統(tǒng)中蜂膠的植物來源以及蜂膠的化學(xué)成分將會帶給科學(xué)家們更多的驚奇。
蜂膠是蜜蜂用來防御感染,抗細菌和真菌的主要武器,許多蜂膠活性成分并不相同。白楊屬蜂膠(歐洲蜂膠)主要含黃烷酮類、黃酮、酚酸及其衍生物;酒神菊屬蜂膠(巴西蜂膠)主要含有異戊烯基對羥基苯丙烯酸、二萜類;古巴紅色蜂膠主要含雙苯丙胺苯甲酮等。由于不同產(chǎn)地蜂膠的化學(xué)組成不同,人們通常認為其生物學(xué)活性也不同。令人驚奇的是,蜂膠中不同的化學(xué)成分具有相同的活性類型甚至是相同的活性劑量。因此,結(jié)合其化學(xué)特性以比較不同類型蜂膠的生物活性非常重要。利用化學(xué)成分已知的蜂膠進行醫(yī)學(xué)特性實驗可更好地闡述蜂膠在某些特殊領(lǐng)域的應(yīng)用。
許多文獻記載用化學(xué)分析的方法測試蜂膠樣品的抗菌性和其他生物活性,化學(xué)分析最常用的技術(shù)是氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用分析(GC-MS)和高效液相分析(HPLC)。近來研究者常采用定性定量結(jié)合的方法分析樣品的抗菌活性。使用化學(xué)性質(zhì)已知的蜂膠樣品進行醫(yī)學(xué)特性實驗是研究蜂膠生物學(xué)及醫(yī)學(xué)活性最有意義的方法。
蜂膠的研究熱點主要集中在從中分離出的特定化學(xué)物質(zhì)及其醫(yī)學(xué)特性上。Chen等[1]從臺灣地區(qū)蜂膠中分離出2種新的具有細胞毒性的多酚黃酮類物質(zhì),這2種物質(zhì)對3種癌細胞系均有作用并有潛在的清除自由基(1,1-聯(lián)苯-2苦味基聯(lián)氨,DPPH)的作用。Banskota等[2]從荷蘭蜂膠中分離出對腫瘤細胞增殖有抑制作用的蜂膠活性物質(zhì)——咖啡酸苯乙酯(CAPE)以及幾個結(jié)構(gòu)類似物(包括兩個新的苯乙烯酸三甘油酯)。Usia[3]從中國蜂膠中分離出一系列具有抑制細胞增殖活性的物質(zhì),其大部分為白楊屬蜂膠的組成成分,但也包括2種新的黃酮類化合物:2-甲基丁?;倘~松素及6-苯丙烯柯因。研究者從希臘蜂膠中分離出新的黃烷酮類衍生物7-間異戊二烯基短葉松素,其與7-異戊二烯基松屬素一樣,具有強效的抑制微生物活性。
Banskota等[4]對巴西蜂膠進行了研究,以探索其中的護肝成分和抗幽門螺旋桿菌的組分,結(jié)果發(fā)現(xiàn),具有這些活性的多為多酚類化合物,但一些二萜酸也具有保肝活性。研究者還從巴西蜂膠中分離出一些抗HIV化合物:魯鈍酸的衍生物及一種稱為melliferon的新三萜類化合物。古巴紅蜂膠的異戊二烯苯甲酮具有細胞毒素活性,因此可抑制幾種腫瘤細胞系,還有清除自由基的作用。另有研究者測定了來自巴西、秘魯、荷蘭和中國的9種不同蜂膠的甲醇和水提取液DPPH自由基清除活性、細胞毒性和保肝活性等3個不同的生物活性指標(biāo)。結(jié)果顯示:6種巴西蜂膠和1種中國蜂膠的水提取液DPPH自由基清除活性明顯高于甲醇提取液;而荷蘭蜂膠和秘魯蜂膠甲醇提取液的活性比其更高。所有蜂膠的甲醇提取液比相應(yīng)的水提取液對26-L5鼠結(jié)腸癌和HT-1080人纖維肉瘤細胞具有更強的細胞毒性。巴西蜂膠對D-氨基半乳糖/腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)鼠肝細胞凋亡的保肝作用與研究者對蜂膠的分級是一致的。
Banskota等[6]研究表明,蜂膠可降低小鼠體內(nèi)EAC細胞的活力和體積,延長腫瘤動物的生存時間,改變腫瘤細胞中谷胱甘肽水平。數(shù)據(jù)表明,蜂膠治療無法控制IFN-γ的產(chǎn)生,但其具有免疫調(diào)節(jié)作用,可誘導(dǎo)應(yīng)激小鼠產(chǎn)生IL-4,激發(fā)正常的免疫反應(yīng)。Ewelina Szliszka1等[7]研究了從蜂膠中分離酚類化合物結(jié)合TRAIL誘導(dǎo)配體,對兩個前列腺腫瘤細胞株、激素敏感前列腺癌細胞LNCaP和惡性前列腺癌細胞DU145細胞毒性和細胞凋亡的影響。結(jié)果表明,蜂膠具有顯著增強TRAIL-介導(dǎo)前列腺癌細胞凋亡的作用,并提出蜂膠在預(yù)防前列腺癌方面將起著重要的作用。