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        黑線倉鼠及其白化突變系血液生理生化值的測(cè)定與分析

        2011-02-01 09:28:18王冬平李桂軍白杰英
        中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2011年7期
        關(guān)鍵詞:差異

        趙 爽,王冬平,劉 曉,李桂軍,曾 林,白杰英

        (軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,北京 100071)

        黑線倉鼠(Cricetulus barabensis)俗稱中國地鼠,屬于哺乳綱/真獸亞綱/嚙齒目/倉鼠科/倉鼠亞科/倉鼠屬的一種動(dòng)物。1919年我國學(xué)者謝恩增首次將黑線倉鼠引入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究,用于肺炎球菌的檢定[1]。雖然在倉鼠家族中黑線倉鼠的使用不如金黃地鼠廣泛,但是黑線倉鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,自身有許多優(yōu)良特性:睪丸大、頰囊發(fā)達(dá)、染色體數(shù)目少、自身傳染性疾病少、脾和腦的重量相對(duì)較大等[2]。

        作者信息在黑線倉鼠的馴育與研究方面開展較早,從1983年開始野生黑線倉鼠的馴化研究,在馴育過程中獲得了黑線倉鼠的白化突變品系,并建立了黑線倉鼠白化突變系(A:CHA)[3]。黑線倉鼠及其白化突變系(以下稱:白化黑線倉鼠)本身是非常理想的疾病模型動(dòng)物。但動(dòng)物本身生理生化值尚未有明確報(bào)道,這使該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生命醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用受到一定的限制。本研究旨在測(cè)定黑線倉鼠及白化黑線倉鼠的血液生理生化正常值,以供研究人員參考。同時(shí),比較黑線倉鼠與白化黑線倉鼠,以及倉鼠與小鼠在血液生理生化值方面的差異,為黑線倉鼠及其白化突變系更好的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

        1 材料和方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        黑線倉鼠及白化黑線倉鼠,體重為18~20 g,每種動(dòng)物雌雄各20只,購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[SCXK-(軍)2007-004]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組編號(hào):雌性黑線倉鼠用BF表示;雄性黑線倉鼠用BM表示;雌性白化黑線倉鼠用WF表示;雄性白化黑線倉鼠用WM表示。

        1.2 儀器設(shè)備和主要試劑

        CX5PRO全自動(dòng)生化測(cè)定儀,由美國 Beckman公司生產(chǎn),所用試劑均為 Beckman公司原裝試劑。血球計(jì)數(shù)為日本光電MEK-7222K全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(應(yīng)用本儀器調(diào)試的動(dòng)物參數(shù)),及配套試劑。

        1.3 血液樣品制備

        眼眶靜脈取血,EDTA-2K抗凝血及全血,抗凝血用于血液生理指標(biāo)測(cè)定。全血5000 rpm離心2 m in,吸取上清液,用于血清生化指標(biāo)測(cè)定。

        1.4 血液生理生化值測(cè)定

        生理值:白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞比積(HCT)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、血小板比積(PCT)、血小板體積分布寬度(PDM)。白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)及百分比:嗜堿性粒細(xì)胞(BAS)、嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)、中性粒細(xì)胞(NEUT)、淋巴細(xì)胞(LYM)、單核細(xì)胞(MON)。

        生化值:總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、ALB/GLB、總膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LD)、淀粉酶(AMY)、AST/ALT、總膽紅素(TBIL)、尿素氮(BUN)、尿酸(URIC)、肌酐(Crea)、BUN/Crea、磷(P)、鈉(Na)、鉀(K)、氯(Cl)、鈣(Ca)、鎂(Mg)、二氧化碳(CO2)、陰離子間隙(AG)、滲透壓(OSM)。

        1.5 數(shù)據(jù)分析

        用SPSS10.0軟件包對(duì)所測(cè)得的數(shù)據(jù)進(jìn)行 t檢驗(yàn)分析。

        2 結(jié)果

        2.1 血液生理值測(cè)定

        測(cè)試結(jié)果顯示黑線倉鼠的嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值、嗜堿性粒細(xì)胞絕對(duì)值、嗜酸性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)差異顯著(P<0.05);白化黑線倉鼠的單核細(xì)胞的絕對(duì)值、嗜堿性粒細(xì)胞的絕對(duì)值、單核細(xì)胞絕對(duì)值差異顯著。雄性黑線倉鼠和白化黑線倉鼠的WBC、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值、單核細(xì)胞絕對(duì)值、嗜堿性粒細(xì)胞絕對(duì)值、淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù)、單核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)、中性粒細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)、嗜堿性粒細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)差異顯著;雌性黑線倉鼠和白化黑線倉鼠的平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、嗜堿性粒細(xì)胞絕對(duì)值差異顯著。(見表1)

