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        枳椇子、葛花不同配比對乙醇中毒防治功效的影響*

        2011-02-08 07:59:12謝少龍張永斌
        中國中醫(yī)急癥 2011年1期
        關(guān)鍵詞:小鼠血清模型

        謝少龍 潘 敏 張永斌

        廣東省肇慶市端州區(qū)華佗醫(yī)院(廣東肇慶526060)

        在前期枳椇子、葛花不同配比對乙醇中毒防治功效的探討[1]中,筆者發(fā)現(xiàn)了枳椇子、葛花不同配比對乙醇中毒的防治功效有較大的差別,并篩選出最佳的兩個配比處方F2、F6。為了進(jìn)一步研究該處方的藥效,筆者繼續(xù)利用小鼠醉酒模型對最佳配比的醒酒藥劑和市售解酒藥物進(jìn)行藥效比較實驗,分別進(jìn)行解酒藥效和預(yù)防藥效實驗,通過觀察小鼠翻正反射消失[2]和恢復(fù)時間以及對小鼠血清超氧化歧化酶(SOD)[3]、乙醇含量[4]進(jìn)行比較,以確定自制解酒藥劑的效果。

        1 材 料

        1.1 實驗動物 SPF級KM 小鼠300只,體質(zhì)量 18~22g,雌雄各半,動物合格證編號:scxk(粵)2008-0020,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。

        1.2 實驗藥物 醒酒方:由枳椇子、葛花等組成,配成解酒劑F2、F6(華佗醫(yī)院自制,采用枳椇子、葛花按不同的比例,保持其他藥物的劑量不變)。按體表面積進(jìn)行換算,自制醒酒藥小鼠灌胃0.32mL/20g(即建議人攝入量的60倍)。

        1.3 試劑及儀器 生理鹽水,廣東大冢制藥有限公司提供,批號:B081214;體積分?jǐn)?shù)52%瀘州老窖二曲酒,由中國瀘州老窖股份有限公司提供,批號:20080606;SOD試劑盒,由南京建成科技有限公司提供,批號:20081231。722型可見分光光度計(上海光學(xué)儀器進(jìn)出口有限公司生產(chǎn)),美國安捷倫氣相色譜儀6890N(美國安捷倫公司生產(chǎn)),佳美SK-1快速混勻器(江蘇金壇市佳美儀器廠),Precisa-XT220A電子分析天平。

        2 方 法

        2.1 小鼠翻正反射消失和醉倒率 取昆明種小鼠40只,雌雄各半,經(jīng)3d的適應(yīng)飼養(yǎng)后,隨機(jī)分為4組:模型對照組、F2組、F6組和海王金樽組,每組10只,小鼠禁食過夜12h。次日實驗時,F(xiàn)2組、F6組分別以F2、F6自制醒酒方按0.32mL/20g灌胃給藥,空白對照組以生理鹽水0.4mL/20g灌胃給藥,海王金樽組以海王金樽溶解液0.4mL/20g灌胃給藥。20min后各組小鼠以0.32mL/20g給予白酒灌胃,然后開始計時,記錄小鼠醉倒數(shù)、翻正反射消失和恢復(fù)時間、死亡動物只數(shù),計算醉酒潛伏時間和醉酒維持時間。

        2.2 小鼠血中的乙醇濃度測定 取昆明種小鼠80只,雌雄各半,經(jīng)3d的適應(yīng)飼養(yǎng)后,按體質(zhì)量隨機(jī)分為4個組:模型對照組、F2組、F6組和海王金樽組,每組20只。小鼠禁食過夜12h,次日實驗時,F(xiàn)2組、F6組分別以F2、F6自制醒酒方按0.32mL/20g灌胃給藥,模型對照組以生理鹽水0.40mL/20g灌胃給藥,海王金樽組以海王金樽溶解液按0.40mL/20g灌胃給藥,20min后各組小鼠以0.20mL/20g給予白酒灌胃。然后開始計時,各組于白酒灌胃后30、90min各取10只動物摘眼球取血,離心,測定乙醇含量。

        2.3 小鼠血中超氧化歧化酶(SOD)測定 取昆明種小鼠80只,雌雄各半,適應(yīng)性喂養(yǎng)3d,分組、給藥及造模同2.2項下方法。白酒灌胃后開始計時,各組于白酒灌胃后30、90min各取10只動物摘眼球取血,測定SOD酶活力。

        3 結(jié) 果

        3.1 最佳配方與海王金樽片的解酒藥效實驗結(jié)果

        3.1.1 小鼠翻正反射消失和醉倒率結(jié)果 見表1。結(jié)果提示,與模型對照組比較,F(xiàn)2組、F6組、海王金樽組小鼠醉倒?jié)摲鼤r間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);F2組、F6組、海王金樽組小鼠翻正反射消失至恢復(fù)時間(維持時間)較模型組明顯縮短(P<0.05或<0.01)。

        3.1.2 小鼠血中的乙醇質(zhì)量濃度測定結(jié)果 見表2。結(jié)果提示,與模型對照組比較,F(xiàn)2組、F6組和海王金樽組30、90min血清乙醇含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