此外,蜂膠的水提取物對超氧陰離子自由基的清除能力很強。在50mg/ml和100 mg/ml能完全抑制羥基自由基及超氧化物生成。這表明,蜂膠水提取物可作為癌癥、心血管疾病和糖尿病等病的有效藥物。Durdane Kolankaya等研究測定了土耳其歐洲栗蜂膠的化學(xué)成分及其對酒精誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激的防護作用。結(jié)果顯示,蜂膠處理樣品中堿性磷酸酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性明顯下降,乳酸脫氫酶活性則有所增加。因此,土耳其歐洲栗蜂膠對退行性疾病和酒精引起的自由基氧化應(yīng)激反應(yīng)有一定保護作用。
近來,蜂膠研究熱點是對不同地區(qū)或是不同化學(xué)成分的蜂膠進行生物特性的比較研究,但有關(guān)此類的報道不多。Kujumgiev等比較了多個不同產(chǎn)地蜂膠樣品的抗細菌、真菌、病毒活性。結(jié)果顯示,其都具有強烈的抗菌特性。這一研究清楚地表明要研究蜂膠的生物活性,分析不同樣品的化學(xué)組成是必不可少的。
研究者他們對歐洲、巴西及中美洲蜂膠的抗菌活性進行了方差分析,結(jié)果顯示,歐洲蜂膠和巴西蜂膠雖然化學(xué)組成完全不同,但具有相似的生物學(xué)活性。其抗菌活性明顯地高于中美洲蜂膠的抗菌活性,這也表明可以在新的蜂膠資源中尋找新的細胞毒素化合物。Banksota等[10]對巴西、秘魯、荷蘭和中國的蜂膠樣品的細胞毒性、護肝及清除自由基作用進行了比較研究,發(fā)現(xiàn)荷蘭和中國蜂膠具有最強的細胞毒性作用;各個蜂膠樣品均有顯著的保肝活性。Salomao等[11]比較了巴西和保加利亞蜂膠抑制微生物的活性,并使用高溫-高解析氣-質(zhì)色譜技術(shù)(HT-HRGC-MS)對其化學(xué)組成進行了分析,發(fā)現(xiàn)這幾個蜂膠樣品雖然具有完全不同的化學(xué)組成,但卻都有抗南美錐蟲病和一些致病真菌的活性。
Kumazawa等[12]比較了取自14個國家不同蜂膠的抗氧化活性,并通過HPLC、質(zhì)譜分析等方法對這些蜂膠樣品的主要化學(xué)成分進行了測定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗氧化活性強的蜂膠中含有坎菲醇、苯乙烯咖啡酸酯等活性物質(zhì)。此外他們用同樣的方法對日本不同地區(qū)的蜂膠抗氧化性及其化學(xué)成分進行了比較研究,發(fā)現(xiàn)抗氧化活性的強弱與蜂膠中高濃度咖啡酸及苯乙烯咖啡酸酯有關(guān)。
Chen等也進行了相似的研究[13],他們對臺灣地區(qū)不同產(chǎn)地蜂膠對人類黑色素瘤的細胞毒性作用及促凋亡作用進行了比較研究。通過HPLC及分光光度法鑒定蜂膠中的(C-異戊二烯基黃烷酮類化合物)和總酚類化合物的含量。結(jié)果顯示,蜂膠中所含大量的蜂膠素是其促進人黑色素瘤細胞的凋亡及清除自由基的關(guān)鍵因素。
上述比較性的研究對于制訂蜂膠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用具有參考價值。我們希望在將來還會有更多這方面的研究以供參考,這些研究將蜂膠的特定化學(xué)成分與其特殊的醫(yī)學(xué)特性聯(lián)系起來,從而為科學(xué)家對蜂膠的進一步研究提出更多有價值的建議。這將有助于人民大眾更好地利用蜂膠。
[1]Chen Ch,Wu,Chi,Shy H,Lin J.Cytotoxic prenylflavones from Taiwanese propolis.J Nat Prod 2003;66:503-6.
[2]Banskota AH,Nagaoka T,Sumioka LY et al.Antiproliferative activity of the Netherlands propolis and its active principles in cancer cell lines.J Ethnopharm2002;80:67-73.
[3]Usia T,Banskota AH,Tezuka Ya,Midorikawa K,Matsushige K,Kadota Sh.Constituents of Chinese propolis and their antiproliferative activity.J Nat Prod 2002;65:673-76.