        2.2 血清生化值測(cè)定

        測(cè)試結(jié)果顯示黑線倉鼠的血糖、總蛋白、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、肌酐、差異顯著(P<0.05),谷草轉(zhuǎn)氨酶、氯、二氧化碳和滲透壓存在極顯著差異(P<0.01);白化黑線倉鼠的乳酸脫氫酶、磷、鈉和鈣差異顯著(P<0.05)。雌性黑線倉鼠和白化黑線倉鼠的血糖、堿性磷酸酶和陰離子間隙差異顯著(P<0.05),其滲透壓、鈣、氯、鈉間差異極顯著(P<0.01);雄性黑線倉鼠和白化黑線倉鼠的二氧化碳差異顯著(P<0.05),其鈉、尿酸、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶、膽固醇和總蛋白間異極顯著(P<0.01)。(見表2)

        表1 黑線倉鼠及白化黑線倉鼠血液生理值測(cè)定Tab.1 Blood biochemical parameters in Cricetulus barabensis and Albinomutant

        表2 黑線倉鼠及白化黑線倉鼠血清生化值測(cè)定Tab.2 Serum biochem ical parameters in Cricetulus barabensis and Albino mutant

        注:P<0.05,0.01表示黑線及白化倉鼠本身雌雄之間差異顯著或極顯著P<0.05,0.01表示黑線及白化倉鼠之間比較差異顯著或極顯著。(雌雄分別比較)。

        Note:P<0.05,0.01means there is significant different between male and female in Cricetulus barabensis and Albino mutant;P* <0.05,0.01means there is obvious different between Cricetulus barabensis and Albinomutant.(Compared male and female respectively)

        3 討論

        實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液生理生化值是生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)指標(biāo),是臨床醫(yī)療和科學(xué)研究的重要依據(jù)。不同品系(種)的動(dòng)物血液正常生理生化值存在較大差異[4-7],每個(gè)品系(種)的血液指標(biāo)都有其相對(duì)穩(wěn)定值,這也是區(qū)別各品系(種)的一個(gè)指標(biāo)[8]。黑線倉鼠及其白化突變系出自同一品系,具有相同的遺傳背景[3],其本質(zhì)區(qū)別可通過分子標(biāo)記等技術(shù)進(jìn)行區(qū)別和鑒定。這兩種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)研究中卻大有用途,它們是一對(duì)天然的對(duì)照組合,對(duì)于研究毛發(fā)發(fā)生機(jī)制、生長因子及其受體機(jī)制、白化機(jī)理、毛囊結(jié)構(gòu)等具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì),測(cè)定其生理生化值也將有助于其研究和應(yīng)用。

        黑線倉鼠與白化黑線倉鼠大部分生理生化值與大、小鼠無明顯差異[5,6],同種動(dòng)物雌雄個(gè)體間在少數(shù)幾個(gè)指標(biāo)存在一定差異,如嗜堿性粒細(xì)胞的絕對(duì)值、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、血糖等,這可能與性別有關(guān)。而黑線倉鼠與其白化突變系之間的差異很值得注意:兩者雌雄間的嗜堿性粒細(xì)胞絕對(duì)值、堿性磷酸酶均存在極顯著差異,這或許與白化黑線倉鼠的變異有一定關(guān)系,這兩個(gè)指標(biāo)有助于將白化黑線倉鼠作為特殊動(dòng)物模型的開發(fā)。另一個(gè)值得注意的特點(diǎn)是:黑線倉鼠與白化黑線倉鼠的血小板計(jì)數(shù)(PLT)均高于其它動(dòng)物2~3倍[5-7]。血小板(PLT)增多是一種臨床常見的血液學(xué)表現(xiàn),血小板量和質(zhì)的異常均可導(dǎo)致岀血性疾?。?-10]。而黑線倉鼠與白化黑線倉鼠血小板的異常表現(xiàn)可能有助于其作為血液病學(xué)研究的良好模型,此項(xiàng)研究正在進(jìn)一步證實(shí)中。

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