        表1 各組小鼠解酒效果比較 (min

        表1 各組小鼠解酒效果比較 (min

        與模型對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。下同。

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        表2 各組小鼠血清乙醇濃度比較(mg/mL,

        表2 各組小鼠血清乙醇濃度比較(mg/mL,

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        3.1.3 小鼠血中SOD測定結(jié)果 見表3。30min采血結(jié)果提示:與模型對照組比較,F(xiàn)6劑量組小鼠血清SOD酶活力明顯提高(P<0.05);其余各組小鼠30min血清SOD酶活力差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但F2劑量組小鼠血清SOD酶活力具有提高趨勢。90min采血結(jié)果提示,與模型對照組比較,各組小鼠90min血清SOD酶活力差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但F2組、F6組小鼠90min血清SOD酶活力具有提高趨勢。

        表3 各組小鼠血清SOD活力比較(解酒藥效)(U/mL

        表3 各組小鼠血清SOD活力比較(解酒藥效)(U/mL

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        3.2 最佳配方與海王金樽片的預(yù)防醉酒藥效實驗結(jié)果

        3.2.1 小鼠翻正反射消失和醉倒率結(jié)果 見表4。結(jié)果提示,與模型對照組比較,海王金樽組小鼠醉倒?jié)摲鼤r間明顯廷長(P<0.01),F(xiàn)2組、F6組小鼠醉倒時間有延長趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);F2 組(P<0.05)、F6 組(P<0.01)、海王金樽組(P<0.01)小鼠翻正反射消失至恢復(fù)時間(維持時間)明顯縮短。

        表4 各組防醉效果比較 (min

        表4 各組防醉效果比較 (min

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        3.2.2 小鼠血中的乙醇濃度測定結(jié)果 見表5。30min采血結(jié)果提示:與模型對照組比較,F(xiàn)2組小鼠30min血清乙醇含量明顯降低(P<0.01); F6組、海王金樽組小鼠血清乙醇含量無顯著性差異(P>0.05)。90min采血結(jié)果提示:與模型對照組比較,F(xiàn)6劑量組小鼠90min血清乙醇含量明顯降低(P<0.05);F2組、海王金樽組小鼠血清乙醇含量有降低趨勢,但無顯著性差異(P>0.05)。

        3.2.3 小鼠血中SOD測定結(jié)果 見表6。30min采血結(jié)果提示,與模型對照組比較,F(xiàn)2組、F6組、海王金樽組小鼠血清SOD酶活力無顯著差異(P>0.05)。90min采血結(jié)果提示,與模型對照組比較,F(xiàn)2組、F6組小鼠血清 SOD酶活力無顯著差異 (P>0.05);海王金樽組小鼠90min血清SOD酶活力明顯降低(P<0.05)。

        表5 各組小鼠血清乙醇濃度比較(防醉藥效)(mg/mL

        表5 各組小鼠血清乙醇濃度比較(防醉藥效)(mg/mL

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        表6 各組小鼠血清SOD活力比較(防醉藥效)(U/mL

        表6 各組小鼠血清SOD活力比較(防醉藥效)(U/mL

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        4 結(jié) 論

        小鼠翻正反射實驗、血清乙醇質(zhì)量濃度和SOD活性的結(jié)果均表明,F(xiàn)2、F6及海王金樽片對醉酒小鼠具有解酒功效和激活SOD的能力。研究發(fā)現(xiàn)F2、F6及海王金樽片對小鼠醉酒模型的預(yù)防效果好于治療效果。F2、F6方均以枳椇子、葛花等中藥配制,以選用中醫(yī)古籍中記載有解酒功效的中藥,結(jié)合傳統(tǒng)的解酒方劑變化而成,并主要通過方中主藥枳椇子、葛花的不同配比篩選出解酒和防醉的理想配方。通過同市售解酒產(chǎn)品海王金樽片防治醉酒療效比較,可以認(rèn)為F2、F6與同類產(chǎn)品有相近的防治醉酒的療效,且在解酒功效上F6能明顯提高小鼠SOD酶活力,在預(yù)防醉酒功效上F2組能較快降低小鼠血清乙醇含量,F(xiàn)6組則和緩而明顯降低小鼠血清乙醇含量。研究結(jié)果表明:F2、F6方防治小鼠醉酒療效確切,且F2、F6方均為藥性和緩的中藥,副作用少。因此,在日常預(yù)防醉酒、解醉酒和臨床醫(yī)治酒精中毒使用,值得進(jìn)一步研究。

        [1]謝少龍.枳椇子、葛花不同配比對乙醇中毒防治功效的探討[J].新中醫(yī), 2010,42(12):122-124.

        [2]谷峰,汪德清,鄧心新,等.枳葛片對急性酒精中毒小鼠翻正反射及血液中各項生物化學(xué)參數(shù)的影響[J].中國臨床康復(fù),2005,9(11):134-135.

        [3] 陳劍鋒,郭養(yǎng)浩,孟春,等.酒精中毒小鼠全血SOD酶活測定[J].福州大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,1998,26(2):100-104.

        [4]石樂鳴,劉忠華,愈念恩,等.防醉膠囊對小鼠全血乙醇含量的影響[J].中國藥物依賴性雜志,1998,7(4):229-230.

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