[4]Banskota AH.Tezuka Y,Adnyana IK,Midorikawa K,Matsushige K,Kadota S.Hepatoprotective and anti-Helicobacter pylori activities ofconstituents fromBrazilian propolis.Phytomedicine 2001;8:16-23.
[5]Arjun H.Banskota,et al.Cytotoxic,hepatoprotective and free radical scavenging effects of propolis from Brazil,Peru,the Netherlands and China.Journal ofEthnopharmacology72(2000)239-246.
[6]Ana Carolina Pagliarone,Fabiane Missima,Cláudio Lera Orsatti,Tatiana Fernanda Bachiega.Propolis effect on Th1/Th2 cytokines production by acutely stressed mice.Journal of Ethnopharmacology 125(2009)230-233.
[7]Ewelina Szliszka,et al.Ethanolic Extract of Propolis Augments TRAIL-Induced Apoptotic Death in Prostate Cancer Cells.The Author(s)2009.
[8]Durdane Kolankayaa,Gu ldeniz Selmanog lua,Kadriye Sorkuna,Bekir Salihb.Protective effects ofTurkish propolis on alcohol-induced serum lipid changes and liver injury in male rats.Food Chemistry 78(2002)213-217.
[9]Kujumgiev A,Tsvetkova I,Serkedjieva Yu,Bankova V,Christov R,Popov S.Antibacterial,antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins.J Ethnopharmacol 1999;64:235-40.
[10]Banksota AH,Tezuka Y,Adnyana IK et al.Cytotoxic,hepatoprotective and free radical scavenging effects of propolis from Brazil,Peru,the Netherlands and China.J Ethnopharmacol 2000;72:239-46.
[11]Salomao K,Borba CM,Campos LC,Machado DG,Aquino Neto FR,de Castro SL.Chemical composition and microbicidal activity of extracts from Brazilian and Bulgarian propolis.Lett Appl Microbiol 2004;38:87-92.
[12]Kumazawa Sh,Hamasaka T,Nakayama Ts.Antioxidant activity of propolis ofvarious geographic origins.Food Chem2004;84:329-39.
[13]Chen Ch,Weng M.,Wu Ch,Lin J.Comparison of radical scavenging activity,cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources.eCAM 2004;1:175-185.